Table Of Content昆 虫 学 报 !"#$%&#’(’)’*+"$,+&+"$，!"#$%%&，’（% ’）：()’*((% +,,-%(’(./$0/
"""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""
家蚕化学诱变剂及诱导突变体的筛选
林 英，陈冬妹，代方银，杨 瑜，向仲怀，夏庆友!
（西南大学蚕学与生物技术学院，农业部蚕桑学重点开放实验室，重庆 (%%&3/）
摘要：在家蚕 -’(./0(’1+基因组计划完成之后，其功能基因组研究成为该领域的最重要课题。突变体是功能基因
组学研究的重要材料，因此，通过人为诱导获取大量的突变系统是及其重要的手段。本研究用化学诱变剂 8-P、
!-P、48,、’.2P、8!,诱导处理家蚕标准品种13%7，筛选获得了非滞育红卵，长圆筒茧、小茧、丝胶茧及绵茧突变体，
致死突变体及无鳞毛蛾翅突变体。结果还表明：!-P、48,诱变家蚕的突变效率高，注射翅原基比腹部更方便且效
果好，化学诱导雄体比雌体的效果好；在时期上，注射蛹和蛾都有诱导效果。上述突变体大多为致死性突变，推测
其可能与致死性基因突变有关。同时，本研究为应用K+QQ+-R技术鉴定家蚕更多目的基因突变体提供了有效的材
料。
关键词：家蚕；化学诱变剂；突变体；筛选；K+QQ+-R技术
中图分类号：S0/’ 文献标识码：6 文章编号：%(’(./$0（/ $%%&）%’.%()’.%/
!"#$$%&%’ "($)&"*+ ),-*’$%. *%/ -($&# &%/,"$/ ),-*%-. &% .&+012#)，
!"#$%& #"’(
Q+- T:<U，1V8- 4G<U.!B:，46+ 5"<U.T:<，T6-R T@，W+6-R XFG<U.V@":，W+6 S:<U.TG@!（KFB YB#
,BH:D@;E@H"; Q"ZGH"EGH# GI 6UH:D@;E@H"; !:<:>EH#，1G;;BUB GI ,BH:D@;E@HB "<C 2:GEBDF<G;GU#，,G@EF?B>E
P<:OBH>:E#，1FG<UM:<U (%%&3’，1F:<"）
34.-#*"-：KFB I@<DE:G<"; UB<G9:D> GI >:;[?GH9，-’(./0 (’1+ F"> ZBDG9B EFB HB>B"HDF FGE>JGE "IEBH EFB
UB<G9:D JHG\BDE GI EFB >:;[?GH9 ?"> >@DDB>>I@;;# DG9J;BEBCA ,:<DB 9@E"<E> 9"# J;"# :9JGHE"<E HG;B> :<
I@<DE:G<"; UB<G9:D> HB>B"HDF，GZE":<:<U " ;"HUB GI 9@E"<E >EH":<> ?:EF 9"<@";;# :<C@DBC 9@E"E:G<> :> " OBH#
:9JGHE"<E >EH"EBU#A ,G9B 9@E"<E> >@DF "> <G<.C:"J"@>:<U HBC BUU>，;G<U E@ZB.>F"JBC DGDGG<>，>9";; DGDGG<>，
>BH:D:< DGDGG<>，I;G>># DGDGG<>，;BEF"; 9@E"<E> "<C <G "C@;E ?:<U F":H> 9@E"<E> ?BHB >DHBB<BC "<C GZE":<BC :<
EF:> >E@C# 2+$ :<C@D:<U>E"<C"HC>EH":<GI>:;[?GH913%7 ?:EFDFB9:D";9@E"UB<>:<D;@C:<U8-P，!-P，48,，
