Table Of ContentP. J. Stoward Editor
Fixation in
Histochemistry
Fixation
in Histochemistry
FFiixxaattiioonn
iinn HHiissttoocchheemmiissttrryy
EEddiitteedd bbyy
JJ..
PP.. SSttoowwaarrdd
SSeenniioorr LLeeccttuurreerr iinn AAnnaattoommyy
UUnniivveerrssiittyyooff DDuunnddeeee
aanndd EEddiittoorr ooff TThhee HHiissttoocchheemmiiccaall JJoouurrnnaall
FFoorreewwoorrdd bbyy PPrrooffeessssoorr AA.. GG.. EE.. PPeeaarrssee
s
SSpprriinnggeerr--SScciieennccee++B Buussiinneessss MMeeddiiaal, BB..YV..
11997733
©© II997722,, II997733 SSpprriinnggeerr SScciieennccee++BBuussiinneessss MMeeddiiaa DDoorrddrreecchhtt
OOrriiggiinnaallllyy ppuubblliisshheedd bbyy CChhaappmmaann aanndd HHaallll LLttdd iinn 11997733..
SSooffttccoovveerr rreepprriinntt oofftthhee hhaarrddccoovveerr 11sstt eeddiittiioonn 11997733
RReepprriinntteedd,, wwiitthh aaddddiittiioonnaall ffoorreewwoorrdd,,
pprreeffaaccee aanndd iinnddeexx,,ffrroomm TThhee HHiissttoocchheemmiiccaall JJoouurrnnaall
VVoolluummee FFoouurr,, NNuummbbeerrss FFoouurr,, FFiivvee,, aanndd SSiixx,,
aanndd VVoolluummee FFiivvee,, NNuummbbeerr OOnnee..
ISBN 978-0-412-12050-3 ISBN 978-1-4899-3260-0 (eBook)
DOI 10.1007/978-1-4899-3260-0
SSBBNN 441122 1122005500 XX
AAllll rriigghhttss rreesseerrvveedd.. NNoo ppaarrtt ooff tthhiiss
bbooookk mmaayy bbee rreepprriinntteedd oorr rreepprroodduucceedd oorr
uuttüüiizzeedd iinn aannyy ffoorrmm oorr bbyy aannyy eelleeccttrroonniicc,,
mmeecchhaanniiccaall oorr ootthheerr mmeeaannss,, nnooww kknnoowwnn oorr
hheerreeaafftteerr iinnvveenntteedd,, iinncclluuddiinngg pphhoottooccooppyyiinngg
aanndd rreeccoorrddiinngg,, oorr iinn aannyy iinnffoorrmmaattiioonn ssttoorraaggee
aanndd rreettrriieevvaall ssyysstteemm,, wwiitthhoouutt ppeerrmmiissssiioonn iinn
wwrriittiinngg ffrroomm tthhee ppuubblliisshheerr..
DDiissttrriibbuutteedd iinn tthhee UU..SS..AA..
bbyy HHaallsstteedd PPrreessss,, aa DDiivviissiioonn
ooff JJoohhnn WWiilleeyy && SSoonnss,, IInncc..,,
NNeeww YYoorrkk
CCoonntteennttss
FFoorreewwoorrdd AA.. GG.. EE.. PPeeaarrssee ppaaggee iixx
PPrreeffaaeeee PP.. JJ.. SSttoowwaarrdd XXll
CCoonnttrriibbuuttoorrss XXllllll
RReeaaeettiioonnss ooff aa llddeehhyyddeess wwiitthh uunnssaattuurraatteedd ffaattttyy
aacciiddss dduurriinngg hhiissttoollooggiiccaall ffiixxaattiioonn DDeennnniiss JJoonneess 11
TThheeoorreettiiccaall aanndd pprraaccttiiceaall aassppeecettss ooff
gglluuttaarraallddeehhyyddee ffiixxaattiioonn DDaavviidd HHooppwwoooodd 4477
OOssmmoollaarriittyy ooff oossmmiiuumm tteettrrooxxiiddee aanndd QQ.. BBoonnee
gglluuttaarraallddeehhyyddee ffiixxaattiivveess KK.. PP.. RRyyaann 8855
