Table Of ContentTHÈSE
Pour obtenir le grade de
DOCTEUR DE L’UNIVERSITÉ GRENOBLE ALPES
Spécialité : Neurosciences, Neurobiologie
Arrêté ministériel : 7 août 2006
Présentée par
Marine LAPORTE
Thèse dirigée par Sandrine FRABOULET
Préparée au sein de l’équipe Neurodégénérescence et Plasticité dirigée par le
Pr. Rémy SADOUL
au Grenoble Institut des Neurosciences - Inserm U836
dans l'École Doctorale de Chimie et Science du Vivant
Rôle de la protéine Alix dans le
système nerveux central :
de la neurogenèse à
la plasticité synaptique
Thèse soutenue publiquement le 13 novembre 2015, devant le jury composé
de :
M. Frédéric SAUDOU
PUPH, Universités de Grenoble, Président
M. Maximilian FURTHAUER
CR1, Université Nice Sophia Antipolis, Rapporteur
M. David PERRAIS
DR2, Université de Bordeaux 2, Rapporteur
Mme Lydia DANGLOT
CR1, Université Paris Diderot, Examinateur
M. Pierre GRESSENS
DR1, Université Paris Diderot, Examinateur
M. Rémy SADOUL
PU, Universités de Grenoble, Examinateur
Mme Sandrine FRABOULET
MCU, Universités de Grenoble, Directeur de Thèse
Remerciements
Mes premiers remerciements vont aux membres de mon jury Maximilian Fürthauer, David
Perrais, Lydia Danglot, Pierre Gressens et Frédéric Saudou qui ont accepté de faire partie de
mon jury de thèse. Merci pour votre temps et le regard critique que vous avez porté sur mes
travaux.
Sandrine et Rémy… Il va être difficile de résumer ce que je vous dois en quelques lignes. Merci
de m’avoir permis de travailler à vos côtés en me confiant l’étude de vos Alix chéries que je suis
bien triste de quitter. Merci pour votre confiance, vous avez su me laisser avancer à mon rythme
et un peu, comme je l’entendais parfois, tout en étant toujours là quand j’en avais besoin. Votre
complémentarité m’a offert le parfait équilibre pour arpenter les hauts sommets de la thèse.
Sandrine je te remercie pour ton tempérament calme et avisé qui m’a souvent apaisée et
canalisée. L’enthousiasme et le courage avec lequel tu te lançais dans chaque nouvelle technique
et te plongeais dans la théorie de chaque « nouveau » phénotype de la souris m’ont servi
d’exemple à suivre.
Rémy, je te remercie pour ta sincérité permanente et ta disponibilité. La simplicité avec laquelle
nous pouvions aborder absolument tous les sujets m’a toujours agréablement étonnée. J’ai
énormément profité de toutes ces discussions et je te remercie de m’avoir fait profiter de tant
de connaissances et de m’avoir transmis le gout de la recherche.
Merci à tous les deux, vous avez été bien plus que de simples directeurs de thèse.
J’adresse également de sincères remerciements à tous les membres de la « famille équipe 2 ».
Vous êtes, pour moi, l’exemple que générosité et convivialité riment avec rigueur et qualité
scientifique. Je vous remercie des conditions de travail dont j’ai pu bénéficier, aussi bien sur le
plan humain que professionnel.
Chantal, merci de m’avoir fait découvrir le monde de la recherche sous un regard aussi
passionné. Je suis arrivée dans l’équipe en 2009 avec la ferme intention de partir en Master pro
mais tu étais convaincue je devais faire une thèse… Alors voilà, je t’ai écouté Chantal et je te
remercie m’avoir donné la confiance dont je manquais. Grâce à toi, j’ai découvert un monde que
j’espère ne pas quitter de si tôt.
Anne… Comment résumer mes remerciements en une phrase… « Ola Qué tal ? Qué tal y tu ?
Qué tal qué tal… » Merci pour nos fous rires, nos discussions de filles toujours discrètes, les
arlequins, merci de m’avoir toujours donné l’impression que j’étais super balaise sur Excel,
merci pour ta positive attitude et tes paroles souvent réconfortantes.
