viii-2 : électrophysiologie visuelle chez des animaux selectionnes comme modeles de

29 Pages·2014·1.46 MB·French

Œil et Physiologie de la Vision - VIII-2
VIII-2 : ÉLECTROPHYSIOLOGIE VISUELLE CHEZ DES
ANIMAUX SELECTIONNES COMME MODELES DE
RETINOPATHIES HUMAINES
Allison L. Dorfman
Suna Jung
Anna Polosa
Julie Racine
Pia Wintermark
Pierre Lachapelle
Pour citer ce document
Allison L. Dorfman, Suna Jung, Anna Polosa, Julie Racine, Pia Wintermark et Pierre
Lachapelle, «VIII-2 : ÉLECTROPHYSIOLOGIE VISUELLE CHEZ DES ANIMAUX
SELECTIONNES COMME MODELES DE RETINOPATHIES HUMAINES», Oeil et physiologie
de la vision [En ligne], VIII-La vision et son exploration chez l'animal, mis à jour le
04/04/2014, URL :
http://lodel.irevues.inist.fr/oeiletphysiologiedelavision/index.php?id=244,
doi:10.4267/oeiletphysiologiedelavision.244

Plan
Introduction
Critères et modes de choix d’un animal modèle
Essais thérapeutiques associés
Sélection des modèles
Pour la rétinopathie induite du prématuré
Pour la rétinopathie pigmentaire et la DMLA
Mécanismes physiopathologiques : critères pour le choix du modèle
Le rat nouveau-né : modèle pour le stress oxydatif
Le cochon d’Inde : modèle pour la rétine humaine à cônes
Le cochon d’Inde albinos : modèle pour la CSNB de type I
Techniques d’explorations par électrophysiologie
L’ERG flash
Préparation de l’animal
Stimulations
Recueil du signal
L’ERG ON-OFF
Stimulations
Recueil du signal
Analyse ERG flash & ERG ON-OFF
ERG flash
ERG ON-OFF
L’ERG multifocal
Préparation de l’animal
Stimulations
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Œil et Physiologie de la Vision - VIII-2
Recueil et traitement du signal
Réponses issues du système des cônes ou du système des bâtonnets
Potentiels évoqués visuels par flash (PEV flash) et recueil couplé ERG flash-PEV flash binoculaires
Méthode
Réponses ERG flash PEV flash binoculaires
Rétinopathie du prématuré
Rappel sur la vascularisation de la rétine humaine
Développement normal
Développement chez le prématuré
Le rat : modèle de ROP
Protocole d’induction de la rétinopathie par oxygène
Résultats à J+30
Variations histologiques de la rétine à J+30
Variations fonctionnelles de la rétine à J+30
Variations immuno-histo-chimiques
Synthèse
Rétinopathie induite par la lumière
Induction de la rétinopathie à la lumière
Exposition de l’animal à la lumière
Résultats chez le rat albinos
Mécanisme de la rétinopathie induite à la lumière
Déficience de la rhodopsine
Dégénérescence des bâtonnets suivie de celle des cônes
Déficience de type rod-cone comme chez l’humain
Animal modèle : cochon d’Inde albinos mutant
Comportement à la naissance : normal
ERGs à la naissance : anormaux
Evolution de l’ERG flash avec l’âge
Caractéristiques histologiques et histochimiques de la rétine
Points forts de ce modèle CSNB/Rod-cone dystrophy
Conclusion

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Œil et Physiologie de la Vision - VIII-2
Texte intégral
Chaque co-auteur a également contribué à ce chapitre
Introduction
Les animaux modèles sont communément utilisés pour mieux comprendre la
pathogenèse de divers types de rétinopathies humaines, d’autant plus que les maladies
rétiniennes sont parmi les principales causes de cécité (Fletcher et al., 2011). Les
recherches menées dans notre laboratoire sont depuis longtemps axées sur la
caractérisation des processus physiopathologiques impliqués dans diverses maladies
rétiniennes et sur les mécanismes moléculaires complexes à l’origine de celles-ci.