TThhee eeffffeecctt ooff ffiixxaattiivvee ttoonniicciittyy oonn tthhee mmyyoossiinn
ffiillaammeenntt llaattttiiccee vvoolluummee ooff ffrroogg mmuussccllee ffiixxeedd
ffoolllloowwiinngg eexxppoossuurree ttoo nnoorrmmaall oorr hhyyppeerrttoonniiee
RRiinnggeerr DD.. FF.. DDaavveeyy 11°°33
TThhee ddeemmoonnssttrraattiioonn ooff aacciidd pphhoosspphhaattaassee iinn iinn
vviittrroa eeuullttuurreedd ttiissssuuee eeeellllss.. SSttuuddiieess oonn tthhee
ssiiggnniiffiiceaanneeee ooff ffiixxaattiioonn,, ttoonniicciittyy aanndd UUllffTT.. BBrruunnkk
ppeerrmmeeaabbiilliittyy JJaann LL.. EE.. EErriicessssoonn 112211
CCyyttooeehheemmiieeaall eevviiddeenneeee ffoorr tthhee lleeaakkaaggee ooff aacciidd
pphhoosspphhaattaassee tthhrroouugghh uullttrraassttrruuccttuurraallllyy iinnttaacctt UUllffTT.. BBrruunnkk
llyyssoossoommaallmmeemmbbrraanneess JJaann LL.. EE.. EErriiccssssoonn 113377
IImmpprroovveedd pprreesseerrvvaattiioonn ooffaa llkkaalliinnee pphhoosspphhaattaassee KK.. JJ.. DDaavviieess
iinn ssaalliivvaarryy ggllaannddss oofftthhee ccaatt JJ.. RR.. GGaarrrreetttt 115511
FFiixxaattiioonn aanndd ttiissssuuee pprreesseerrvvaattiioonn ffoorr
aannttiibbooddyy ssttuuddiieess HH.. RR.. PP.. MMiilllleerr 116677
EEnnzzyymmee mmaarrkkeerrss:: tthheeiirr lliinnkkaaggee wwiitthh pprrootteeiinnss
aanndd uussee iinn iimmmmuunnoo--hhiissttooeehheemmiissttrryy SSttrraattiiss AAv vrraammeeaass 118833
FFiixxaattiioonn:: WWhhaatt sshhoouulldd tthhee ppaatthhoollooggiisstt ddoo ?? II.. MM.. PP.. DDaawwssoonn 119933
IInnddeexx 119999
vviiii
FFoorreewwoorrdd
bbyy PPrrooffeessssoorr AA.. GG.. EEvveerrssoonn PPeeaarrssee
TThhee ttiiddee ooff tthhee SSyymmppoossiiuumm,, aatt wwhhiicchh tthhee ppaappeerrss wwhhiicchh ccoommpprroommiissee tthhiiss vvoolluummee wweerree
pprreesseenntteedd,, iiss oofftthhee uuttmmoosstt iimmppoorrttaannccee.. IItt wwaass nnoott ''FFiixxaattiioonn aanndd TTiissssuuee DDeessttrruuccttiioonn'' oorr
''FFiixxaattiioonn aanndd LLoossss ooffTTiissssuuee CCoommppoonneennttss'',, bbuutt ''FFiixxaattiioonn aanndd TTiissssuuee PPrreesseerrvvaattiioonn''..
HHiissttoorriiccaall ffiixxaattiivveess,, ssoommee ssttiillll wwiitthh uuss iinn tthhee ffiieelldd oofflliigghhtt mmiiccrroossccooppyy aafftteerr oovveerr 110000
yyeeaarrss,, aarree nnoott lleessss gguuiillttyy tthhaann tthhee nneeww hhiissttoorriiccaall ''ffiixxaattiivveess'' ooff uullttrraassttrruuccttuurraall pprraaccttiiccee
ssoommee ooffw whhiicchh rreemmoovvee uupp ttoo 6600%% oofft thhee mmaatteerriiaall oorriiggiinnaallllyy pprreesseenntt iinn tthhee ssppeecciimmeenn aanndd
ccoonnvveerrtt tthhee rreemmaaiinnddeerr iinnttoo cchheemmiiccaallllyy iinneerrtt pprroodduuccttss..