’.2P "<C 8!,A ]B IG@<C EF"E !-P "<C 48, ?BHB 9GHB BII:D:B<E EF"< GEFBH9@E"UB<>A +<\BDE:<U ?:<U C:>D GI
>:;[?GH9 ?"> 9GHB DG<OB<:B<E "<C BIIBDE:OB 9BEFGC EF"< :<\BDE:<U "ZCG9B<A !@E"E:G<> DG@;C ZB 9GHB
BII:D:B<E;# :<C@DBC Z# DFB9:D"; 9@E"UB<> :< 9";B EF"< :< IB9";BA +<\BDE:<U J@J" "<C "C@;E ?BHB ZGEF IB">:Z;BA
!G>E GI EFB 9@E"<E> 9B<E:G<BC "ZGOB ?BHB ;BEF"; 9@E"E:G<>，?F:DF 9"# ZB ">>GD:"EBC ?:EF ;BEF"; UB<B>A KF:>
>E@C# ";>G JHGO:CBC BIIBDE:OB 9"EBH:";> IGH >DHBB<:<U 9GHB 9@E"<E> GI EFB E"HUBE UB<B> :< >:;[?GH9 Z# K+QQ+-R
EBDF<G;GU#A
5$6 12#/.：-’(./0 (’1+；DFB9:D"; 9@E"UB<；9@E"<E；>DHBB<:<U；K+QQ+-R EBDF<G;GU#
随着果蝇、小鼠、斑马鱼等模式动物全基因组测 度重视。到目前为止，人们已经获得果蝇、斑马鱼等
序的相继完成，功能基因组研究成为基因组发展的 模式动物的突变资源数千种（]:<[;BH 3# $)A，$%%’；
趋势和热点，而功能基因组研究需要大量的突变资 4"F9 "<C RB:>;BH，$%%/），其中甲基磺酸乙酯（8!,）
源作为支撑。在果蝇、斑马鱼、拟南芥等主要模式生 化学诱导获得的果蝇突变基因就多达 ) )$) 份
物中，通过人为诱导获取大量的突变系统受到了高 （]:<[;BH 3# $)A，$%%’）。家蚕作为鳞翅目的模式昆
基金项目：国家“0&)”计划（$%%’123$3%%%）；国际科技合作重点项目（$%%’456)%37%）；国家教育部博士点基金（$%%(%/$’%33）
作者简介：林英，女，30&$年生，重庆人，博士研究生，研究方向为家蚕生化与分子生物学，8.9":;：#;:<=>?@ABC@AD<
!通讯作者 6@EFGHIGHDGHHB>JG<CB<DB，KB;A：%$)./7$’%%00；8.9":;：L:"M#=>?@ABC@AD<
收稿日期NBDB:OBC：$%%/.%0.$’；接受日期6DDBJEBC：$%%&.%(.3&
’)( 昆虫学报 23"#4+"),)$)5&3#(&+&3# 4&卷
虫，其全基因组测序已成功完成（!"# !" #$$，%&&’）， 点（:I=#QQ@G !" #$$，%&&&#，%&&&K）。为此，本研究的
其功能基因组研究工作也已启动，建立足够规模的 另一个主要目的就是建立家蚕人工诱导突变系，为
突变体资源也将成为家蚕功能基因组研究中最重要 应用LMNNM*O技术鉴定家蚕众多突变体奠定基础。
的工作之一。
目前全世界保存的家蚕突变体约(&&多个系统 ! 材料和方法
数（鲁成，%&&)），这些突变资源中的大多数是收集的
自然突变资源，很少部分是通过人工诱导突变筛选 !"! 材料
所获得。例如通过物理方法获得突变系统，如用 ! 家蚕标准品种 =.&1，由西南大学家蚕基因库提
射线、射线诱导出斑纹限性系统、卵色限性系统、 供。
!
