Table Of ContentLe rôle de SRF au cours de l’atrophie du muscle
squelettique adulte & dans les cellules satellites
Gaelle Herledan
To cite this version:
Gaelle Herledan. Le rôle de SRF au cours de l’atrophie du muscle squelettique adulte & dans les
cellules satellites. Sciences du Vivant [q-bio]. 2017. hal-01521070
HAL Id: hal-01521070
https://hal-ephe.archives-ouvertes.fr/hal-01521070
Submitted on 11 May 2017
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MINISTÈRE DE L’ENSEIGNEMENT SUPÉRIEUR ET DE LA
RECHERCHE ÉCOLE PRATIQUE DES HAUTES ÉTUDES
�Sciences de la Vie et de la Terre
MÉMOIRE
présenté
par
Gaëlle HERLEDAN
pour l’obtention du Diplôme de l’École Pratique des Hautes Études
TITRE : Le rôle de SRF au cours de l’atrophie du muscle squelettique adulte &
dans les cellules satellites
soutenu le 23 mars 2017 devant le jury suivant :
Dr. Giovanni STEVANIN - Président
Dr. Athanassia SOTIROPOULOS - Tuteur scientifique
Dr. Thi My Anh NEILDEZ - Tuteur pédagogique
Dr. Mathias MERICSKAY - Rapporteur
Dr. Vincent MOULY - Examinateur
Mémoire préparé sous la direction de :
Dr. Athanassia SOTIROPOULOS
Institut Cochin
INSERM (Unité 1016), CNRS (UMR 8104), Université Paris Descartes (UMR-S 1016)
Département Développement, Reproduction & Cancer
Développement neuromusculaire, génétique et physiopathologie
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MINISTÈRE DE L’ENSEIGNEMENT SUPÉRIEUR ET DE LA
RECHERCHE ÉCOLE PRATIQUE DES HAUTES ÉTUDES
�Sciences de la Vie et de la Terre
MÉMOIRE
présenté
par
Gaëlle HERLEDAN
pour l’obtention du Diplôme de l’École Pratique des Hautes Études
TITRE : Le rôle de SRF au cours de l’atrophie du muscle squelettique adulte &
dans les cellules satellites
soutenu le 23 mars 2017 devant le jury suivant :
Dr. Giovanni STEVANIN - Président
Dr. Athanassia SOTIROPOULOS - Tuteur scientifique
Dr. Thi My Anh NEILDEZ - Tuteur pédagogique
Dr. Mathias MERICSKAY - Rapporteur
Dr. Vincent MOULY - Examinateur
Mémoire préparé sous la direction de :
Dr. Athanassia SOTIROPOULOS
Institut Cochin
INSERM (Unité 1016), CNRS (UMR 8104), Université Paris Descartes (UMR-S 1016)
Département Développement, Reproduction & Cancer
Développement neuromusculaire, génétique et physiopathologie
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Remerciements
Jai eu un réel coup de coeur pour cochin qui a été une Aventure humaine et un carrefour de
rencontres.
Je remercie...
Le jury, Mathias Mericskay, Vincent Mouly & Giovanni Stevanin pour leur temps consacré à
l'évaluation de ce travail. Je remercie particulièrement Thi My Anh de m'avoir proposé d'être ma
tutrice pédagogique, que j'ai rencontré quelques années plus tôt lors d'une formation.
------
L'équipe Maire où il fait bon vivre, la bonne ambance, et l'entraide constante entre les membres,
même des coups de téléphone soirs et week-ends.
Nassia, pour ta qualité de chef, ta patience, ton investissement dans le labo, ton enthousiasme, tes
fameux « ALORS ?? » la manip à peine terminée, le binôme de paillasse que l'on pouvait former, les
crises de rire que tu m'as provoqué, la liberté que tu m'as accordé de pouvoir faire des choses
annexes au labo, les responsabilités que tu m’as donné, de m’avoir fait confiance et de m'avoir tirée
vers le haut.
Pascal, pour ta gentillesse, le fromage que tu nous rapportais du Jura, les "bon courage et à demain"
qui nous motivaient passé 19h.