Merci aux deux post‐doc du labo, Karine, pour tes paroles rassurantes et tous tes conseils de
post‐doc expérimentée (j’ai pas dit vieille !!) sur la vie après la thèse, la joie de voler de ses
propres ailes, de découvrir un autre labo, enfin de ne plus être un thésard quoi. Merci à José
pour ton aide ! Pardon d’avoir si souvent détruit la langue espagnole avec Anne…
Merci à Fiona de qui j’ai beaucoup écorché les oreilles au cours de ces 5 années. Merci pour la
patience avec laquelle tu m’as reprise, corrigée et ainsi fait progresser en anglais. Merci pour ta
gentillesse et ton humour qui m’ont beaucoup fait de bien... Le souvenir du dossier nommé
« sperme Marine » reste un de mes plus beaux fous rires. Merci également de m’avoir appris
absolument tout de l’histologie (tout, mais surtout que la paraffine c’est mieux !).
Merci Yves pour tes conseils et tes explications poussées en statistique où chacune de mes
questions menait à la démonstration mathématique de chaque test. Merci à Fred pour ton aide
quotidienne et la patience avec laquelle tu m’as appris à dompter les souris Alix ko. Merci
également à Karine, notre gestionnaire adorée, pour ton sourire, ta bonne humeur et ton culot
qui m’ont souvent sortis de situations impossibles, et à Anne d’avoir prit le relai avec beaucoup
d’efficacité et de dynamisme.
Un grand, que dis‐je, un immense merci à Béa et Christine… Aucun étudiant ne saurait s’en
sortir sans l’une de vous dans les parages. Merci pour votre disponibilité illimitée et la
gentillesse avec laquelle vous m’avez toujours apporté votre aide. Christine, merci des moments
passés ensembles à décortiquer le phénotype des souris, ou encore de m’avoir appris que l’eau
du robinet ne s’autoclave pas !! Mais aussi pour tous les à‐côtés qui n’ont finalement pas grand
chose à voir avec la science. Merci Béa pour toutes nos discussions, plus souvent philosophiques
que scientifiques. J’applique régulièrement ta théorie de la fainéantise intelligente, même si des
fois ça n’a rien d’intelligent… Tu m’as beaucoup appris pendant cette thèse au cours de laquelle
je ne me suis pas construite que scientifiquement.
Merci également aux petits jeunots qui, de leur passage éclaire ont su mettre un peu de soleil et
de joie dans mon quotidien : Galil, Matthieu, Jessica, et mes 3 petits poussins Rachel, Céline et
Laurie. Merci pour votre bonne humeur et vos questions pertinentes. Merci à Victoria et
Florent, avec qui je n’ai pas forcement partagé que des sourires au café. Merci pour votre
implication dans le projet Alix qui demandait l’acharnement et la rigueur dont vous avez fait
preuve. Ca a été un plaisir de travailler avec vous. Un dernier merci à Joseph. Few words in
english to tell you how great it was to have you around for my last months in the lab. It has been
a pleasure to work with you, to teach you French (and science) and to learn from you. I wish you
all the best you deserve for your phD and afterward.
Enfin je ne pourrais remercier l’équipe 2 sans une mention spéciale aux doctorants Sadouliens.
Mathilde et Romain vous nous avez tenu la main puis passé le relais avec beaucoup de
sympathie. Mathilde, merci de m’avoir montré qu’il ne faut jamais baisser les bras ! Romain,
merci pour les moments qu’on a partagé à parler ESCRT ou du dernier modèle de chez Volkl.
Bonne chance à vous deux ! Charlotte, merci d’être mon acolyte des plans machiavéliques de
manipulation de haut niveau ! Merci pour ta bonne humeur et particulièrement pour tes
délicates attentions ces dernières semaines. Entre la relecture et les petits plats, tu m’as bien
materné… Faut dire que tu sais faire maintenant, j’en connais une qui a de la chance de t’avoir
pout toute la vie ! Pour finir, Vincent… Nos discussions dans la pièce de culture vont me
manquer… Heureusement que y’avait un sas parfois… ! Tu as toujours su quand me remonter le
moral et quand me laisser faire mon boudin, comme un véritable ami.