黄茧限性系统、性连锁平衡致死系统、蚁蚕色限性系 !"# 方法
统、无选择食性突变蚕（*+）和广食性蚕（,-）等。而 !"#"! 实验用蚕的准备：将家蚕化蛹后削茧取出
广部和村地等人通过化学诱变剂诱导得到的突变体 鉴别雌雄，选出化蛹%2)天（精母细胞形成）的雄蛹
有多倍体、缺失型突变蚕；./(% 年田岛和小林用 和化蛹42(天或化蛹621天（卵壳未充分形成前）
&0&.12&01’ 3的 45溴去氧尿核苷和 &0%2&06( 3 的雌蛹，以及羽化后的雌、雄蚕蛾作为诱导对象。
" "
的45溴5尿嘧啶（45,7）给蚕添食，得到了多数 89 斑 !"#"# 家蚕的诱导处理：化学诱变剂诱导家蚕突
油突变；以甲基磺酸甲酯（::;）、<:; 和丝裂霉素 变的方法和选择诱变剂量都参考 L#S"G# 和 :@F8-#
=等诱变剂注射蛹体，诱发了显性致死突变（向仲 等人 诱 导 家 蚕 使 用 的 方 案 进 行（:@F8-# #P9
怀，.//’）；用硫酸二乙酯（><;）和甲基亚硝基脲 :@F#B#G"，./66；M-8 #P9 D8K#T#RJ"，./61；L#S"G#，
（:*7）处理后分别获得了 %&（" 白妙卵）（?@A"B#C# !" ./1&；向仲怀，.//’）。所有的诱变剂均为现配现用，
#$$，.//(）、’!（$ 红色死卵）（DEF"G8H#，./66）、(!（" 长 需诱导的蚕蛹和蛾按照表 . 注射方案进行处理，并
胴蚕）（D#C#3@IJ" !" #$$，.//4）、C5%（’ 红眼第 % 白 对处理后的蚕蛹和蛾置于通风无人处，待交配制种
卵）、)*（丰油蚕）、+,5-（K不眠蚕）和 ./5(0（丝胶茧 后，再按蚕种保存要求处理（冯家新，.//)）。
>）（L#BE" !" #$$，./1’）、1)（$ 软体蚕）、1"（’ 链蚕）突变 !"#"$ 交配制种：分别按照正常雌蛾与注射了诱
品种（向仲怀，%&&4）。 变剂的雄蛾（!正常U"诱变）；注射了诱变剂的雌
我国拥有世界上最多的家蚕突变资源，但对大 蛾与正常雄蛾（!诱变 U"正常）交配制种，再单蛾
规模的功能基因组研究来说还远远不够，因此，通过 区饲养。并将诱导的当代记为 : ，杂交后代记为
&
不同途径获得更多的突变体，为功能基因研究提供 : 代，: 代同蛾区交配的后代记为: 代。
. . %
丰富的材料，是当前的重要工作之一。本研究以可 !"#"% 化学诱变剂的无毒害处理：实验剩余的诱
产生点突变的化学试剂乙基亚硝基脲（<*7）、:*7、 变剂用含有.&V *# ; W 的%4& GG8QXN *#WY溶液
% % )
><;、45,7、<:;作为诱变剂，对家蚕标准品系 =.&1 中和，放置过夜；沾有诱变剂的器具用含有 .&V
进行处理，以探索这些试剂的化学诱变效应，寻求适
*# ; W 的%4& GG8QXN *#WY溶液浸泡过夜处理；实
% % )
合家蚕点突变的化学诱变剂、最佳的处理方式及处
验操作台用.& GG8QXN的 *#WY溶液擦洗或喷雾处
理时期。另一方面，最近反向遗传学研究手段日益
理。
受到重视，特别是 LMNNM*O（L#F3E-"P3 MP9@IE9 N8I#Q
!"#"& 筛选化学诱变体：单蛾区饲养诱导后的蚕
NER"8PR "P OEP8GER）技术，因其规模化和高效的优势，
种，进行细致的性状调查和比较鉴定。根据遗传系
在模式生物的功能基因组研究中起到了积极的推动
统的分类方法，记录卵、幼虫、蛹、茧、蛾的各阶段形
作用。该技术为定向诱导基因组局部突变技术，可
态和生理特征等，包括卵形、卵色、卵壳色、蚁色、幼
以从同一遗传背景中筛选和鉴定出形态性状突变
虫体形、体色、斑纹、体壁、腹肢、茧形、茧色、蛹形、蛹
体，并在短时间内构建大量点突变群体。而
体色、蛾体色、蛾体形、蛾斑纹、复眼等形态性状，化
LMNNM*O技术的关键在于利用化学诱变方法来产生
性、眠性、食性、产卵等生理性状，从中筛选出突变
一系列的点突变，然后用可以识别并切割错配碱基
体，并分析显隐性。
的=<N #酶消化基因扩增产物，并迅速鉴定突变位
6期 林 英等：家蚕化学诱变剂及诱导突变体的筛选 WDK
表! 注射方案
"#$%&! ’()&*&+,-)&./0&(-.+/
注射剂量 每种方式注射
注射时期 注射部位 !%,$%&’()$*#’%(（!-） 的数量（头）
!"#$%& +%,’#’%(%& :;5<$=%&
’()$*#’%( ’()$*#’%( ./0 6789 !.0 /:9 .:9 ’(>’?’>;"@,&%=
（1222!345-） （16!345-） （1222!345-） （122!345-） （122!345-） $?$=A’()$*#’%(
雄/"@$
化蛹 翅原基4
BCD天 腹部
12 B6 62 B6 62 12 B6 62 12 B6 62 12 B6 62 B2