------
Maud, pour ton aide et ton soutien, ta maladresse en culture qui me faisait bien rire, ta brillance, ton
coté fun, ta bonne humeur dans le labo, de m’avoir concurrencé sur le titre de la personne dont le
timer sonne le plus longtemps, pour l'écharpe qui a été un cadeau très touchant, de nous avoir fait
entrer dans ta vie.
Francesc le petit poulet catalan, pour tes phrases approximatives, ta passion pour les brocolis, les
discussions improbables que nous pouvions avoir, ta débilité quand t'es saoul, et la bonne ambiance
que tu as apporté dans ce bureau des étudiants.
Morgane, pour ta capacité à profiter de la vie, de m'avoir ouvert les yeux et appris à relativiser.
Philippe, pour les discussions paternelles que tu m'accordais, et la petite place bien tranquille dans
ton bureau qui m'a permis de me lancer dans le mémoire.
Tof, pour ton expérience, ton professionnalisme, ta qualité à être patient, et les bons gâteaux dignes
d'un grand pâtissier.
Josiane & Iori, pour m'avoir donné le courage de partir en Angleterre.
Nathalie & Steph pour vos longues discussions autour d'une eau chaude et de gâteaux bien gras (ou
trop secs). Le gras c’est la vie !
Evelyne, pour ton sourire au quotidien.
Ulduz, Kat, Chiara, Anissa & Laura pour votre gentillesse et la bonne humeur que vous avez apporté
dans l’équipe.
5
Alessandra, Voahanguy & Matthieu pour votre aide technique.
Kat, Laura, Emilie & Caro pour vos manuscrits dont je me suis lourdement inspirée.
Anne Lombès pour le travail réalisé sur les mitochondries et Stéphane Vassilopoulos pour les manips
de microscopie électronique du cytosquelette d’Actine.
L'équipe Le-Grand, notamment à Elsa, mon acolyte d'associations avec qui nous avons fait de
nombreuses soirées nocturnes au labo. Alice, merci pour ton aide au quotidien. Fab, on se recroise à
l'Institut de Myologie !
Merci aux gestionnaires (Maryse, Yannig, Patricia, Michèle, Laetitia, Christine), aux Dames de la
laverie (Nathalie, Mimi, Josiane), au magasiniers (Emilie, Nicolas), à la plateforme du petit animal
(Otilia, Agnès, Yoann), à la plateforme de microscopie (Thomas, Béatrice, Pierre), à Tacko notre dame
de ménage, Georges du service technique, et Serge, un des gardiens du bât Fac.
------
Sarah, pour nos longues discussions à la pause déjeuner au cloitre et au jardin suspendu. Merci de
m'avoir mis a disposition tes 2 épaules, l'une pour rire et l'autre pour pleurer.
JeCCo 2015 & JeCCocos 2016, merci pour votre investissement, il a fallut une bonne cohésion
d'équipe pour tenir le coup. A certaines soirées on pouvait entendre : "j'ai bu n=15 bières et je suis
positivement bourré!". Merci à Marie-Anges & Laurence pour votre aide cruciale, et à POC, Karine
Lanini & Marie-Andrée pour votre soutien porté a l'asso. JeCCo c'est lamour!
Sabine, Mariangela, Tic & Tac, Cyril, Benjamin, Nadège, Rozenn, Cécile, Robin, Jean-Christophe,
Ambre, Séverine, Jocelyne, Antoine, Caro, Aya, Fadila, Tiphaine, Emilie, Antoine, Julie, Pierre, Emilie,
Rémi, Maryline, pour nos discussions en tout genre, votre aide technique et vos recommandations.
...et bien d'autres que j'aurais certainement oublié, je m'en excuse d'avance.
Merci à Laurence, Carole, Nassia, Philippe, Nathalie, Cesc, Sarah & Anne Hosmalin, pour votre aide
financière qui m'a permis de participer aux World Ultimate and Guts Championships 2016, un projet
qui me tenait très à coeur.
Merci à toutes les personnes que j'ai rencontré au bât Fac, à Méchain ou à Roussy, dans l'asso, en
interasso, pour votre aide à passer les concours, relire mon mémoire, refaire CV & LM, chercher un
emploi, échanger un anticorps, un café, une bière, ou des idées voyage, je vous suis très
reconnaissante !