TThheerree mmuusstt bbee ffeeww hhiissttoocchheemmiissttss wwhhoo ddoo nnoott aapppprreecciiaattee tthhee ggrreeaatt nneeeedd ffoorr iimmpprroovvee
mmeennttss iinn tthhee pprraaccttiiccee ooff ffiixxaattiioonn,, bbuutt wwhheennccee ccaann wwee hhooppeeffuullllyy eexxppeecctt tthhee aarrrriivvaall ooff ssuucchh
iimmpprroovveemmeennttss ??
AAppaarrtt ffrroomm oouutt oofftthhee bblluuee,, oorr rreevvoolluuttiioonnaarryy,, aaddvvaanncceess ssuucchh aass tthhee aaddvveenntt ooff gg lluuttaarraallddee
hhyyddee,, tthheerree aarree ppeerrhhaappss tthhrreeee pprriinncciippaall ssoouurrcceess.. TThhee ffiirrsstt iiss tthhrroouugghh tthheeoorreettiiccaall,, tthhaatt iiss
ttoo ssaayy cchheemmiiccaall aanndd pphhyyssiiccaall,, ccoonnssiiddeerraattiioonnss,, iinnvvoollvviinngg pprraaccttiiccaall aaccttiioonn aass aa ddiirreecctt ccoonnssee
qquueennccee.. TThhee sseeccoonndd iiss tthhrroouugghh eemmppiirriiccaall eexxppeerriimmeennttaall,, tthhaatt iiss ttoo ssaayy ttrriiaall aanndd eerrrroorr,,
pprroocceedduurreess aanndd tthhee tthhiirrdd,, tthhrroouugghh mmaannrreeuuvvrreess ddeessiiggnneedd ttoo rreedduuccee ffiixxaattiioonn ttoo aammiinniimmuumm..
OOuurr uunnddeerrssttaannddiinngg ooff tthhee pprroocceesssseess iinnvvoollvveedd iinn ffiixxaattiioonn iiss lliimmiitteedd aanndd oouurr nneeeedd ffoorr ssuucchh
uunnddeerrssttaannddiinngg iiss iinnccrreeaasseedd bbyy tthhee nneeeeddss ooff ssuucchh ddiisscciipplliinneess aass iimmmmuunnoofflluuoorreesscceennccee aanndd
eelleeccttrroonn iimmmmuunnooccyyttoocchheemmiissttrryy.. HHeerree tthhee ppaarraammoouunntt nneeeedd ffoorr pprreesseerrvvaattiioonn ooff aa pprrootteeiinn
((aannttiiggeenn)) ccoonnfflliiccttss wwiitthh tthhee aabbssoolluuttee nneecceessssiittyy ttoo lleeaavvee iinnttaacctt tthhee aannttiiggeenniicc ddeetteerrmmiinnaanntt
ssiittee.. SSiimmiillaarrllyy,, iinn tthhee ccaassee ooff eennzzyymmee ccyyttoocchheemmiissttrryy,, aatt aallll mmiiccrroossccooppiicc lleevveellss,, tthhee nneeeedd
ttoo pprreesseerrvvee aa pprrootteeiinn ((eennzzyymmee)) ccoonnfflliiccttss wwiitthh tthhee aabbssoolluuttee nneecceessssiittyy ttoo lleeaavvee iinnttaacctt tthhee
aaccttiivvee ssiittee oofftthhee eennzzyymmee..
TThhee pprreesseenntt vvoolluummee ccoonnttaaiinnss ffoooodd ffoorr tthhoouugghhtt iinn rreellaattiioonn ttoo aallll tthhee pprrooppoosseedd ssoouurrcceess
ooffi immpprroovveedd ffiixxaattiioonn,, iinncclluuddiinngg tthhee rreevvoolluuttiioonnaarryy oonneess.. IItt sshhoouulldd ccoommmmaanndd tthhee iinntteerreesstt
nnoott oonnllyy ooffhhiissttoocchheemmiissttss bbuutt aallssoo ooffmm iiccrroossccooppiissttss iinn mmaannyy ddiiffffeerreenntt sscciieenncceess.. II wwoouulldd hhooppee
tthhaatt ssoommee ooffi ittss rreeaaddeerrss mmiigghhtt bbee ssttiimmuullaatteedd bbyy tthheeiirr rreeaaddiinngg ttoo ggoo oouutt aanndd ddoo eevveenn bbeetttteerr..