B7D>"A F’(3>’,*4
E;E" "<>%5$(
翅原基4
刚化蛾
腹部
G=$,H 12 B6 62 B6 62 12 B6 62 12 B6 62 12 B6 62 B2
F’(3>’,*4
5%#H
"<>%5$(
雌G$5"@$
化蛹 翅原基4
6CI天 腹部
12 B6 62 B6 62 12 B6 62 12 B6 62 12 B6 62 B2
6JI>"A F’(3>’,*4
E;E" "<>%5$(
化蛹 翅原基4
KCL天 腹部
12 B6 62 B6 62 12 B6 62 12 B6 62 12 B6 62 B2
K7L>"A F’(3>’,*4
E;E" "<>%5$(
翅原基4
刚化蛾
腹部
G=$,H 12 B6 62 B6 62 12 B6 62 12 B6 62 12 B6 62 B2
F’(3>’,*4
5%#H
"<>%5$(
注：以注射诱变剂相应体积的2ML6N :"O@和未经注射的家蚕品种O12L作为诱导对照。
:%#$,：P()$*#’(3#H$*%==$,E%(>’(3?%@;5$%&2ML6N :"O@’(E@"*$%&5;#"3$(,"(>#H$;()$*#$>(%=5"@O12L,#="’(",#H$*%(#=%@,%&’(>;*$>,’@QR%=5S
（G;)’Q"R" $# %&S，1TTI）、’$（& 红色死卵）（U$=’5%?"，
1 结果与分析 1TKK）、($（# 长胴蚕）（U"R"3;*H’ $# %&S，1TT6）、R7B’
（红眼第B白卵）、)*（丰油）、+,7-（<不眠蚕）和 ./7
12! 筛选家蚕化学诱导突变体 (0（丝胶茧!）（V"Q$’ $# %&S，1TLW）、1)（& 软体蚕）、1#’
本研究通过正向遗传筛选获得了一些可视性家 （链蚕）突变品种（向仲怀，B226）。综合分析发现，到
蚕突变体如表B，/:9诱导获得了 1 个突变体，!.0 目前为止，用烷化诱变剂 /:9 和 !.0 诱导家蚕获
诱导获得了6个突变体，6789诱导获得了 1个不稳 得的突变体是人工诱导家蚕获得突变体数量中最多
定的突变体。而目前已报道的产生点突变的诱变剂 的，从正向遗传筛选来看，/:9和 !.0 对家蚕诱导
/:9和!.0处理家蚕后，分别获得了 !"（# 白妙卵） 效果是目前最好的。
表1 化学诱导可视突变家蚕统计
"#$%&1 ’-#-.3-.(3+,()&*.(#%4./56(&57.3.$%&*6-#-.+/3./3.%89+:*
化学诱变剂 突变体数量 表现型
OH$5’*"@5;#"3$( :;5<$=%&5;#"(#, +H$(%#AE$
非滞育红卵突变体
122!345-/:9 1 :%(7>’"E";,’(3=$>$33,5;#"(#
幼蚕致死性突变体，长圆筒茧突变体，绵茧突变体，丝胶茧突变体，小茧突变体
1222!345-!.0 6 -$#H"@@"=?"5;#"(#，@%(3#;<$7,H"E$>*%*%%(5;#"(#，&@%,,A*%*%%(5;#"(#，
,$=’*’(*%*%%(5;#"(#，"(>,5"@@*%*%%(5;#"(#
无或少鳞毛蛾翅突变体
16!345-6789 1 :%%=@’##@$">;@#R’(3H"’=,5;#"(#
122!345-.:9 2
1222!345-./0 2
2ML6N :"O@ 2
OFH 昆虫学报 $%&’()&*+*#*,-%’.-)-%’ ’J卷
!"! 化学诱导突变体的分析 !"!"# 卵：在蚕卵性状特征调查中，我们发现用 *
通过观察和筛选经 !"#、$"#、%!&、’()#、!$& +,头 $"#诱导雄蛾的 $ 代中有非滞育红卵突变
! -
诱导处理后的后代各时期的形态特征和生理特点， 体（图*）。即在同一蛾圈中既有非滞育红卵，也有
本研究在卵、幼虫、茧及成虫（蚕蛾）等不同时期获得 同非滞育卵一样的未转色的卵，其中红色卵与未转
了不同的突变体，具体分述如下。 色卵粒数的比例约为*.*。
图* $"#诱导家蚕后的$ 代的非滞育红卵与正常卵比较
-
/0+1 * 23456708393:939(;0656<809+7=;=++83:$ +=9=76>03980?@A374BC$"#(09;<D=;4<>6>039A0>E93746?=++8
-
对蚕卵突变体在发育过程中的性状调查显示 交，其/ 代同蛾区交配制种FG个蛾圈，仅有’蛾圈
-
（图-），经 $"#诱导后产生的非滞育红卵，在产卵 蚕卵是非滞育卵，且红色和正常卵混杂；其余的卵
一周后，都有明显的颜色差异；当发育到点青期时， 全部转为正常褐色滞育卵，其过渡卵色也同正常的
红色卵的胚子仍具有红色，而正常的胚子成黑色； 一样。对’蛾圈非滞育卵的卵粒数进行统计，结果
转青期后，突变的胚子与正常的胚子的颜色达到基 正常卵与红色卵粒的比例为 - FFH.GIJ，- 检验结
!