Critères et modes de choix d’un animal modèle
Les études commencent souvent par une sélection attentive d’un animal modèle. Pour
être approprié, il faut en premier lieu, examiner le niveau de maturité de la rétine à la
naissance puis, entre autres, la taille de la portée, le coût et la durée de la gestation. Une
fois le modèle établi, il faut analyser de façon détaillée la vascularisation rétinienne par
l’utilisation des rétines étalées flat mounts, la cytoarchitecture rétinienne à l’aide de
coupes ultra minces de rétine, de cryosection et de techniques
d'immunohistochimie, l’expression des protéines rétiniennes par l'utilisation de
techniques d’immunobuvardage, puis, évaluer la fonction rétinienne par ERG flash et ERG
multifocal et les capacités de transmission du signal rétinien le long des voies visuelles
par les potentiels évoqués visuels. L’ensemble de ces paramètres permet d’entrevoir la
séquence des évènements qui sont à l’origine de la rétinopathie donnée.
Essais thérapeutiques associés
Des essais thérapeutiques peuvent aussi être menés en parallèle à l’aide de nouvelles
substances administrées par voie intravitréenne, sous-cutanée, intrapéritonéale ou
topique. Leurs effets sont testés sur les paramètres mentionnés ci-dessus et participent à
la mise au point de traitement pour ces maladies rétiniennes.
Sélection des modèles
Au cours de la dernière décennie, notre laboratoire a mis l'accent sur deux modèles de
rongeurs différents pris en période néonatale et soumis, en période post natale, à un
stress oxydatif (Lachapelle et al., 1999), (Dembinska et al., 2001), (Dembinska et al.,
2002), (Dorfman et al., 2006), (Joly et al., 2006a), (Joly et al., 2006b), (Joly et al.,
2007), (Dorfman et al., 2008), (Dorfman et al., 2011).
Pour la rétinopathie induite du prématuré
La rétinopathie induite par l'oxygène (RIO) chez un rat nouveau-né est utilisée comme
modèle humain de la rétinopathie du prématuré (RDP). Elle permet de mieux comprendre
ce qui se passe chez les nourrissons nés prématurément et exposés à des niveaux élevés
d'oxygène pour compenser leur fonction pulmonaire immature.
Pour la rétinopathie pigmentaire et la DMLA
La rétinopathie induite par la lumière (RIL) ressemble à bien des égards aux
rétinopathies humaines, y compris la rétinite pigmentaire (RP) et la dégénérescence
maculaire liée à l'âge (DMLA).
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Œil et Physiologie de la Vision - VIII-2
Mécanismes physiopathologiques : critères pour le choix
du modèle
La rétinopathie induite par l’oxygène est souvent considérée comme une maladie
vasoproliférative avec déficiences structurelles et fonctionnelles qui se produisent
principalement dans la rétine interne (Reynaud & Dorey, 1994), (Penn et al., 1994),
(Madan & Penn, 2003), (Hardy et al., 2005), (Hardy et al., 2005).
La rétinopathie induite par la lumière se caractérise, quant à elle, par une
dégénérescence de la rétine externe, principalement au niveau de la couche des
photorécepteurs, en rapport avec une rhodopsine déficiente. Il en résulte des dommages
structurels et fonctionnels majeurs (Noell et al., 1966), (Penn & Thum, 1987), (Penn et
al., 1989), (Li et al., 2001), (Li et al., 2003).
Le rat nouveau-né : modèle pour le stress oxydatif
Le rat est une espèce nidicole dont la rétine est immature à la naissance à terme. C’est
donc un bon modèle pour le suivi de la maturation rétinienne depuis le début de
l'exposition à des stress oxydatifs exogènes soit par des niveaux élevés d'oxygène
(comme modèle de la rétinopathie du prématuré induite par l’oxygène) soit par des
niveaux intenses de lumière pour induire une rétinopathie à la lumière, modèle de
rétinopathie pigmentaire ou DMLA. Il est ainsi possible de suivre l’évolution de ces rétines
sous ces stress oxydatifs et d’en caractériser les différents processus
physiopathologiques qui conduisent à l’involution de la rétine externe ou interne.