Et voilà, j’ai fait une tartine… Mais je ne pouvais pas faire plus court. Bonne continuation à vous
tous que je n’oublierai jamais… Nul besoin de tatouage sur la fesse gauche pour garder en
mémoire les années passées à vos cotés, le souvenir de ce laboratoire est gravé dans un endroit
que les aléas de la vie ne sauraient déformer.
Je remercie également les animaliers pour leur travail qui a largement contribué à mes travaux
de thèse. Merci Fabien, Laure, Romain, Sylvain, Pauline et Manon et pardon pour toutes les
fois où j’ai fichu le bordel à l’animalerie…
Merci aux membres des autres équipes du GIN qui ont ponctué mon quotidien de bons conseils
et de moments sympathique sur la terrasse, autour d’une bière ou au restau U. Merci à Jacques,
Toff, Eric, Annie, Marie‐Jo, Christophe, Nora, Fabien, Mireille, Sylvie, Alain, Isabelle et Julie
pour les discussions scientifiques, les encouragements, les blagues du vendredi, les gâteaux
d’anniversaire, les échanges de bouquin et les conseils de diététique. Merci à Yasmina pour nos
superbes collaborations et les bons moments qui vont avec. Je n’oublierai jamais la semaine à
Bordeaux avec Florence où votre notoriété à Imaging the Cell me faisait assister à tous les
moments les plus sympas ! Un petit merci pour les Bordelais, Ngoc, Morgane et David pour
leur accueil et leur gentillesse pendant mon séjour.
Un remerciement spécial à Karin S., découvreuse du phénotype qui fait la véritable notoriété
des souris Alix ko… Mais surtout, pour ta gentillesse et ta générosité qui m’ont toujours
beaucoup touchée. Merci pour ton accueil chaleureux à l’occasion des nombreuses soirées que
l’on a faites chez vous.
Merci à tous les enseignant chercheurs pour leur confiance lors de mes quatre années
d’enseignement : Stefan, Emmanuelle, Bertrand, Claire, Virginie, Frank et bien sur Fiona,
Sandrine et Rémy.
Merci également aux copains du GIN, Hélène, Mathieu, Mélina, Alexia, Margaux, Ben,
Chrystelle, Julie, Max, Sandrine, Lucie, Muriel, Julie‐Anne, Anne‐Cécile, Fabienne, Soumya,
Aurélie… pour tous les joyeux moments, plus nocturne que diurne, qu’on a vécu ensemble dans
les bars, sur des skis, dans les bars, à faire les dindes, dans les bars et dans la niche du chien
d’Annie… Mention spéciale à Martalinette et Eléa (alias Kelya) dont le rire cristallin traversait
tout le deuxième étage pour venir égayer mes journées. Ne changez rien les filles, vous nous
faites beaucoup de bien.
Merci tout particulier à Marc, Lauriane, Marie‐Lise et Anouk qui, plus que des co‐thesard, sont
devenus de vrais amis. Anouk, Marie‐Lise, merci de m’avoir entrainé dans de folles aventures
mais aussi de me montrer à quoi ressemble l’ascension vers la sagesse. Marc et Lauriane, merci
pour vos délicates attentions et votre inconditionnelle gentillesse. Merci à Fannynette, ma coloc
d’amour pour les bons petits plats et les soirées tranquilles où on refaisait le monde sur le
canapé en regardant tellement vrai… A nous écouter, on aurait pu diriger nos équipes, le GIN, la
France, l‘univers… Merci pour tout ça.
Alexis, mon chouchou, merci pour tout, je n’ai la place et trop de pudeur pour tout écrire mais
tu sais tout ce que tu représentes pour moi. Merci pour nos discussion scientifiques (mais pas
que) au Saint‐Pierre, d’avoir toujours été là dans les bons et les mauvais moments du M1 jusqu'à
mes dernières heures de rédaction !! Qu’on soit bien d’accord, tu es carrément exceptionnel !!
