Table Of ContentUNIVERSIDADE FEDERAL DE GOIÁS
FACULDADE DE FARMÁCIA
PROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO EM CIÊNCIAS FARMACÊUTICAS
KAMILLA AMARAL DAVID ROCHA
DESENVOLVIMENTO DE FORMULAÇÕES CONTENDO
VORICONAZOL ENCAPSULADO EM NANOPARTÍCULAS
LIPÍDICAS E PROMOTORES QUÍMICOS DE ABSORÇÃO
PARA APLICAÇÃO TÓPICA NA UNHA
Goiânia
2015
KAMILLA AMARAL DAVID ROCHA
DESENVOLVIMENTO DE FORMULAÇÕES CONTENDO
VORICONAZOL ENCAPSULADO EM NANOPARTÍCULAS
LIPÍDICAS E PROMOTORES QUÍMICOS DE ABSORÇÃO PARA
APLICAÇÃO TÓPICA NA UNHA
Dissertação apresentada ao Programa de Pós-Graduação em
Ciências Farmacêuticas da Universidade Federal de Goiás, como
parte dos requisitos para obtenção do grau de Mestre em Ciências
Farmacêuticas.
Área de Concentração: Fármacos e Medicamentos
Orientador: Profª. Dra. Stephânia Fleury Taveira
Goiânia
2015
A Deus, por sempre me fazer capaz.
Aos meus pais, por ser meu tudo.
Aos amigos e minha família, por ser minha alegria.
AGRADECIMENTOS
A minha orientadora Profª Drª Stephânia Fleury Taveira, por todos os ensinamentos, pela
paciência e pela oportunidade única. Obrigada pela confiança.
A Dra. Tais Gratieri e ao Prof. Dr. Ricardo Neves Marreto, por todas as contribuições neste
trabalho.
A Profª. Drª. Eliana Lima Martins por fazer possível a realização de todas as etapas desse
trabalho.
A Lígia, Anna Paula e Luana, pela ajuda para a realização deste trabalho.
A Lorena, por sempre estar disposta a me ajudar e ensinar. Obrigada pela amizade e pelas
palavras sempre tão bem vindas.
Aos meus amigos de laboratório Naiara Ieza, Najla, Guilherme, Grasiella, Leonardo, Patricia,
Luís Antônio, Jorge Luís, Maiulle, Percilia, João Hélio, Fabiana, Soraia, Marilisa e Relton.
Obrigada pela companhia nesta caminhada.
A Fernanda Bellato, pelos cuidados e carinho materno.
Ao Abatedouro de Suínos Caçula, em especial ao Dr. Armando, e seus colaboradores pela
doação dos cascos, assim como por toda a presteza e gentileza durante a extração dos
mesmos.
A Fundação de Amparo à Pesquisa no Estado de Goiás (FAPEG) e ao Conselho Nacional de
Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq), pelo auxílio financeiro concedido a este
projeto.
“É impossível avaliar a força que possuímos sem medir
o tamanho do obstáculo que podemos vencer, nem o
valor de uma ação sem sabermos o sacrifício que ela
comporta.”
H. W. Beecher
RESUMO
O voriconazol (VOR) é um antifúngico da classe tiazol, que possui ação comprovada
contra os dermatófitos, principais causadores da onicomicose. O tratamento tópico localizado
de patologias na unha é altamente desejado, visto que a administração oral de antifúngicos
tem se demonstrado ineficiente. Desta forma, o objetivo deste trabalho consiste no
desenvolvimento de carreadores lipídicos nanoestruturados (CLN) para administração tópica
do VOR na unha. Para a quantificação do VOR na placa ungueal foi desenvolvido e validado
um método analítico por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) com detecção no
UV-vis. Os CLN foram obtidos com behenato de glicerila, Miglyol®, polissorbato 80,
trioleato de sorbitano e tensoativo catiônico cloreto de cetilpiridnío (CPC), com diferentes
cargas do fármaco. As nanopartículas foram caracterizadas quanto ao tamanho, PdI, potencial
zeta, eficiência de encapsulação e recuperação, morfologia por microscopia eletrônica de
varredura (MEV), e a estabilidade das mesmas. Avaliação do fator de hidratação das
formulações e de promotores de permeação foi realizada. Análises dos cascos secos e
hidratados com os CLN foram feitas por MEV. Estudos de liberação e permeação passiva in
vitro do VOR livre e encapsulado em CLN foram realizados. O método de quantificação do
fármaco mostrou-se linear na faixa de concentração de 0,4 a 40 µg/mL. O limite de
quantificação foi de 400 ng/mL. Ainda, o método foi capaz de analisar o VOR sem sofrer
interferência dos componentes da unha e dos CLN. Os CLN (n=3) carregados com fármaco
apresentaram carga superficial positiva (em torno de +25 mV) e tamanho médio de 230 nm.
