FERNANDA MARQUES CASTRUCCI Relação Ancestral do Clone Endêmico de Pseudomonas ...

157 Pages·2011·1.94 MB·Portuguese

by  Ana Paula Takano

FERNANDA MARQUES CASTRUCCI

Relação Ancestral do Clone Endêmico de Pseudomonas aeruginosa
produtor de SPM-1: Análise Comparativa entre Eletroforese em
Campo Pulsátil e Tipagem por Seqüenciamento de Múltiplos Loci

Tese apresentada à Universidade Federal de São
Paulo - Escola Paulista de Medicina para obtenção
do Título de Mestre em Ciências.

São Paulo
2008
FERNANDA MARQUES CASTRUCCI

Relação Ancestral do Clone Endêmico de Pseudomonas aeruginosa
produtor de SPM-1: Análise Comparativa entre Eletroforese em
Campo Pulsátil e Tipagem por Seqüenciamento de Múltiplos Loci

Tese apresentada à Universidade Federal de São
Paulo - Escola Paulista de Medicina para obtenção
do Título de Mestre em Ciências.

Orientadora: Profa. Dra. Ana Cristina Gales
Universidade Federal de São Paulo - UNIFESP

Co-orientadora: Dra. Suzane Silbert
Universidade Federal de São Paulo - UNIFESP

Este trabalho foi realizado com auxílio financeiro
fornecido pela Fundação de Amparo à Pesquisa do
Estado de São Paulo (FAPESP). Processo nº
2005/57496-1).

São Paulo
2008
ii
CASTRUCCI, Fernanda Marques

Relação Ancestral do Clone Endêmico de Pseudomonas aeruginosa
produtor de SPM-1: Análise Comparativa entre Eletroforese em
Campo Pulsátil e Tipagem por Seqü enciamento de Múltiplos Loci.
Fernanda Marques Castrucci - São Paulo, 2008. xix, 138f.

Tese (Mestrado) – Universidade Federal de São Paulo. Escola Paulista
de Medicina. Programa de Pós-gradua ção em Doenças Infecciosas e
Parasitárias

Título em inglês: Ancestral relationship of endemic clone of
Pseudomonas aeruginosa producing SPM-1: Comparative analysis
among Pulsed field gel electrophoresis and Multilocus sequence typing.

Key-words: 1. Pseudomonas aeruginosa 2. Tipagem Molecular 3.
PFGE 4.MLST

iii
UNIVERSIDADE FEDERAL DE SÃO PAULO
ESCOLA PAULISTA DE MEDICINA
DISCIPLINA DE INFECTOLOGIA

Chefe do Departamento:
Prof. Dr. Angelo Amato Vincenzo de Paola

Coordenador do curso de Pós-graduação:
Prof. Dr. Ricardo Sobhie Diaz

São Paulo
2008
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FERNANDA MARQUES CASTRUCCI

Relação Ancestral do Clone Endêmico de Pseudomonas aeruginosa
produtor de SPM-1: Análise Comparativa entre Eletroforese em
Campo Pulsátil e Tipagem por Seqüenciamento de Múltiplos Loci

BANCA EXAMINADORA:
Titular: Profª. Drª Luci Corrêa
Titular: Profa Dra Beatriz Meurer Moreira
Titular: Prof. Dr. Afonso Luís Barth
Suplente: Profª. Drª. Libera Maria Dalla Costa

Aprovada em: ___/___/___
v
“Há mais dos meus pais em mim do
que eu supunha...”
(anônimo)
vi
Ao meu pai Antonio,
que abriu mãos de suas realizações
pessoais para proporcionar as nossas ...
Dedico

vii
Também...
À minha mãe Shirley, exemplo de dedicação e
amor incondicional...
À minha avó Romilda, que admiro e tanto amo...
Aos meus irmãos Simone e Bruno, por saber
que sempre teremos uns aos outros...
Ao meu marido Luiz, por partricipar dos meus
sonhos, proporcioná-los e ser tão companheiro...
Dedico...
viii
AGRADECIMENTOS
Agradeço à Profª Drª Suzane Silbert por abrir as portas do LEMC e do
Setor de Tipagem Molecular, por aceitar a co-orientação e por todos os
ensinamento e amizade.
Agradeço à Drª Ana Cristina Gales por aceitar orientar-me e por todos os
ensinamentos, e ser um exemplo de sabedoria e profissionalismo.
Agradeço ao Prof. Dr. Antonio Carlos Campos Pignatari, por todos os
ensinamentos e por ser um exemplo a seguir.
Agradeço à Miriam do Carmo, Adriana Nicoletti e à Raquel Girardelo
pela ajuda técnica e grande amizade.
Agradeço à Jussima Monteiro e Andréa Pereira por terem sido tão
maravilhosas!
Agradeço aos alunos de iniciação ciêntífica Vinícius Sales e Bruna
Teixeira, e à mestranda Paula Ignez por toda ajuda no setor de Tipagem
Molecular.
Agradeço a Fernanda Inoue e ao Rodrigo Cayô por toda amizade, ombro
amigo, companheirismo e força. A contribuição que vocês deram foi
inestimável! Devo muito à vocês!
Agradeço ao secretário da Disciplina de Infectologia Charlys por ter sido
tão prestativo, eficiente e amigo. E a secretária do Laboratório Rosana
Capecce pelo coleguismo e ajuda profissional.
Agradeço ao meu grande amigo Wagner Cid Parente por ter sido
precursor e responsável por tudo isso.
Agradeço a todos os meus amigos e companheiros do LEMC/ALERTA
por me fazer crer que o melhor do mestrado são as pessoas!!!
ix
SUMÁRIO
ÍNDICE DE ABREVIATURAS E SIGLAS ........................................................ XIII
ÍNDICE DE TABELAS ..................................................................................... XV
ÍNDICE DE FIGURAS .................................................................................... XVI
RESUMO .......................................................................................................XVIII
1 - JUSTIFICATIVA ............................................................................................ 1
2 - REVISÃO DA LITERATURA ......................................................................... 4
2.1 - Agente Etiológico: Pseudomonas aeruginosa .......................................... 4
2.1.1 - Fatores de Virulência ...................................................................... 4
2.1.2 - Mecanismos de Resistência ........................................................... 5
2.1.2.1 - Resistência Intrínseca ................................................................ 6
2.1.2.2 - Resistência Adquirida ................................................................ 7
2.1.2.2.1 - Diminuição de Permeabilidade da Membrana e Sistema de
Efluxo................................................................................................... 7
2.1.2.2.2 - Produção de Enzimas ......................................................... 8
2.1.2.2.3 - Resistência Conferida por Mutações ................................ 11
2.1.3 - Resistência a Múltiplas Drogas ..................................................... 11
2.2 - Epidemiologia e Importância Clínica das infecções causadas por P.
aeruginosa ..................................................................................................... 12
2.3 - Tipagem Molecular ................................................................................. 16
2.3.1 - Aplicação ...................................................................................... 16
2.3.2 - Características .............................................................................. 19
2.3.3 - Eletroforese em Campo Pulsátil - Pulsed Field Gel Electroforesis -
PFGE ....................................................................................................... 22
2.3.4 - Ribotipagem Automatizada ........................................................... 24
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