DDeeppaarrttmmeenntt 00// HHiissttoocchheemmiissttrryy,,
RRooyyaall PPoossttggrraadduuaattee MMeeddiiccaall SScchhooooll,,
HHaammmmeerrssmmiitthh HHoossppiittaall,, LLoonnddoonn..
iixx
PPrreeffaaccee
TThhee cchhaapptteerrss iinn tthhiiss bbooookk,, tthhee ffiirrsstt ttoo bbee ppuubblliisshheedd oonn ffiixxaattiioonn,, aarree eesssseennttiiaallllyy rreepprriinnttss ooff
aarrttiicclleess tthhaatt hhaavvee aappppeeaarreedd iinn rreecceenntt iissssuueess ooff TThhee HHiissttooeehheemmiieeaall JJoouurrnnaall.. WWiitthh ttwwoo
eexxcceeppttiioonnss,, tthhee aarrttiicclleess aarree eexxppaannddeedd vveerrssiioonnss ooff ppaappeerrss pprreesseenntteedd aatt aa SSyymmppoossiiuumm
eennttiittlleedd ''IImmpprroovveemmeennttss iinn ffiixxaattiioonn aanndd ttiissssuuee pprreesseerrvvaattiioonn ffoorr hhiissttoocchheemmiissttrryy'' oorrggaanniizzeedd
bbyy PPrrooffeessssoorr JJ.. RR.. GGaarrrreetttt oonn bbeehhaallff ooff tthhee HHiissttoocchheemmiissttrryy aanndd CCyyttoocchheemmiissttrryy SSeeccttiioonn
oofftthhee RRooyyaall MMiiccrroossccooppiiccaall SSoocciieettyy aatt OOxxffoorrdd oonn 1133 aanndd 1144 AApprriill 11997722..
MMoosstt ooff uuss aarree aawwaarree ooff tthhee pprroobblleemmss ooff ffiixxaattiioonn bbuutt aarree rreelluuccttaanntt ttoo ffaaccee tthheemm,, hhooppiinngg
tthhaatt ootthheerrss wwiillll ttaacckkllee aanndd ssoollvvee tthheemm iinnsstteeaadd.. WWee ccaannnnoott aaffIIoorrdd ttoo wwaaiitt aannyy lloonnggeerr..
EEqquuiippmmeenntt,, eessppeecciiaallllyy eelleeccttrroonn mmiiccrroossccooppeess aanndd mmiiccrrooaannaallyyttiiccaall iinnssttrruummeennttss,, aanndd
llooccaalliizzaattiioonn tteecchhnniiqquueess aarree bbeeccoommiinngg mmoorree aanndd mmoorree ssoopphhiissttiiccaatteedd,, bbuutt tthheeiirr aapppplliiccaattiioonn
iiss bbeeiinngg hheelldd bbaacckk bbyy nnoott kknnoowwiinngg hhooww ttoo ffiixx aanndd pprreesseerrvvee ttiissssuuee ssppeecciimmeennss iinn oorrddeerr ttoo
oobbttaaiinn pprroodduucceeaabbllee rreessuullttss ffrroomm wwhhiicchh tthhee ttrruuee iinn vviivvoo ssttrruuccttuurree,, ccoommppoossiittiioonn aanndd ffuunncc
ttiioonn ccaann bbee iinnffeerrrreedd wwiitthh cceerrttaaiinnttyy.. TThheerree aarree ttwwoo bbaassiicc pprroobblleemmss hheerree.. TThhee ffiirrsstt iiss ttoo
ddeecciiddee tthhee ccrriitteerriiaa aass ttoo wwhhaatt ccoonnssttiittuutteess ''ggoooodd'' ffiixxaattiioonn.. SSuubbjjeeccttiivvee aasssseessssmmeennttss ooff
mmoorrpphhoollooggyy aarree nnoott eennoouugghh.. OObbjjeeccttiivvee mmeeaassuurreemmeennttss aarree rreeqquuiirreedd,, ooff tthhee kkiinndd DDrrss
DDaavviieess,, BBoonnee && RRyyaann ddeessccrriibbee iinn tthheeiirr aarrttiicclleess..
