Table Of ContentManual de laboratorio de
microbiología para el diagnóstico
de infecciones respiratorias
M§ José López García, Marta Cárdenas Povedano,
Aurora Urbano Felices
Revisado por: José Miguel Aguilar Benítez
©mniaScience Scholar
Manual de laboratorio de
microbiología para el diagnóstico
de infecciones respiratorias
Manualclínicoytécnico deayudaaldiagnóstico
microbiológico delas infeccionesdeltratorespiratorio
altoybajo
M9JoséLópezGarcía,MartaCárdenasPovedano,
AuroraUrbanoFelices
Revisadopor:JoséMiguelAguilarBenítez
I3edición©2012OmniaScience(OmniaPublisherSL)
www.omniascience.com
DOI:http://dx.doi.Org/10.3926/oss.4
ISBNversiónon-line:978-84-695-0921-0
ISBNversiónimpresa:978-84-940234-6-0
DL:B-18941-2012
Diseñoportadaycontraportada:OmniaScience
Fotografíaportada:©Kts|Dreamstime.com
índice
Presentación
CAPÍTULO1
Florarespiratorianormal
1.1 Fosasnasales
1.2 Faringe
CAPÍTULO2
INFECCIONESRESPIRATORIASYAGENTESETIOLÓGICOS
2.1 Infeccionesdevíasrespiratoriasaltas
2.1.1 Faringitis
2.1.2 Síndromeslaríngeos
2.1.3 Otitis
2.1.4 Sinusitis
2.1.5 SíndromedeLemierre
2.1.6 AnginadeVincent
2.1.7 Abscesosperiamigdalinoyfaríngeo
2.1.8 Difteria
2.1.9 Candidiasis
2.1.10 Zigomicosís
2.2 Infeccionesdevíasrespiratoriasbajas
2.2.1 Bronquitis
2.2.2 Bronquiolitis
2.2.3 Neumoníaaguda
2.2.4 Neumoníanosocomial
2.2.5 Colonización-infecciónrespiratoriacrónica
2.2.6 Abscesopulmonar
2.2.7 Derramepleuralyempiema
CAPÍTULO3
Tomademuestras
3.1 Muestrasdeltractorespiratoriosuperior
3.2 Muestrasdeltractorespiratorioinferior(métodosnoinvasivos)
3.3 Muestrasdeltractorespiratorioinferior(métodosinvasivos)
3.3.1 Fibrobroncoscopia
3.3.2 Otrastécnicasnofibrobroncoscópicas
CAPÍTULO4
Diagnósticomicrobiológicodirecto
4.1 Visualizacióndirecta
4.1.1 Fresco
4.1.2 Tinciónargénticarápida(Gomori-Grocottmodificada)
4.1.3 TincióndeGram
4.1.4 TinciónZiehl-Neelsen
4.1.5 Tincionesconfluorocromos
4.2 Cultivosbacteriológicosyfúngicos
4.2.1 Siembra
4.2.2 Evaluacióndelcrecimiento
4.3 Pruebascomplementarias
4.3.1 Técnicadelscotchopapeldecelofán
4.3.2 TincióndeGram
4.3.3 Oxidasa
4.3.4 Catalasa
4.3.5 Pruebadelacoagulasa
4.3.6 Aglutinacióndeestreptococos
4.3.7 SensibilidadaOptoquina
4.3.8 SensibilidadaBacitracina
4.3.9 Solubilidadenbilis
4.3.10 RequerimientosdefactoresX,V,XV
4.3.11 Testdefilamentación
4.3.12 Sistemascomercialesmultipruebas
4.3.13 Aglutinacióndelegionella:LegionellaLátexTestKit®
4.3.14 Testdeliodo-nitro-trifenil-tetrazolio(INT)
4.4 Antibiogramas
4.4.1 Antibiogramademuestrasprimarias
4.4.2 Antibiogramadeanaerobios
4.4.3 AntibiogramadeStreptococcus
4.4.4 Antibiogramadegonococos
4.4.5 AntibiogramadeHaemophilus
4.4.6 PaneldeGramnegativos
4.4.7 PaneldeGrampositivos
4.5 Cultivosvíricos
4.5.1 VirusdelaGripe
4.5.2 Otrosvirus
4.6 Pruebasdedetecciónrápidadeantigeno
4.6.1 Frascodebocaanchaytapónderosca,conorina
4.6.2 Torunda en tubo con ácido casamino o Amies-Stuart con Charcoal, con exudados
nasofaríngeos
4.6.3 TorundaenAmies-Stuartotubo,conmuestrasrespiratoriasdevíasaltas
4.6.4 Torundaotuboenmedioparavirus,conmuestrasrespiratorias
4.7 Técnicasdebiologíamolecular
4.7.1 Frascosdehemocultivoparaanaerobiosyaerobiosconlíquidopleuralosangre
4.7.2 TorundaenAmies-Stuartotubo,conmuestrasrespiratoriasdevíasaltas
4.7.3 TorundaenM4ofrasco,conmuestrasrespiratoriasdevíasbajas
4.7.4 Torundaotuboenmedioparavirus,conmuestrasrespiratorias
CAPÍTULO5
Diagnósticomicrobiológicoindirecto:Serología
5.1 SerologíaMycoplasmapneumoniae
5.2 SerologíadeChlamydophilapneumoniae
5.3 SerologíadeLegionellapneumophila
5.4 SerologíadeCoxiellaburnetii