------
Merci à Chantal pour la relecture orthographique.
Merci à mon père d'avoir cru en moi et de m'avoir ainsi indirectement poussée à faire ce diplôme. Je
lui avais promis qu'il serait fier de moi. J'espère que ces dernières années le prouvent. J'ai été fière
de lui, de la façon dont il s'est battu ; pour cela je continuerai à me battre même s'il faut gravir des
montagnes.
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"Le plus important […] n'est pas de gagner mais de participer, car
l'important dans la vie ce n'est point le triomphe mais le combat ;
l'essentiel, ce n'est pas d'avoir vaincu mais de s'être bien battu."
Pierre de Courbertin
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Table des matières
INTRODUCTION……………………………………………………………………………………………………………………………17
1-Le muscle squelettique adulte…………………………………………………………………………………………………..19
1-1-Le rôle du muscle squelettique adulte……………………………………………………………………....19
1-2-La myogenèse…………………………………………………………….……………………………………………..19
a)-La mise en place muscle squelettique……………….…………………………………………….....19
b)-Les progéniteurs embryonnaires au cours du développement………………………......21
1-3-Les cellules satellites…….……………………………………………..…….………………………………………21
1-4-Les fibres musculaires…….……………………………………………..…….…………………………………….23
1-4-1-Le système contractile des fibres musculaires…….……………………………………….23
1-4-2-Le typage des fibres musculaires…….……………………………………………...............25
1-4-3-Le transfert d’énergie…….……………………………………………..…….………………….....26
1-4-4-Le métabolisme énergétique…….…………………………………………….....................27
a)-La glycolyse…………….……………………………………………...…………….…………….....28
b)-Le métabolisme mitochondrial…………….……………………………………………......28
1-5-La plasticité du muscle squelettique…………………………………….......................................29
1-5-1-L’hypertrophie……………………………………........................................................29
a)-Les voies de signalisation importantes pour la croissance des fibres……...30
b)-La contribution des cellules satellites……………………...…………….………….…...32
c)-Les signaux paracrines……………………...…………….……..........................……….32
1-5-2-L’atrophie……………………………………................................................................32
a)-L’autophagie……………………...…………….……….........................................…….33
b)-Le système ubiquitine-protéasome……………………...…………….………......…….34
c)-Les calpaines & caspases……………………...…………….…………......................….35
d)-Le phénomène Redox……………………...…………….…………..........................…..35
1-5-3-La régénération…………………………………….......................................................36
a)- Les voies de signalisation impliquées au cours de la régénération …….….36
b)-Le système immunitaire……………………...…………….………….......................….37
c)-Les micros ARN……………………...…………….………….....................................….37
2-Le facteur de transcription Serum Response Factor (SRF) ……………………………….....…….................37
2-1-La régulation de l’activité de SRF……………………………………............................................37
a)-La voie Rho-Actine……………………...…………….………….............................................….38
b)-La voie MAPK/TCF……………………...…………….….............................................………….38
2-2-Les gènes cibles de SRF…………………………………….................………………………………….......39
2-3-SRF dans le muscle squelettique…………………………………….................………....................40
3-Les objectifs du projet……………………………….................……………………...............………….................41
a)-Le rôle de SRF dans l’atrophie du muscle squelettique induite par dénervation………...……41
b)-Le rôle de SRF dans les cellules satellites……………………...…………….……........................………41
MATERIEL & METHODE………………………………………………………………………………………………..………………43
1-Le rôle du facteur de transcription SRF dans les cellules satellites adultes………………………………...45
1-1-Les modèles animaux…………………………………….............................................................45
a)-Le modèle KO conditionnel et inductible de SRF……………………...…………….……........45
b)-Le modèle KO total d’EGR1……………………...…………….……......................................…45
1-2-Les modèles cellulaires…………………..............................................................................45
a)-La séparation des cellules satellites…………...…………….…….......................................45
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Description:a)-Le rôle de SRF dans l'atrophie du muscle squelettique induite par est composée d'une cathode en or et d'une anode en argent avec une.