本一致；孵化后的蚁蚕、二眠蚕和卵壳均无明显差 果为 - KJLJIMN KFL*O 符合 F.*，即基本符
! !JLJ’，*
异表现；突变蚕在F龄和之后各发育时期的表型与 合经典的孟德尔遗传规律，即红色非滞育卵突变体
正常蚕也没有明显变化（结果未显示）。$"# 诱导 是隐性非致死性突变，这与已报道的由$"#诱导产
后产生的非滞育红卵突变体与正常标准品种大造杂 生的 !"（# 红色死卵）（向仲怀，-JJ’）有明显的不同。
图- 非滞育红卵突变体与正常非滞育家蚕在不同发育时期的比较
/0+1 - 23456708393:939(;0656<809+7=;4<>69>8A0>E93746?939(;0656<809+=++809;0::=7=9>;=P=?354=9>6?8>6+=83:80?@A374
!"!"! 幼虫：在注射 -’ +,头 %!& 诱导雄蛾的 $ 孢子感染。这与早年日本学者用诱变剂注射蛹体诱
! -
代中，其 - 龄起蚕存在致死性突变体现象如图 F。 发的致死突变体结果一致（$<73>6 69; $<76@640，
调查发现，有 * 蛾圈的幼蚕有 *,F 在 - 龄起蚕时开 *IGG），推测其可能是化学诱变引起的致死突变体。
始个体干死，身体略发软，表皮与正常蚕的肤色一 由于在$ 代中有*,F的蚕表现致死，遗传分析该突
-
致。其症状类似微孢子感染，但经检测未发现有微 变体可能是隐性同质型致死突变。
=期 林 英等：家蚕化学诱变剂及诱导突变体的筛选 @!N
!"!"# 茧：对注射 &= )>头 "#$诱导化蛹 &?! 天
!
的雄蛹的 % 代筛选，结果获得了不同茧形状的突
&
变体（图@），如突变长圆筒茧、小茧、丝胶茧及绵茧，
但除了小茧突变体可以化蛾制种外，其他 @ 个突变
体均不能化蛹而死亡。将小茧突变体削茧取蛹观察
（图=），发现其大小比正常的小很多。化蛾后同蛾
区交配，其所产的蚕卵数量很少，而且卵粒小，一个
卵圈仅有A!粒蚕卵，且其中有&&粒死卵，约占总卵
数的B>!。由传统的遗传分析发现，这些性状可能都
是隐性突变，且同质型致死，其突变与致死基因可能
存在有相关性。本研究获得的长圆筒茧是隐性突
变，与已有关于圆筒茧相对于椭圆形茧是隐性的报
道一致。另外，也有研究者用 "#$诱导获得了 !"5
图! "#$诱导的% 代家蚕致死突变体
& #$（丝胶茧"）突变品种（向仲怀，&CC=），与本研究诱
’()* ! +,-./012-/3-4(3"#$5(3627,612-/-(83
89% ),3,:/-(834(0;<8:1 导获得的丝胶茧突变相似。绵茧突变在现有的基因
&
库中也有保存，但非化学诱导突变产生。
图@ "#$诱导的家蚕% 代茧突变体
&
’()* @ "(99,:,3-78788312-/3-489% ),3,:/-(834(0;<8:1DE"#$5(3627,612-/-(83
&
结果无鳞毛突变体性状渐渐减弱，且逐步趋于正常
化，这可能是后代得到了修复，或者因多基因性状后
代选择未能固定所致。
# 讨论
通过观察经化学诱变剂 #LK、%LK、"#$、=5JK、
#%$处理后的家蚕标准品种 FBCM 的后代各生长期
的形态特征和生理特点，筛选获得了非滞育红卵突
变体，长圆筒茧、小茧、丝胶茧及绵茧突变体，致死突
变体及无鳞毛蛾翅突变体。这些突变体大部分可能
图= 小茧突变体与正常家蚕的比较
都为隐性和致死性突变，并可能与致死性基因突变
’()* = F81G/:(4838941/00787883
12-/3-<(-.38:1/04(0;<8:1 有关，具体引起这些突变现象的分子生物机理有待
!"!"$ 成虫：对化蛹第 &? ! 天的雄蛹注射 CH!I= 进一步研究。丝胶茧、绵茧、长圆筒茧、小茧、无鳞毛
)>头 =5JK的% 代进行观察，筛选出了无鳞毛蛾翅 蛾翅突变体、致死性突变体过去已有报道，在现有突
! B
变库中也有保存，但未见化学诱导获得绵茧、长圆筒
突变体（图 A）。该突变体的翅无鳞毛或鳞毛很少，
茧、小茧和无鳞毛蛾翅的报道，非滞育红卵突变是首
且略呈油状，其交配能力较差，所产卵有较多的死
次报道。
卵。该突变体在诱变处理后的杂交 % 代发现，故