5.5 SerologíadeRickettsiacoronii
5.6 SerologíadeFrancisellatularensis
5.7 Serologíadelvirussincicialrespiratorio
CAPÍTULO6
Informedelosresultados
6.1 Visualizacióndirecta
6.2 Cultivos
6.3 Detecciónrápidadeant¡genos
6.4 Serología
CAPÍTULO7
Bibliografía
SOBRELOSAUTORESDELLIBRO
SOBREELREVISORDELLIBRO
índice detablas
Tabla1.Característicasdiferencialesdelossíndromeslarínfieosmáscomunes
Tabla2.Resumendelosprocedimientosmicrobiológicosdetomademuestrasytransportepara
infeccionesrespiratorias
Tabla3,DistintosmediosdecultivoparaMycobacteriumsp
Tabla4.Característicasmacroscópicasdelosprincipaleshongosfilamentososrespiratorios
Tabla5.Característicasmicroscópicasdelosprincipaleshongosfilamentososrespiratorios
Tabla6. Morfologíayafinidad porloscolorantesdeGramdelasmayoríadelasbacterias
causantesdeinfeccionesrespiratorias
Tabla7.Indentificacionesrápidasdeenzimasbacterianos
Tabla8.ApiNH
Tabla9.ApiCoryne
Tabla10.Api20A
Tabla11.Distintosmétodosdeestudiodelasensibilidadbacterianaalosantibióticos
Tabla12.InterpretacióndesensibilidadesparaS.pneumoniae
Tabla13.InterpretacióndesensibilidadesparaStreptococcusbetahemolíticos
Tabla14.InterpretacióndesensibilidadesparaN.gonorrehae
Tabla15.InterpretacióndesensibilidadesparaHaemophilus
Tabla16.Virusrespiratorios,líneascelularesytiempodeobservacióndeefectoscitopáticos
Tabla17.Característicasdelosmétodosmolecularesdisponiblesparaladeteccióndevirus
grupales
Tabla18.Resumendelosprocedimientosespecíficosdellaboratoriodemicrobiologíaparalas
muestrasrecepcionadasdeinfeccionesrespiratorias
Tabla19.Tipodetinción,aumentoópticoyn^deBAARobservados
Tabla20.Informedelasserologíasinfecciosas
índice deilustraciones
Ilustración1.Frecuenciaestacionaldelosvirusrespiratorios
Ilustración2.Tomademuestradeunexudadofaríngeocontorunda
Ilustración3.Siembraparaaislamientoenplaca
Ilustración4.Esquemadelaestructuradelosprincipaleshongosfilamentososrespiratorios
Ilustración5.Distintosmétodosdeestudiodelasensibilidadbacterianaalosantibióticos
Ilustración6.FundamentodelatécnicaInmunocromatografíadirecta
Ilustración7.FundamentodelatécnicadeEnzimoinmmunoanálisisdirecto
Ilustración8.Procesoesquemáticodelainmunofluorescenciadirecta
Ilustración9.Procesoesquemáticodelainmunofluorescenciaindirecta
Presentación
Presentación
Lasinfeccionesrespiratoriassonlasenfermedadesdemayorincidenciaademásdepresentar
algunasdeellas,comolaenfermedadpulmonarobstructivacrónica,unaprevalenciacreciente
enelmundodesarrollado.Losprocesosinfecciososdelasvíasrespiratoriasaltassonlasquemás
ausenciaescolarylaboralproducen,mientrasquelasinfeccionesdeltractorespiratorioinferior
son las que requieren más hospitalización y presentan mayores tasas de morbilidad y
mortalidad.Todoesto,ademásdeloscosteseconómicosderivadosdelasbajaslaboralesyde
los prolongados tratamientos farmacéuticos y hospitalarios, apremian en la necesidad de
conseguirdiagnósticoscerterosyrápidos.
En cuanto al Laboratorio de Microbiología, el hecho de que la gran mayoría de los
procedimientosseanmanualeshacequeserequierapersonalentrenadoconciertashabilidades
técnicasyqueelinformederesultadosdependadelainterpretaciónsubjetivadelfacultativo.
Porotraparte,losmétodosdediagnósticodirectoenmicrobiologíaestánexperimentandoun
granavance,mejorandolostiemposderespuestaylaeficienciadelproceso.
El objetivodeeste manual esactualizar los conocimientosclínicos, analíticosytécnicos, y
adiestraren los procedimientosde diagnóstico microbiológico de las infeccionesdeltracto
respiratorioaltoybajo,conelfinúltimodedisminuirlamorbilidadymortalidadasociadasylos
costesderivadosdeellas.