Le cochon d’Inde : modèle pour la rétine humaine à cônes
Contrairement au rat nidicole, le cochon d’Inde est une espèce précociale dont la rétine
est mature à terme. C’est un bon modèle pour l'étude de l'ERG humain. En utilisant le
cochon d’Inde albinos Hartley, nous avons non seulement montré que, à la naissance, sa
rétine a une structure et un fonctionnement rétinien semblables à ceux du cochon d’Inde
adulte avec une maturation rétinienne similaire à celle de l’humain (Racine et al., 2008),
mais aussi que son ERG photopique a les mêmes caractéristiques que l’ERG photopique
humain (Rosolen et al., 2004), (Racine et al., 2005).
D'autres modèles ont été découverts alors qu’ils se sont produits de façon spontanée.
Le cochon d’Inde albinos : modèle pour la CSNB de type I
En 2003, au cours de tests électrophysiologiques pratiqués en routine sur le cochon
d’Inde, nous avons découvert dans une population de cobayes Hartley albinos, des
animaux qui présentaient, à l’état naturel, un trouble rétinien similaire à la cécité
nocturne (Racine et al., 2003).
C’est par un accouplement consanguin accidentel entre un mâle et une femelle issus
d’une même portée que le premier cochon d’Inde mutant a été conçu. De cette union,
sont nés 4 bébés dont un seul présentait des électrorétinogrammes anormaux. Grâce à
un accouplement sélectif, nous avons pu reproduire ce phénotype encore 80 fois et ce,
sur plus de 14 générations. Sur 81 cochons d’Inde affectés, 35 étaient des mâles, 43 des
femelles et 3 autres ont été euthanasiés avant l’identification de leur sexe.
En examinant le pédigré sur 14 générations, il apparaît que cette anomalie est transmise
sur un mode autosomique récessif avec des caractéristiques qui ressemblent étroitement
aux formes humaines d’héméralopie congénitale essentielle stationnaire (CSNB).
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Œil et Physiologie de la Vision - VIII-2
Techniques d’explorations par électrophysiologie
Nous présentons ici quelques techniques électrophysiologiques actuellement utilisées
dans notre laboratoire qui nous permettent d’évaluer la fonction rétinienne et le devenir
du signal rétinien le long des voies visuelles. Elles sont importantes pour caractériser ces
signaux. Elles sont applicables aux rats, modèles de la rétinopathie du prématuré (induits
par l’oxygène) ou modèles de rétinopathie pigmentaire et DMLA (induits par la lumière)
ainsi qu’au cochon d’Inde, modèle spontané d’héméralopie congénitale essentielle.
Toutes les expérimentations animales réalisées dans notre laboratoire sont approuvées par l'Institut de
recherche de l'Hôpital de l'Université McGill de Montréal pour enfants et conformes aux recommandations du
conseil canadien de protection des animaux. Elles sont menées en conformité avec les recommandations de
l’ARVO pour l'utilisation des animaux en recherche visuelle et ophtalmologique.
L’ERG flash
L’électrorétinogramme flash (ERG flash) est une réponse globale des cellules rétiniennes
à une stimulation lumineuse brève. Les signaux recueillis peuvent l’être de manière non
invasive ; c’est donc une technique précieuse non seulement chez l'homme mais aussi
chez les animaux. Elle permet de caractériser le fonctionnement physiologique de la
rétine normale et pathologique (Hebert & Lachapelle, 2003).
Préparation de l’animal
Les enregistrements des ERG flash standards plein champ sont réalisés chez le rat et le
cochon d’Inde anesthésiés -sous un éclairage de faible lumière rouge- par une injection
intramusculaire de kétamine (85 mg/kg) et de xylazine (5 mg/kg) à la suite d'une
période de 12 heures d'adaptation à l'obscurité. Leurs pupilles sont ensuite dilatées avec
1 à 2 gouttes de Mydriacyl 1% ; l'animal est alors placé sur le côté, dans une chambre
d'enregistrement de notre conception, qui inclut à la fois le stimulateur flash et la lumière
du fond adaptant (figure VIII-2-1).
