Genética Clínica de la anemia de Fanconi

356 Pages·2013·7.26 MB·Spanish

Facultad de Biociencias
Departamento de Genética y Microbiología
Unidad de Genética

Genética Clínica de la anemia de Fanconi

TESIS DOCTORAL

Juan Pablo Trujillo Quintero
2013
Facultad de Biociencias
Departamento de Genética y Microbiología
Unidad de Genética

Genética Clínica de la anemia de Fanconi

Memoria presentada por JUAN PABLO TRUJILLO QUINTERO en el marco de los
estudios de doctorado en Genética de la Universitat Autònoma de Barcelona para
optar al grado de Doctor por la Universita t Autònoma de Barcelona.

Director de tesis Autor

Dr. Jordi Surrallés Calonge Juan Pablo Trujillo Quintero
Catedrático de Genética

UAB
A todos los pacientes afectos de una enfermedad rara
y a sus Familias
Es verdad que estamos hechos de átomos,
pero también de historias

Eduardo Galeano
Agradecimientos:

A mi familia, en especial a mi Madre y mi hermano por todo
el apoyo incondicional y su anhelo de mi pronto regreso.
A Natalia por estos últimos años, a todo la gente con la que
he tenido el gusto de trabajar en el laboratorio y han sido
participes de mis aciertos y me han ayudado a superar mis
dificultades, en especial a Jordi Minguillón, Roser Pujol y
Jose Antonio Casado por todo el soporte técnico científico
brindado. A todos estas personas que me han brindado un
amistad incondicional en estos últimos años y me han
enseñado otras formas de ver el mundo y de vivirlo.
Finalmente quiero agradecerle a Jordi Surrallés por darme
la oportunidad de hacerme participe de su grupo de
investigación, por permitirme aprender resolviendo casos
reales en el área de la Genética clínica, por la orientación
científica y académica aportada, y por su guía y
supervisión para culminar esta tesis doctoral.
TABLA DE CONTENIDOS
TABLA DE CONTENIDOS

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ABREVIATURAS .........................................................................................