Vadirigidoalpersonalenformaciónyaprofesionalesdelámbitosanitario,principalmentedel
laboratorio(técnicosyfacultativos)perotambiénalosclínicos(médicosyenfermeros).Recorre
portanto las áreas asistencialesde atención primaria (medicina comunitaria y pediatría)y
especializada (otorrinonaringología, neumología, medicina interna e intensiva...), toma de
muestras,ylasdistintasáreasdellaboratoriodemicrobiología.
Paralaelaboracióndelmanualnuestrogrupodetrabajoharealizadounarevisióncompletay
actualizadadelasinfeccionesrespiratoriassobrelaquehadesarrolladounosProcedimientosde
LaboratoriodeMicrobiologíadeformadetalladayesquematizada,decadaunodelospasosdel
procesoanalítico:tomademuestrasyrecepción,procesamientoeinformedelaboratorio.
Abril2012
l
Manualdelaboratoriodemicrobiologíaparaeldiagnósticodeinfeccionesrespiratorias
Capítulo 1
Florarespiratorianormal
Elaparatorespiratoriosedivideendossectoresanatómicos:altoybajo.Enelindividuonormal
únicamente lasvías respiratorias altas (fosas nasalesyfaringe) están colonizadas porflora
normal.Lossenosparanasales,eloídomedio,latráquea,losbronquiospulmonaresylapleura
sonestériles.
Ilustracionesrecomendadas:
http://www.iuntadeandalucia.es/averroes/~29701428/salud/ssvv/respi0.htm
http://www.iuntadeandalucia.es/averroes/~29701428/salud/ssvv/respil.htm
http://www.juntadeandalucia.es/averroes/~29701428/salud/ssvv/respi2.htm
http://www.juntadeandalucia.es/averroes/~29701428/salud/ssvv/respi3.htm
http://www.juntadeandalucia.es/averroes/~29701428/salud/ssvv/respi4.htm
http://www.juntadeandalucia.es/averroes/~29701428/salud/ssvv/respi5.htm
http://www.juntadeandalucia.es/averroes/~29701428/salud/ssvv/respi6.htm
http://www.juntadeandalucia.es/averroes/~29701428/salud/ssvv/respi7.htm
http://www.juntadeandalucia.es/averroes/~29701428/salud/ssvv/respi8.htm
Enlasfosasnasaleslaestructuraanatómicatortuosageneraunacorrientedeaireturbulenta.
Cuandoelairechocacontralasmucosas,secalientaylaspartículasgrandesqueéstecontiene
sonretenidasporelmucusylospelosdelasnarinas.Ensectoresmásbajoslosmicroorganismos
queingresanporestavíalleganaltejidolinfoidedelanillodeWaldeyer.
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Florarespiratorianormal
El sistema mucociliar, la capa de moco y los reflejos como la tos, el estornudo y la
broncoconstricción son otros mecanismos de defensa importantes. La mucosa respiratoria
tambiénesricaenIgA.
Eneltejidopulmonarexistenmacrófagosalveolaresquecontribuyenaladefensadelhuésped,
fagocitandolasbacteriasyotraspartículas.
1.1 Fosasnasales
En las fosas nasales se encuentran microorganismos característicos de la piel:
Staphyloccusepidermidis y especies de Corynebacterium. Alrededor de 20 a 30% de los
individuosson portadoresnasalessanosde5. aureus,porcentajequeaumentaen personas
diabéticassometidasahemodiálisisyenelpersonaldesalud. Enpreescolareseshabitualla
colonizaciónnasalporStreptococcuspneumonianeyespeciesdeHaemophilus.
1.2 Faringe
EnlafaringelafloranormalestácompuestaprincipalmenteporStreptococcusa-hemolíticos,del
grupoviridans.SeencuentranademásdiferentesespeciesdeLactobacillus,Propionibacterium,
Corynebacterium,Moraxella,etc.Losanaerobiossuperanendiezvecesalosaerobiosyseaislan
Peptoestreptococcusspp,Bifidobacteriumspp,yActinomycesspp. Losbacilosgramnegativos
queseencuentran,generalmentesonFusobacterium,sppyBacteroidesspp.
En las criptas amigdalinas se produce acumulación de materia orgánica que disminuye el
potencialdeóxidoreducción,porlotantoelnúmerodeanaerobiospuedesermuyelevado.
AlgunosindividuosalberganS.pneumoniaeyHaemophillusinfluenzae,sinqueellosignifique
enfermedad.TambiénpuedenencontrarseespeciesnopatógenasdeNeisseriayStreptococcus
Is-hemolíticosnopertenecientesalgrupoA.Encondicionesnormalesnoexistenbacteriasmás
alládelaglotis.
Lafloraorofaríngeaestáimplicadaeninfeccionespulmonares,causadasporlaaspiraciónde
estosmicroorganismos.Generalmenteestoocurreenpacientesquetienenalteradoslosreflejos
de defensa debido a alteraciones de la conciencia, etc. En las infecciones bronquiales o
pulmonares,elestudiodelaexpectoraciónpuederesultarútilsielpacientelograobteneruna
buenamuestramedianteelesfuerzodetos.Hayquesercautelosoenlalecturadeestamuestra,
porquelamismasecontaminaráendiferentesgradosporlafloraoral.
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