A mes supers copains qui me ramènent à la vrai vie : Marine, Laura, Guigui, Clairounette,
Mimi, Piloo, Anne‐Cha, Victoria, Elsa, Zai, Ségolène, Nico, Robinou, Laurette, Chachaaaa,
Sarah, Chris, Chachou, John et Arthur, le petit nouveau. Je vous remercie de vos
encouragements (surtout ceux venant d’Australie) et d’être restés là malgré mon absence totale
de nouvelle, en tout particulier pendant la rédaction !
Merci aussi à toute ma famille, de me supporter depuis toujours.
Merci à mes parents d’avoir toujours été la en cas de besoin sans jamais me laisser m’apitoyer
sur mon sort. Merci Yves‐Michel pour tes précieux conseil de vie et maman, heureusement que
tu étais la pour me coucouner mais aussi me rappeler de… payer mes impôts, de me nourrir, de
donner des nouvelles… Merci d’être toujours la quand j’ai besoin de toi. Je remercie également
Morgane, Thomas, Nathan et Maël, qui me rappellent jour après jour que plus belle ambition
dans la vie, c’est d’être heureux.
Et pour finir, merci à Alex simplement pour ce que tu es. Je ne serai jamais venu à bout de cette
thèse sans toi à mes cotés. Maintenant, prépare toi à me voir débouler dans ta petite vie de
Genevois, pour écrire un nouveau chapitre de notre vie.
Liste des abréviations principales
4AP : 4‐aminopyridine
Alg‐2 : apoptosis‐linked gene 2
Alix : Alg‐2 interacting protein X
AMPA : α‐amino‐3‐hydroxy‐5‐methylisoazol‐4‐propionate
ANR : anterior neural ridge
AP2 : adaptor protein 2
BDNF : brain‐derived neurotrophic factor
BE : bulk endocytose
bRG : basal Radial glia progenitor (progéniteurs basaux de la glie radiaire)
CIE : clathrin‐independent endocytosis
CHMP : charged multivesicular protein
CME : clathrine‐mediated endocytosis
CR : Cajal‐Retzius
CTxB : Cholera Toxin Chain B
EGC : éminence ganglionnaire caudale
EGF : epithelium growth factor
EGFR : epithelium growth factor receptor
EGL : éminence ganglionnaire latérale
EGM : éminence ganglionnaire médiane
EIAV : equine infectious anemia virus
Ena/VASP : enable/vasodilatator‐stimulated phosphoprotein
ESCRT : endosomal sorting complexe required for transport
F‐actine : actine filamenteuse
FAK : focal adhesion kinase
FGF : fibroblast growth factor
FGFR : fibroblast growth factor receptor
G‐actine : actine Globulaire
GM1 : Galβ3GalNAcβ4(Neu5Acα3)Galβ4GlcCer
ILV : intraluminal vesicle
IP : progéniteurs intermédiaires
Ko : knockout
LBPA : Lysobisphosphatidic acid
LTP : long term potentiation
MAP : microtubule associated protein
MEF : mouse embryonic fibroblast
MVE : multivesicular endosome
NEC : neuroepithelial cells (cellules neuroépithéliales)
NGF : neural growth factor
NLG : Neuroligine
NMDA : N‐méthyl‐D‐aspartate
NT : neurotransmetteur
PC : plaque corticale
PIP : Phosphatidylinositol(4,5)Phosphate
2
PoA : pre‐optic area (Aire pré‐optique)
PP : pré‐plaque
PPSE : potentiel post‐synaptique excitateur
PRD : prolin rich domain
PSD : post‐synaptic density (densité post‐synaptique)
RGC : radial glial cells (cellules de la glie radiaire)
SHF : stimulation haute fréquence
SNARE : (Soluble N‐ethylmaleimide‐sensitive factor Attachment protein REceptor)
SNC : système nerveux central
SNP : système nerveux périphérique
SP : sous plaque
Tsg‐101 : tumor susceptibility gene 101
UFE : ultra‐fast‐endocytosis
VAMP : vesicle‐associated membrane protein
VIH : Virus de l’immunodéficience humaine
VPS : vesicular sorting protein
VS : vesicule synaptique
Wnt : Wingless Integration site
ZM : Zone marginale
ZSV : Zone sub‐ventriculaire
ZV : Zone ventriculaire
Wt : wild type
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