TThhee sseeccoonndd pprroobblleemm iiss ttoo uunnrraavveell tthhee eeffIIeeccttss ffiixxaattiioonn aanndd ttiissssuuee pprreesseerrvvaattiioonn pprroo
cceedduurreess hhaavvee oonn tthhee cchheemmiiccaall aanndd pphhyyssiiccaall pprrooppeerrttiieess ooff tthhee vvaarriioouuss ccoonnssttiittuueennttss ooff
ttiissssuueess.. TThhiiss iiss aa ccoommpplleexx ssuubbjjeecctt,, aass DDrr JJoonneess cclleeaarrllyy ddeemmoonnssttrraatteess iinn hhiiss cchhaapptteerr..
NNeevveerrtthheelleessss,, DDrr HHooppwwoooodd rreevveeaallss,, aa ccoonnssiiddeerraabbllee iinnssiigghhtt iinnttoo ssuucchh mmaatttteerrss ccaann bbee
oobbttaaiinneedd wwiitthh ssiimmppllee eexxppeerriimmeennttaall pprroocceedduurreess.. HHoowweevveerr,, ffoorr tthhee ttiimmee bbeeiinngg,, mmoosstt
bbiioollooggiissttss mmuusstt ccoonntteenntt tthheemmsseellvveess wwiitthh mmoorree pprraaggmmaattiicc aapppprrooaacchheess ssuucchh aass aarree ddee
ssccrriibbeedd bbyy DDrrss MMiilllleerr && DDaavviieess aanndd PPrrooffeessssoorrss AA vvrraammeeaass && GGaarrrreetttt..
FFiixxaattiioonn iiss oofftteenn rreeggaarrddeedd aass aa nneecceessssaarryy eevviill.. TThhaatt iitt ccaann bbee ttuurrnneedd ttoo aaddvvaannttaaggee iiss
iilllluussttrraatteedd bbyy PPrrooffeessssoorr EErriiccssssoonn''ss wwoorrkk oonn ttiissssuuee ccuullttuurree cceellllss.. BBuutt aatt tthhee eenndd oofftthhee ddaayy,,
ssoommee bbiioollooggiissttss mmaayy ssttiillll ddeessppaaiirr.. TThheeyy wwiillll ssyymmppaatthhiizzee wwiitthh PPrrooffeessssoorr DDaawwssoonn''ss ccrrii ddee
eemmuurr:: ''FFiixxaattiioonn:: wwhhaatt sshhoouulldd tthhee ppaatthhoollooggiisstt ddoo ??'' EEnnoouugghh iiss wwrriitttteenn iinn tthhiiss bbooookk ttoo sshhooww
tthhaatt eeaacchh ooffuuss ccaann aanndd sshhoouulldd ddoo ssoommeetthhiinngg,, aanndd aafftteerr tthhaatt,, ddoo eevveenn mmoorree.. IIfftthhee hhooppeess
PPrrooffeessssoorr PPeeaarrssee eexxpprreesssseess iinn hhiiss FFoorreewwoorrdd aarree ffuullffiilllleedd,, hhooppeess wwhhiicchh II sshhaarree,, tthhiiss bbooookk
wwiillll hhaavvee ttoo bbee rreevviisseedd ssoo aass ttoo ggiivvee aa bbaallaanncceedd aanndd uupp--ttoo--ddaattee rreevviieeww ooff tthhee wwhhoollee ssttaattee ooff
tthhee aarrtt;; ppeerrhhaappss bbyy tthhaatt ttiimmee,, tthhee aarrtt wwiillll hhaavvee bbeeccoommee aa sscciieennccee..
PP..JJ.. SS..