B
对本研究所用诱变剂诱导进行了正向遗传筛选
推测可能是显性突变。将 % 代进行同蛾区交配，
B
GGF 昆虫学报 7+"#>("*0*$*-’+#3’(’+# "F卷
图! "#$%诱导的& 代家蚕蛾突变体
’
()*+ ! ,-./01.0230)3"#$%#)3-.45-1.020)6367& *535820)639)/:;681
’
突变体，并结合已报道的结果分析了各诱变剂的效 R!S’F!［J 冯家新，’RRQJ 蚕种学+ 北京：中国农业出版社+ R!S
果，发现经过 &<%、=>? 诱导后的突变效率较高。 ’F!］
(.V):2;2X，X2;2*.4H) Y，=6)82 Z，$2336 Y，X6*2 X，’RR!J B)3:2*5
这只是从表现型去筛选分析，还应在核酸分子水平
90.-)59630H5“94230K[)05//)3”5**1.023067 /*0).10*&’+ 2+ 3!&’++
上分析比较突变效率，即可通过反向遗传研究方法 3+’+ 24(+，!（" E）：’G"S’G!+
如@ABBA<C技术进一步分析研究，以最终确定可有 X2;2*.4H)Y，X2;2:21) X，=6)82 Z，$2336 Y，X6*2 X，’RR"J C5350)4
效应用于家蚕化学诱导的化学诱变剂。对化学诱导 232/K9)967 0H5 9670 23- 5/63*205- 08.3: 1.0230 )3 /*0).1 0*&’+ 2+
3!&’++ 3+’+ 24(+，!（G ’）：Q’SQG+
的注射部位即翅原基和腹部进行比较，发现在注射
X58)16[2A\，’R]]J \M02)3)3*2.069612/854599)[51.020)639)30H59)/:;681
翅原基时比注射腹部方便且损伤小些。通过本次研 MK5^O69.85063)08696150HK/.852+ 5!(!"’6#，’（Q ’E）：E’G’SE’GP+
究发现，获得的突变体都是诱导雄体产生的，所以初 B.W，=2)(Y，D)23*_Z，EFFQJ I595284H671.020)632/9K9051)39)/:;681
步认为注射雄体比雌体效果好；在时期上，注射蚕 9064:453058+ 3+’!("’#7-&’+8$"8’(’+#，Q!（P）：R!PSR]"［J 鲁成，
代方银，向仲怀，EFFQJ 家蚕基因库突变系统的研究+ 中国农业
蛹和蛾都有诱导效果。
科学，Q（! P）：R!PSR]"］
传统的家蚕突变体筛选都是通过与正常个体的 &4W2//.1 W&，W612) B，C85535 > ,，Z53):677 ?，EFFF2+ @28*505-
形态特征及生理特点进行比较，从中获得表现异常 948553)3*768)3-.45-1.020)639+ 9#"8&!/’*"!+,(*$*-.，’P：G""SG"]+
的突变体。其工作繁琐费时，且对于发生突变较细 &4W2//.1 W&，W612) B，C85535 >,，Z53):677 ?，EFFFM+ @28*50)3*
)3-.45- /642/ /59)639 )3 *536159（@ABBA<C）768 O/230 7.340)632/
微的点突变体以及不可视的突变体的筛选就更困
*5361)49+ :$#(":,.;’*$+，’EQ：GQRSGGE+
难。由于&<% 和 =>? 为常规点突变烷化剂，诱导 &.8602@，&.82:21) ,，’R]]J A3-.40)63 67 -61)3230 /50H2/ 1.020)639 MK
家蚕随机产生点突变，如用常规方法是不能确认这 2/:K/20)3* 2*5309 )3 *581#45//9 67 0H5 9)/:;681，/*0).1 0*&’+ 2+
些突变体性状到底发生了哪些基因或序列的特异点 3!&’++ 3+’+ 24(+，G（! Q）：EF"SE’E+
A06@，X6M2K29H) &，’R]PJ @H5 ?)/:;681：,3 A1O680230 B2M682068K @66/+
突变，所以随着家蚕基因组序列的测序完成（D)2 !"