Obtiveram-se carreadores com 1,75% de carga de fármaco e com eficiência de encapsulação
de 74,52 (+ 2,13) %. A avaliação do fator de hidratação mostrou que a formulação com maior
quantidade de Miglyol® foi capaz de hidratar mais a unha, assim como o promotor que
apresentou melhor resultado foi a uréia (10%). Os CLN desenvolvidos com e sem adição de
promotores se mostraram estáveis por um período de 150 dias. Os estudos de liberação in
vitro demonstraram que a liberação do VOR a partir dos CLN ocorre de forma controlada a
partir da matriz lipídica. Não houve diferença significativa na penetração do fármaco quando
aplicado os CLN com e sem promotor, em relação ao VOR-Livre. Embora, quantidades de
fármacos foram encontradas mais profundamente com uso dos CLN em ensaios de
esgotamento da amostra, o que pode favorecer o tratamento de unhas acometidas pela
onicomicose.
Palavras-chave: Voriconazol, onicomicose, carreador lipídico nanoestruturado.
ABSTRACT
The voriconazole (VOR) is an antifungal from the thiazole class, which has a proven
action against dermatophytes, main cause of onychomycosis. Topical treatment of pathologies
located in the nail is highly desirable, since oral administration of antifungal agents have been
shown ineffective. Thus, the goal is the work was the development of nanostructured lipid
carriers (NLC) for nail topical administration of the VOR. To quantify VOR in the nail plate,
an analytical method was developed and validated by high-performance liquid
chromatography (HPLC) with detection in the UV-vis. CLNs were obtained with glyceryl
behenate, Miglyol®, polysorbate 80, sorbitan trioleate surfactant, and a cationic cetilpiridíneo
chloride (CPC) and different drug loading. Nanoparticles were characterized for medium
size, PdI, zeta potential, encapsulation efficiency and recovery, morphology by scanning
electron microscopy (SEM), and the stability. Hydration factor of the formulations and
permeation enhancers was performed. Analysis of dry and hydrated hooves treated with NLC
were achieved by SEM. Release and in vitro permeation studies were performed with
unloaded drug (VOR-free) and VOR loaded NLC. The drug quantification method was linear
in the concentration range from 0.4 to 40 mg / mL. The limit of quantitation was 400 ng/mL.
Furthermore, the method was able to analyze the VOR without suffering interference from
components of the nail and NLC. The NLC (n = 3) loaded with drug showed positive surface
charge (around +25 mV) and average size of 230 nm. The NLC obtained had 1.75% of drug
load, with encapsulation efficiency of 74.52 (+ 2.13)%. Hydration factor studies showed that
the formulation with the highest amount of Miglyol was able to hydrate the nail more as well
as the urea, which was the best promotor enhancer for nail hydration. NLC developed with
and without addition of promoters were stable for a period of 150 days. In vitro release studies
showed that the release VOR from the NLC occurs in a controlled manner from the lipid
matrix. There was no significant difference in drug penetration when applied CLNs with and
without promoter, for the VOR-Free. Although amounts of drug were found more deeply with
the use of the CLN in the sample depletion assays, which can facilitate treatment of nail
affected by onychomycosis.
Key-words: voriconazole, onichomycosis, nanostructured lipid carrier.