DDuunnddeeee
JJaannuuaarryy II997733
xxii
CCoonnttrriibbuuttoorrss
DDrr SSttrraattiiss AAVVRRAAMMEEAASS
NNooww:: UUnniittee dd''IImmmmuunnooccyyttoocchhiimmiiee,, DDeeppaarrtteemmeenntt ddee BBiioollooggiiee MMoolleeccuullaaiirree,,
IInnssttiittuutt PPaasstteeuurr,, PPaarriiss
DDrr QQ.. BBOONNEE
MMaarriinnee BBiioollooggiiccaall AAssssoocciiaattiioonn oofftthhee UU..KK..,, CCiittaaddeell HHiillii,, PPllyymmoouutthh
DDrrUUllffTT.. BBRRUUNNKK
DDeeppaarrttmmeenntt ooffPPaatthhoollooggyy,, UUnniivveerrssiittyy ooffUUppppssaallaa
DDrr DD.. FF.. DDAA VVEEYY
NNooww:: DDeeppaarrttmmeenntt ooffPPhhyyssiioollooggyy,, MMoonnaasshh UUnniivveerrssiittyy,, CCllaayyttoonn,, VViiccttoorriiaa,, AAuussttrraalliiaa
DDrr KK.. JJ.. DDAA VVIIEESS
DDeeppaarrttmmeenntt ooff OOrraall PPaatthhoollooggyy,, TThhee DDeennttaall SScchhooooll,, KKiinngg''ss CCoolllleeggee HHoossppiittaall
MMeeddiiccaall SScchhooooll,, LLoonnddoonn
PPrrooffeessssoorr 11.. MM.. PP.. DDAAWWSSOONN
NNooww:: DDeeppaarrttmmeenntt ooffPPaatthhoollooggyy,, UUnniivveerrssiittyy ooffNNoottttiinngghhaamm
PPrrooffeessssoorr JJaann LL.. EE.. EERRIICCSSSSOONN
DDeeppaarrttmmeenntt ooffPPaatthhoollooggyy aatt SSaabbbbaattssbbeerrgg''ss HHoossppiittaall,, KKaarroolliinnsskkaa IInnssttiittuutteett
MMeeddiiccaall SScchhooooll,, SSttoocckkhhoollmm
PPrrooffeessssoorr JJ.. RR.. GGAARRRREETTTT
DDeeppaarrttmmeenntt ooff OOrraall PPaatthhoollooggyy,, TThhee DDeennttaall SScchhooooll,, KKiinngg''ss CCoolllleeggee HHoossppiittaall
MMeeddiiccaall SScchhooooll,, LLoonnddoonn
DDrr DDaavviidd HHOOPPWWOOOODD
NNooww:: DDeeppaarrttmmeenntt ooffPPaatthhoollooggyy,, UUnniivveerrssiittyy ooffDDuunnddeeee
DDrr DDeennnniiss JJOONNEESS
NN..VV.. OOrrggaannoonn,, OOssss,, HHoollllaanndd
DDrr HH.. RR.. PP.. MMIILLLLEERR
DDeeppaarrttmmeenntt ooffVVeetteerriinnaarryy PPaatthhoollooggyy,, UUnniivveerrssiittyy ooff GGllaassggooww
DDrr KK.. PP.. RRYYAANN
MMaarriinnee BBiioollooggiiccaall AAssssoocciiaattiioonn oofftthhee UU..KK..,, CCiittaaddeell HHiillII,, PPllyymmoouutthh
XXllllll
RReeaaccttiioonnss o0/f aallddeehhyyddeess wwiitthh
uunnssaattuurraatteedd /faattttyy aacciiddss
dduurriinngg hhiissttoollooggiiccaallffiixxaattiioonn**
DDEENNNNIISS JIOONNEESS
v.
NN.. V. OOrrggaannoonn,, OOssss,, HHoollllaanndd
SSyynnooppssiiss.. FFoorrmmaallddeehhyyddee rreeaaccttss wwiitthh uunnssaattuurraatteedd ffaattttyy aacciiddss iinn ttiissssuueess dduurriinngg hhiissttoo
llooggiiccaall ffiixxaattiioonn.. FFoorr eexxaammppllee,, tthhee rreeaaccttiioonn ooffffoorrmmaallddeehhyyddee wwiitthh oolleeiicc aacciidd ggiivveess rriissee ttoo
ccoommppoouunnddss wwiitthh tthhee ssttrruuccttuurreess sshhoowwnn bbeellooww.. TThhee ssttrruuccttuurreess oofftthhee mmaajjoorr rreeaaccttiioonn pprroo
dduuccttss hhaavvee bbeeeenn ccoonnffiirrmmeedd,, bbuutt tthhoossee oofft thhee mmiinnoorr pprroodduuccttss hhaavvee nnoott bbeeeenn ccoonndduussiivveellyy
ddeemmoonnssttrraatteedd.. EEsstteerriiffiieedd uunnssaattuurraatteedd ffaattttyy aacciiddss rreeaacctt mmoorree sslloowwllyy,, bbuutt tthhee rreeaaccttiioonn iiss
ootthheerrwwiissee ssiimmiillaarr.. AAccrroolleeiinn hhaass bbeeeenn ffoouunndd ttoo rreeaacctt iinn aa ssiimmiillaarr ffaasshhiioonn,, bbuutt tthhee rreeaaccttiioonn
iiss ffaarr mmoorree ccoommpplleexx..