1. INTRODUCCIÓN ........................................................................... 1

1.1. HISTORIA DE LA ANEMIA DE FANCONI .................................. 3
1.2. BIOLOGIA MOLECULAR DE LA RUTA FA/BRCA ..................... 8
1.2.1. La Ruta FA/BRCA ...................................................................... 11
1.2.1.1. Proteínas del complejo nuclear AF ......................................... 11
1.2.1.2. Proteínas del Complejo ID ....................................................... 12
1.2.1.3. Proteínas posteriores al complejo ID ....................................... 13
1.2.2. Activación y regulación de la ruta FA/BRCA .......................... 15
1.2.3. Función de la ruta FA/BRCA ..................................................... 16
1.2.4. Sobre la proteína FANCA .......................................................... 20
1.2.5. Sobre las otras proteínas AF .................................................... 22
1.3. MANIFESTACIONES CLÍNICAS DE LA AF .............................. 25
1.3.1. Malformaciones congénitas ..................................................... 26
1.3.2. Alteraciones hematológicas ..................................................... 35
1.3.3. Disfunciones endocrinas .......................................................... 37
1.3.4. Predisposición a desarrollar tumores sólidos ........................ 40
1.3.5. Variabilidad del fenotipo clínico en función del grupo de
complementación ...................................................................... 41
1.3.6. Correlación genotipo-fenotipo ................................................. 42
1.3.6.1. Tipos de mutaciones y longevidad .......................................... 43
1.3.6.2. Mutaciones idénticas con diferentes fenotipos clínicos .......... 45
1.3.6.3. Características de progeria segmental en pacientes con AF .. 46
1.4. FENOTIPO DE LA CÉLULA AF ................................................. 49
1.4.1. Fragilidad Cromosómica .......................................................... 50
1.4.2. Hipersensibilidad a los agentes inductores de ICLs .............. 52
iii
1.4.3. Alteraciones del ciclo celular en AF ........................................ 53
1.4.4. Sensibilidad al estrés oxidativo ............................................... 54
1.4.5. Desregulación de la respuesta inflamatoria y la apoptosis ... 56
1.4.6. Formación de Focos en RAD51 ................................................ 57
1.4.7. Fallo en la monoubiquitinación de FANCD2 ........................... 58
1.4.8. Daño inducido por aldehídos endógenos ............................... 58
1.4.9. Disfunción telomérica……………………………………………....61
1.5. DIAGNÓSTICO DE LA AF .......................................................... 62
1.5.1. Presunción diagnóstica por el fenotipo clínico ...................... 63
1.5.2. Confirmación diagnóstica citogenética ................................... 63
15.3. Otras técnicas de ayuda diagnóstica ...................................... 64
1.5.4. Subtipaje de pacientes AF por complementación retroviral . 67
1.5.5. Análisis mutacional de los pacientes AF ................................ 68
1.6. MOSAICISMO POR REVERSIÓN SOMÁTICA EN LOS
PACIENTES AF .......................................................................... 73
1.6.1. Diagnóstico de pacientes mosaicos ........................................ 74
1.7. CARACTERIZACIÓN GENETICA DE LOS PACIENTES AF ..... 76
1.7.1. Grupos de complementación nivel mundial ........................... 77
1.7.1.1. Grupos de complementación en la población española ...... 78
1.7.2. Espectro y análisis mutacional a nivel mundial ..................... 78
1.7.2.1. Espectro y análisis mutacional en la población española .... 80
1.8. DIAGNÓSTICO DIFERENCIAL .................................................. 81
1.8.1. Síndromes de Inestabilidad Genómica .................................... 81
1.8.8.1. Síndrome de Seckel .................................................................. 81
1.8.1.2. Síndrome de rotura cromosómica de Nijmegen .......................... 85
1.8.1.3. Síndrome de Bloom ..................................................................... 87
1.8.1.4. Ataxia telangiectasia .................................................................... 90
1.8.1.5. Otros síndromes de inestabilidad genómica ................................ 91
1.9.1. Síndromes de fallo de médula ósea congénitos ..................... 96
1.9.1.1. Disqueratosis congenital ............................................................. 97
1.9.1.2. Anemia de Diamond-Blackfan ................................................... 100
iv
1.9.1.3. Síndrome de Shwachman-Diamond .......................................... 103
1.9.2.3. Otros síndromes de fallo medular congénito ............................. 104
1.10. MANEJO MEDICO DE LOS PACIENTES AF ......................... 105
1.10.1. Manejo Hematológico ............................................................. 106
1.10.1.1. Seguimiento del paciente ................................................... 106
1.10.1.2. Tratamiento con andrógenos ............................................. 107
1.10.1.3. Transfusiones sanguíneas.................................................. 108
1.10.1.4. Tratamiento con citoquinas…………………………………...109
1.10.1.5. Trasplante de médula ósea ................................................ 109
1.10.1.6. Terapias en el fututo: Terapia génica ................................. 111
1.10.2. Manejo de las anomalías de cabeza y cuello ........................ 114
1.10.3. Manejo de las alteraciones esqueléticas y estructurales .... 114
1.10.4. Manejo de los problemas gastrointestinales, hepáticos
y soporte nutricional ............................................................... 116
1.10.5. Manejo endocrinológico ......................................................... 117
1.10.6. Manejo de problemas ginecológicos y de fertilidad ............. 118
1.10.7. Consejo genético ..................................................................... 119
1.10.7.1. Valoración del riesgo de desarrollar cáncer. ...................... 120
1.10.7.2. Diagnóstico molecular ........................................................ 121
1.10.7.3. Diagnóstico prenatal y preimplantacional .......................... 121
1.10.8. Soporte psicosocial ................................................................ 126

2. OBJETIVOS .............................................................................. 129

3. MATERIALES Y MÉTODOS ..................................................... 132

3.1. POBLACIÓN Y MUESTRAS..................................................... 134
3.1.1. Obtención de datos clínicos y muestras biológicas ........... 134
3.1.2. Obtención de líneas celulares ................................................ 134
3.1.3. Extracción de DNA ................................................................. 135
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