Stimulations
Pour la courbe luminance-réponse
Les courbes de luminance-réponse scotopiques sont évoquées par des flashs de lumière
achromatique couvrant une gamme de 6 unités logarithmique par pas de 0,3 unité
logarithmique, allant de -6,3 à 0,6 log cd.s.m-2.
La réponse (c'est-à-dire l’ERG flash) est obtenue après stimulation (en moyenne) de trois
à cinq flashs, délivrés à un intervalle de 9.60 secondes.
L'utilisation de flashs d’intensité croissante dans une ambiance scotopique va générer
une onde-b d’amplitude progressivement croissante. Le « rod Vmax » est l’amplitude
maximale de la réponse du système des bâtonnets que l'on obtient en absence de toute
contribution des cônes ; elle se produit pour une intensité inférieure ou égale à 2,4 log
cd.sec.m-2 (Naka & Rushton, 1966).
En augmentant encore l'intensité du flash au-delà de ce point, on observe une nouvelle
aumgnentation d'amplitude de l'onde-b : à la réponse du système des bâtonnets,
s’ajoute celle du système des cônes. Chez les rongeurs, l'onde-a n’apparaît qu’à la suite
d’une stimulation flash suffisamment intense pour que les deux systèmes (des bâtonnets
et des cônes) répondent conjointement donnant une réponse dite mixte (ou mixed-
response), généralement pour une intensité de 2,4 log cd.sec.m-2.
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Œil et Physiologie de la Vision - VIII-2
Pour la réponse photopique
Les réponses du système des cônes sont obtenues dans des conditions d’ambiance
photopique ; elles sont évoquées par la répétition d’environ 20 flashs de lumière
achromatique de 0,9 log cd.s.m-2, délivrés à un intervalle d’une seconde alors que la
rétine de l’animal a été préalablement adaptée à un fond lumineux de 30 cd.m-2 durant
plus de 15 minutes : elles sont ensuite sommées et moyennées pour obtenir l’ERG
photopique. Contrairement aux réponses enregistrées dans ces conditions chez les
humains, les souris et les cochons d’Inde par exemple, la réponse photopique enregistrée
chez le rat ne présente pas d’onde-a, mais se compose uniquement d’une onde-b
(Rosolen et al., 2004), (Racine et al., 2005).
Recueil du signal
Appareillage utilisé
Le système AcqKnowledge (Biopac MP 100 WS; BIOPAC System Inc., Goleta, CA, USA)
est utilisé pour l’acquisition des signaux. Dans notre laboratoire, l’enregistrement se fait
simultanément pour l’ERG flash (X10.000, bande passante 1-1000 Hz, 6 dB
d'atténuation, préamplificateurs analogiques P511 Grass Instruments) et les potentiels
oscillatoires (OPs) (X50.000, bande passante 100-1000 Hz, 6 dB d'atténuation,
préamplificateurs analogiques P511 Grass Instruments).
Electrodes
L’ERG flash plein champ est enregistré chez les rongeurs entre une électrode active
posée à la surface de la cornée et une électrode de référence placée dans la bouche ;
l’électrode de masse est insérée dans la queue (figure VIII-2-1B et 1D, respectivement).
Electrode active
Nous utilisons une fibre DTL (Dawson et al., 1979) (fil de nylon revêtu d'argent
conducteur 27/7 X-Static ; Sauquoit Industries, Scranton, PA) comme électrode active
posée à la surface de la cornée et maintenue en place par une solution gélatineuse de
2% de méthylcellulose (solution Gonioscopic ; Alcon Laboratories, Fort Worth, TX) qui
prévient aussi le dessèchement cornéen.
Electrodes de référence et de masse
Chez le rat et le cochon d’Inde, l'électrode de référence est une cupule placée dans la
bouche (modèle E6GH, Grass Instruments, Quincy, MA). L’électrode de masse est insérée
en sous-cutanée dans la queue chez le rat ou dans la nuque chez le cochon d’Inde
(modèle E2 ; Grass Instruments).