TThhee ooccccuurrrreennccee ooffs suucchh ccoommppoouunnddss iinn ttiissssuueess ppaarrttllyy eexxppllaaiinnss tthhee lloossss oofflliippiiddss dduurriinngg
ffiixxaattiioonn,, aanndd rraaiisseess ssoommee iinntteerreessttiinngg ppoossssiibbiilliittiieess rreeggaarrddiinngg nneeww ffiixxaattiivveess aanndd nneeww hhiissttoo
cchheemmiiccaall rreeaaccttiioonnss..
MMaajjoorr pprroodduuccttss
CH3(CH2)7 -CH - CH-(CH2)7-COOH end isomer
I I
OH CH20H
CH3(CH2)7-CH-CH-(CH2)7-COOH ena isomer
I I
o CH20H
I
CH20H
CH3(CH2)7-CH-CH-(CH21?-COOH end isomer
cf
tH2
\ /
CH2-O
CH3(CH2)6CH=CH-CH-(CH2)7-COOH end isomer
I
CH20H
** TThhee eexxppeerriimmeennttaall wwoorrkk ddeessccrriibbeedd iinn tthhiiss ppaappeerr wwaassppeerrffoorrmmeedd iinn tthhee DDeeppaarrttmmeennttss ooffP Paatthhoollooggyy
aanndd AApppplliieedd BBiioollooggyy,, UUnniivveerrssiittyy ooff CCaammbbrriiddggee..
II
22 JJoonneess
MMiinnoorr pprroodduuccttss
OH
I
CH3(CH2)7CH-CH-(CH2)7 -COOH
I
CH2
I
o
I
CH3(CHZ)7CH -CH-(CHZ)7 -COOH
I
CH20H
,
CH3- (CHZ)7 -CH/ -CH-CH=CH -(CHZ)5COOH
CHz CHZ
"0/
-"CH
./ ~
CH3-(CH2)s-CH C-(CHZ)7-COOH
I I
CHz CHz
~O/
IInnttrroodduuccttiioonn
TThhee iiddeeaall ffiixxaattiivvee sshhoouulldd pprreesseerrvvee aa ttiissssuuee aaggaaiinnsstt mmiiccrroobbiiaall aaccttiivviittyy,, oossmmoottiicc ddaammaaggee aanndd
aauuttoollyyssiiss,, aanndd sshhoouulldd,, ooff ccoouurrssee,, eennssuurree tthhaatt eevveenn aafftteerr rreemmoovvaall oofft thhee ffiixxaattiivvee tthhee ssttrruucc
ttuurree ooff tthhee ttiissssuuee rreemmaaiinnss aann aaccccuurraattee rreepprreesseennttaattiioonn ooff tthhee ssttrruuccttuurree iinn tthhee lliivviinngg ttiissssuuee;;
aaddddiittiioonnaaUllyy,, cceeUllss iinn tthhee ttiissssuuee sshhoouulldd rreettaaiinn tthheeiirr oorriiggiinnaall ssiizzee,, nnoo mmaatteerriiaall sshhoouulldd eessccaappee
ffrroomm tthhee cceeUllss dduurriinngg tthhee ffiixxaattiioonn aanndd tthhee rreeaaccttiivviittyy ooff tthhee ssuubbssttaanncceess iinn tthhee cceeUll,, aass
cchheemmiiecaallss,, sshhoouulldd rreemmaaiinn ssuuffffiicciieennttllyy hhiigghh ttoo eennaabbllee tthheemm ttoo bbee llooccaatteedd aanndd,, wwhheerreevveerr
ppoossssiibbllee,, iiddeennttiiffiieedd bbyy mmeeaannss ooff ssuuiittaabbllee rreeaaccttiioonnss.. PPrreeffeerraabbllyy,, tthhee ffiixxaattiivvee sshhoouulldd iinnddiiss
ssoolluubbllyy lliinnkk ttooggeetthheerr pprrootteeiinn,, lliippiidd aanndd ootthheerr cceelllluullaarr ccoonnssttiittuueennttss iinn tthhee ffoorrmm ooffaa mmaaccrroo
mmoolleeccuullaarr nneettwwoorrkk,, bbuutt wwiitthhoouutt aaffffeeccttiinngg ssuubbsseeqquueenntt rreeaaccttiioonnss ooff aa hhiissttoocchheermniiccaall
nnaattuurree bbyy ddeessttrrooyyiinngg ffuunnccttiioonnaall ggrroouuppss..