A3：@2L)12Y5-+ X6-239H2，@6:K6，T2O23+ E’PSE!P+
#$+，EFFG），可借助高通量的反向遗传筛选的检测手 @2:5)(，X)1.82 X，&)L.36 ?，Y2121606 @，?H)1.82 X，’RPGJ C5350)4
段，快速有效地从化学诱导的突变群体中筛选出兴 232/K9)9670H5<-#91.020)63)30H59)/:;681，/*0).10*&’+ 24(+ 2+
5!(!"+，"R：QF]SQ’Q+
趣基因的突变体，其中新兴的 @ABBA<C技术也正是
@2L)12 Y，’RPFJ WH51)42/ &.02*539：U8)34)O/59 23- &50H6-9 768 @H5)8
解决这一难题的有效手段。@ABBA<C技术可以快速
=50540)63+ A3：(85-58)4:-5?58859，,/5^23-585-9+ !：EFQSEQPJ
确认这些序列的突变位点，为基因功能鉴定提供了 ‘)3:/58?，?4H;2M5-)9953,，$24:294H=，$a:5/W，?5)-5/W，$a3)94H?，
点突变的序列位点与性状突变之间的联系，所以本 (b80H2.58&，X.H89 ,，W6M85869 B，$823- &，C63Lc/5L#C2)0c3 &，
EFF"J @28*50#95/5405- 1.0230 948553 MK @ABBA<C )3 <&*;*4,’$#+
研究获得的这些家蚕人工诱导突变群体，可以为应
5!(*0!=!;+，’"：]’PS]EQ+
用@ABBA<C技术筛选家蚕重要功能基因突变体和鉴
D)2d，_H6._，B.W !"#$+ ，EFFGJ ,-827095N.53457680H5*53615670H5
定基因功能奠定了基础；同时，可极大的丰富家蚕 -61590)4205-9)/:;681（/*0).10*&’）+ 3+’!(+!，QF（! "]FQ）：’RQ]S
基因库的遗传资源，为家蚕育种提供原料。 ’RGFJ
D)23*_Z，EFF"J $)6/6*K67?58)4./0.85+ $5)V)3*：WH)32(685908KU8599+ Q]G
参 考 文 献（!"#"$"%&"’） SQRQ［J 向仲怀，EFF"J 蚕丝生物学+北京：中国林业出版社+Q]G
SQRQ］
=2H1I，C5)9/58 I，EFF!J B5283)3* 7861 912// 78K：0H5 L5M827)9H 29 2 D)23* _Z，’RRGJ ?)/:;681 C5350)49 67 @H8511206/6*K+ $5)V)3*：WH)32
*5350)4 16-5/ 68*23)91 768 2N.24./0.85 7)9H 9O54)59+ %#&’(! ,*8)4./0.85U8599+ E’’SE’Q［J 向仲怀，’RRGJ 家蚕遗传育种学+ 北
)’*"!+,(*$*-.，（P G）：QERSQG"+ 京：农业出版社+ E’’SE’Q］
(53*TD，’RRQJ ?)/:;681>**U86-.40)63+ $5)V)3*：WH)32,*8)4./0.85U8599+ （责任编辑：袁德成）