L’ERG ON-OFF
Stimulations
Les ERG ON-OFF sont générés en réponse à des échelons de lumière achromatique de
125 cd.m-2 (lampe halogène, 12 V, 100 W) de longue durée (200 ms ou plus), délivrés
sur un fond de niveau lumineux 15 cd.m-2 (fond de niveau lumineux photopique). Ces
échelons lumineux sont générés par un déclencheur électromagnétique (obturateur
électronique Uniblitz, Vincent Associates, Rochester, NY).
Recueil du signal
Comme l’ERG flash, les ERG ON-OFF sont recueillis chez notre cochon d’Inde modèle
avec le système Acqknowledge Biopac MP 100 (Biopac MP 100 WS, BIOPAC System Inc.,
Goleta, CA, USA, bande passante : 1-1000 Hz, X10 000, préamplificateur Grass P511K).
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Œil et Physiologie de la Vision - VIII-2
Analyse ERG flash & ERG ON-OFF
Après l'enregistrement des ERG, leurs paramètres sont analysés c'est-à-dire qu’on
mesure les amplitudes et temps de culmination de chaque onde.
ERG flash
Onde-a, onde-b
L'amplitude de l’onde-a, négative, est mesurée entre la ligne de base et son minimum
(négatif), tandis que l'amplitude de l'onde-b est mesurée entre le minimum de l’onde-a
et le maximum de l'onde-b.
Photopic negative-response
La Photopic negative-response (PhNR) est calculée de la ligne de base et la dépression
négative qui suit l'onde-b.
ERG ON-OFF
Onde-a, onde-b-ON
Une moyenne de 20 réponses est recueillie avec un intervalle entre stimulus de 1.024
secondes. L'onde-a de l’ERG ON-OFF est mesurée de la ligne de base et le premier
minimum négatif et l'onde-b-ON du minimum négatif au sommet de la première onde
positive de l'ERG.
Onde-OFF
Les petites oscillations de la réponse OFF sont mesurées entre de la dépression
précédente jusqu'à leur sommet et sont ensuite additionnées : c’est la réponse OFF
(Racine et al., 2003).
L’ERG multifocal
Comme décrit ci-dessus, l'ERG flash est une technique utile pour évaluer la réponse
globale rétinienne après stimulation de toute sa surface par des flashs.
L’ERG multifocal ou ERG mf est une autre méthode qui permet la représentation de
l’ensemble de réponses obtenues après une succession de stimulations localisées, le tout
couvrant les 40 à 50 degrés centraux (Hood, 2000).
Les ERG mf sont régulièrement enregistrés sur les animaux modèles utilisés dans notre
laboratoire.
Préparation de l’animal
Brièvement, après l’anesthésie, les animaux sont placés sur une table d'enregistrement
dans une pièce faiblement éclairée (figure VIII-2-2).
La caméra de stimulation du fond de l’oeil (VerisTM Eye Monitoring System Stimulator) est
positionnée de façon à ce que le centre de la matrice de stimulation soit aligné avec le
centre de la pupille, comme observé sur le moniteur de l’ordinateur.
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Œil et Physiologie de la Vision - VIII-2
Stimulations
La matrice de stimulation visuelle est composée de 37 hexagones de taille égale (Veris,
5.1 Electro-Diagnosis Imaging, San Mateo, CA). Chaque hexagone alterne de façon
indépendante et pseudo-aléatoire (séquence-m) à une fréquence de 75 Hz, entre une
faible luminance (noire ~ 0 cd.m-2) et une luminance élevée (achromatique ~ 200 cd.m-
2), sur un fond adaptant photopique de 100 cd.m-2. La durée totale de la séquence-m est
de 4 minutes.
La luminance moyenne de la stimulation globale est toujours constante car, à n’importe
quel moment, la moitié des hexagones est achromatique tandis que l’autre moitié est
noire.
Recueil et traitement du signal
Électrodes
Les ERG issus de chaque œil (monoculaires) sont ensuite enregistrés entre une électrode
active qui est une boucle en tungstène en contact avec le limbe cornéen (figure VIII-2-
2B) et une électrode de référence. L’électrode de référence et celle de masse sont
placées de façon identique à celles utilisées pour l'enregistrement de l’ERG flash comme
décrit ci-dessus (figure VIII-2-2C et 2D, respectivement).