TThhiiss,, tthheenn,, iiss tthhee iiddeeaall ffiixxaattiivvee.. HHoowweevveerr,, iinn tthhiiss ccoonntteexxtt aass iinn mmaannyy ootthheerrss,, tthhee sseeaarrcchh
ffoorr iiddeeaalliittyy ccaann bbee eeqquuaatteedd iinn tteerrmmss ooff rreeaalliittyy wwiitthh tthhee sseeaarrcchh ffoorr tthhee PPhhiilloossoopphheerrss SSttoonnee;;
iitt sseeeemmss lliikkee1lyy tthhaatt wwee mmuusstt sseeaarrcchh ffoorr tthhee mmoosstt iiddeeaall oofftthhee nnoonn--iiddeeaall ffiixxaattiivveess aammoonnggsstt
tthhee aallddeehhyyddee ffiixxaattiivveess,, ooff wwhhiicchh tthhee tthhrreeee mmoosstt iinntteerreessttiinngg eexxaammpplleess,, aass vviieewweedd iinn tthhee
lliigghhtt ooffpprreesseenntt--ddaayy kknnoowwlleeddggee,, aarree ffoorrmmaallddeehhyyddee,, aaccrroolleeiinn aanndd gglluuttaarraallddeehhyyddee..
FFoorrmmaallddeehhyyddee iiss kknnoowwnn ttoo ffuullffiill mmaannyy ooff tthhee ccrriitteerriiaa ooff tthhee iiddeeaall ttoo aatt lleeaasstt aa ssaattiiss
ffaaccttoorryy eexxtteenntt;; tthhuuss,, iitt iiss aa ''ppoollyymmeerriiec'' ffiixxaattiivvee aanndd ccoonnvveerrttss ccyyttooppllaassmmiicc pprrootteeiinn iinnttoo aann
iinnssoolluubbllee mmaaccrroommoolleeccuullaarr nneettwwoorrkk,, tthhrroouugghh iittss rreeaaddyy rreeaaccttiioonn wwiitthh pprrootteeiinnss.. TThhiiss hhaass
hhiitthheerrttoo bbeeeenn ccoonnssiiddeerreedd aass ooff eexxttrreemmee iimmppoorrttaannccee iinn ffiixxaattiioonn aanndd uunnffoorrttuunnaattee1lyy lliittttllee
aatttteennttiioonn hhaass bbeeeenn ppaaiidd ttoo tthhee rreeaaccttiioonn ooffffoorrmmaallddeehhyyddee wwiitthh ootthheerr cceeUlluullaarr ccoommppoonneennttss,,
tthhoouugghh ffiixxaattiioonn ooff ootthheerr ccllaasssseess ooff ccoommppoouunnddss pprreesseenntt iinn ttiissssuueess mmaayy bbee aass iimmppoorrttaanntt aass
ffiixxaattiioonn ooff pprrootteeiinnss..
FFoorrmmaallddeehhyyddee,, bbeeiinngg tthhee ssiimmpplleesstt mmeemmbbeerr ooff aa hhoommoollooggoouuss sseerriieess,, tthhee ssaattuurraatteedd
aalliipphhaattiicc aallddeehhyyddeess,, hhaass ooff ccoouurrssee mmaannYy rreeaaccttiioonnss ppeeccuulliiaarr ttoo iittssee1lff,, bbuutt iiss aallssoo tthhee mmoosstt
rreeaaccttiivvee mmeemmbbeerr ooff tthhee sseerriieess;; oonn ggrroouunnddss ooff rreeaaccttiivviittyy,, aaccrroolleeiinn ((CCHH22 == CCHH -- CCHHOO)),,
Description:by by Professor Professor A. A. G. G. Everson Pearse Pearse The tide of of the Symposium, at at which the the papers which compromise this volume were presented, is ofthe utmost importance. It was not 'Fixation and Tissue Destruction' or 'Fixation 'Fixation and and Loss Loss ofTissue Components', Co