Traitement du signal
Le signal est amplifié 100.000 fois avec une bande passante de 10-100 Hz, pendant une
durée d'enregistrement de 4 minutes. L'analyse des données est limitée au kernel 1 ou
de premier ordre.
Réponses issues du système des cônes ou du système des
bâtonnets
L’onde standard de l'ERG mf est constituée d'une composante négative initiale (N1),
suivie d'une déflexion positive (P1) et d’une seconde composante négative (N2).
Dans la pratique clinique, les ERG mf sont généralement utilisés pour évaluer la fonction
du système des cônes, en particulier ceux qui sont situés dans la zone maculaire c'est-à-
dire la rétine centrale.
Cependant, des ajustements dans les paramètres du stimulus (c'est-à-dire une fixation
excentrée, une séquence-m plus lente, etc.) permettent l’enregistrement des réponses
du système des bâtonnets situés en périphérie (Hood et al., 1998), (Nusinowitz et al.,
1999), (Ball & Petry, 2000).
Potentiels évoqués visuels par flash (PEV flash) et
recueil couplé ERG flash-PEV flash binoculaires
Les potentiels évoqués visuels sont couramment utilisés pour évaluer l'intégrité
fonctionnelle de la voie visuelle post-rétinienne, à condition d’avoir vérifié que le système
des cônes fonctionne normalement. Par conséquent, il est important d’associer à tout
enregistrement de PEV, un ERG flash (séquence photopique) afin d'exclure un
dysfonctionnement rétinien qui pourrait être la source de PEV anormaux.
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Œil et Physiologie de la Vision - VIII-2
Initialement, les enregistrements des ERG flash et PEV flash effectués dans notre
laboratoire étaient réalisés par stimulation monoculaire et recueil des réponses
monoculaires (Sirinyan et al., 2006). Récemment, nous avons effectués des stimulations
binoculaires avec, pour l’ERG flash, recueil simultané des réponses mais issues
séparément de chaque œil. Nous avons dénommé ce type de recueil : ERG flash
binoculaires.
Note : Les PEV flash binoculaires correspondent, comme chez l’homme, à la réponse évoquée visuelle corticale
issue des signaux générés par les deux yeux en même temps.
Cette méthode est particulièrement intéressante pour l’ERG flash, surtout pour les
modèles qui présentent des pathologies monoculaires ou en cas d’injections monoculaires
d'agents pharmacologiques. Il est ainsi possible d’enregistrer simultanément les réponses
issues de chaque œil séparément et comparer les résultats électrophysiologiques entre
l’œil atteint ou traité et ceux de l’œil sain ou témoin.
Méthode
Ces enregistrements binoculaires sur les rongeurs sont effectués en utilisant un système
équipé d’un stimulateur Ganzfeld. Les techniques sont comparables à celles utilisées pour
les enregistrements des ERG flash (monoculaires) décrites ci-dessus, avec de légères
modifications.
Préparation de l’animal
Suite à l’anesthésie et à la dilatation des pupilles (telles que décrites ci-dessus) les
animaux sont placés sur une plateforme en position couchée (figure VIII-2-3A).
Electrodes de recueil pour l’ERG flash binoculaire
Comme décrit ci-dessus pour l’ERG flash monoculaire, on utilise, pour l’ERG flash
binoculaire, deux électrodes actives DTL placées sur chacune des cornées et maintenues
par du méthylcellulose à 2% (solution Gonioscopic ; Alcon Laboratories, Fort Worth, TX)
qui évite le dessèchement de la cornée (figure VIII-2-3D). On peut également ajouter
une lentille de contact transparente sur chacune des cornées (Saszik et al., 2002) pour
assurer un meilleur contact entre l’électrode fil DTL et les cornées, mais ce n'est pas
absolument nécessaire.
Il y a une seule électrode de référence - cupule en or- placée sous la langue de l’animal.
L’électrode de masse est une aiguille insérée en sous cutanée dans sa queue (figure VIII-
2-3B et 3C).
Electrodes de recueil pour les PEV flash
On utilise soit une électrode active de type aiguille insérée en sous-cutanée et placée sur
la ligne médiane en regard du cortex occipital, soit deux électrodes aiguilles placées de
part et d’autre de la ligne médiane en regard de chaque zone occipitale, entre l’oreille et
la ligne médiane (figure VIII-2-3E). Une fois que toutes les électrodes sont placées et
sécurisées, la plateforme est glissée à l’intérieur de la coupole Ganzfeld de sorte à ce que
la tête de l’animal soit totalement à l’intérieur de la coupole.
L’animal peut aussi être préparé pour les enregistrements simultanés des ERG flash et
PEV flash.
Appareillage et stimulations
Le système utlisé pour ces enregistrements simultanés (ERG flash et PEV flash
binoculaires) est le LKC UTAS-E3000 (LKC Systems Inc., Gaitherburg, MD, USA) avec le
logiciel EMWIN pour Windows™.
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Œil et Physiologie de la Vision - VIII-2
Les caractéristiques des stimulations utilisées pour l’ERG flash binoculaire sont les
mêmes que celles décrites ci-dessus pour les ERG flash monoculaires. Les
caractéristiques des stimulations utilisées pour les PEV flash binoculaires sont des flashs
de lumière achromatique (0.9 log cd.s.m–2) délivrés sur un fond lumineux adaptant de 30
cd·m–2 et répétés 100 fois, toutes les secondes. Les PEV flash résultent d’un traitement
des signaux avec sommation/moyennage de 100 réponses filtrées avec une bande
passante entre 5 et 30 Hz.
Réponses ERG flash PEV flash binoculaires
ERG flash binoculaire/monoculaire
Les ERG flash scotopiques (figure VIII-2-4A) ou photopiques (figure VIII-2-4B)
binoculaires et monoculaires sont comparables voire superposables : similitude des
morphologies, amplitudes et temps de culmination des ondes.
PEV flash binoculaires
Un PEV flash enregistré avec une seule électrode médiane est montré sur la figure VIII-
2-4C ; il présente une onde positive culminant vers 100 ms (dite onde P100). Son
amplitude est mesurée entre le creux de la première onde négative (N) qui précède
immédiatement l’onde P100 et le sommet de l’onde P100.
Les ERG flash et PEV flash binoculaires peuvent être enregistrés de manière fiable et
reproductible chez les rongeurs en utilisant le stimulateur Ganzfeld. Pour que les
résultats soient optimaux, il faut veiller à bien mettre en place l’ensemble des électrodes
actives et de référence et bien positionner la tête de l'animal, ces facteurs pouvant
modifier considérablement l'amplitude des ondes.
Remarque : PEV flash monoculaires
Des PEV flash monoculaires peuvent aussi être enregistrés à l’aide de deux électrodes
actives placées de chaque côté du cortex occipital tandis que l’œil droit puis l’oeil gauche
sont stimulés successivement. Couplé à l’enregistrement des ERG flash monoculaires,
cette technique peut être utile pour l’étude des animaux modèles dont les deux yeux
peuvent fonctionner ou évoluer différemment. Elle permet une comparaison directe des
résultats entre les deux yeux, de manière rapide et efficace.
Rétinopathie du prématuré
Cette rétinopathie est habituellement binoculaire et peut, dans les cas les plus sévères,
conduire à la cécité. Son origine implique la vascularisation rétinienne (Patz & Palmer,
1989), (Patz A. & Payne J.W., 1998), (Moore, 1990), (Smith, 2002), (Hutcheson, 2003),
(Chen & Smith, 2007).
Rappel sur la vascularisation de la rétine humaine
Développement normal
Le développement de la vascularisation rétinienne commence chez le fœtus humain au
cours du quatrième mois de gestation (Ashton, 1970) à partir du disque optique et migre
vers le pôle postérieur ; elle se propage ensuite progressivement en périphérie vers l'ora
serrata. La prolifération et la maturation subséquente de ces vaisseaux est complète à 36
semaines de gestation en rétine nasale et entre la 40ième et 45ième semaine de gestation
en rétine temporale (Michaelson, 1948). Par conséquent, la vascularisation de la rétine
temporale d’un bébé né à terme, peut être encore immature.
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