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型烟粉虱田间种群对毒死蜱和
!
敌敌畏抗性的生化机制
何玉仙*，黄 建&，!，翁启勇*，梁智生&
（*M 福建省农业科学院植物保护研究所，福州 ,)’’*,；&M 福建农林大学植物保护学院，福州 ,)’’’&）
摘要：通过增效剂生物测定和生化分析，探讨了采自福建省的N型烟粉虱 -.(+/+$ #$0$"+ 3个田间种群对毒死蜱和
敌敌畏抗性的生化机制。结果表明：与敏感品系 0OP20相比，3个田间种群对毒死蜱和敌敌畏分别具有)+M),Q
7(M+,倍和3M&,Q**M&)倍的抗性。4RR、RNS和 P8T对毒死蜱的增效比分别为,M3*Q&+M.+倍、*M*+Q*M73倍和
*M’+倍，对敌敌畏的增效比分别为*M37Q&M3+倍、*M,,Q*M3)倍和*M’.倍，表明羧酸酯酶的解毒代谢在烟粉虱对毒
死蜱的抗性中起着重要作用。烟粉虱抗性种群乙酰胆碱酯酶的 1 值是敏感品系的*M(,Q+M’倍，2 值是敏感品
9 9:=
系的’M,+Q’M3&倍；敏感品系乙酰胆碱酯酶的活性在底物浓度大于*M’ 99?%UV时受抑制，抗性种群乙酰胆碱酯酶
的活性在底物浓度大于*399?%UV时受抑制；抗性种群乙酰胆碱酯酶对敌敌畏和毒死蜱的敏感度分别比敏感品系
低**.M.&Q*3*M,,倍和*’M**Q*+M&+倍，表明烟粉虱田间抗性种群乙酰胆碱酯酶可能已发生了变构，由变构引起
的乙酰胆碱酯酶不敏感是烟粉虱田间种群对毒死蜱和敌敌畏产生抗性的重要原因。结果提示，乙酰胆碱酯酶不敏
感性和羧酸酯酶的解毒代谢在烟粉虱对毒死蜱的抗性中均起着重要作用，而乙酰胆碱酯酶不敏感性在对敌敌畏的
抗性中起重要的作用，多功能氧化酶和谷胱甘肽0转移酶在烟粉虱对毒死蜱和敌敌畏抗性中所起的作用不大。
关键词：烟粉虱；抗药性；毒死蜱；敌敌畏；生化机制
中图分类号：W.3)M.，0+(*M+ 文献标识码：! 文章编号：’+)+23&.（3 &’’(）’+2’,(+2’3
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基金项目：福建省科技厅重大项目（&’’,1’*,）；福建省财政专项———福建省农业科学院科技创新团队建设基金（04/526’7）
作者简介：何玉仙，男，*.3(年生，博士，副研究员，研究方向为农业昆虫与害虫防治，829:$%：;<=*3,><:;??@A?9@AB
!通讯作者：!CD;?#E?#A?##FG"?BHFBAF，829:$%：I;C:BJ>EI:C@FHC@AB
收稿日期KFAF$LFH：&’’72’+2&7；接受日期!AAF"DFH：&’’(2’&2*.
I期 何玉仙等：G型烟粉虱田间种群对毒死蜱和敌敌畏抗性的生化机制 H@;
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烟粉虱 !"#$%$& ’&(&)$（7$""/1!8#）是一种世界性 认的标准敏感品系，由南京农业大学植物保护学院
的重要害虫，目前已对有机氯、有机磷、拟除虫菊酯、 吴益东教授从英国引进并提供，经室内长期饲养）。
氨基甲酸酯、烟碱类、昆虫生长调节剂等主要类型杀 毒力测定及抗性机理研究所采用的试虫均为混合日
虫剂产生不同程度的抗药性（何玉仙和黄建，9::;）。 龄雌成虫。
作者于9::;年对福建省各地区烟粉虱田间种群的 )*+ 供试药剂
抗药性进行监测，结果发现烟粉虱已对有机磷、氨基 ?;V敌敌畏原油，天津农药厂；?;WMV毒死蜱
甲酸酯和拟除虫菊酯等常规杀虫剂普遍产生了较高 原药，江苏化工农药集团有限公司；@:V敌敌畏乳
水平的抗药性（何玉仙等，9::</），因此如何防治这 油，福州一化精细化工有限公司；I:V毒死蜱乳油，
些抗性烟粉虱已成为农业生产中的一大难题。要克 上海惠光化学有限公司。?:V胡椒基丁醚（,!,$.-"53
服或延缓抗性的发展，首先必须弄清其抗性机理，为 68%-L!1，DGX）、??V磷酸三苯酯（%.!,)$"53 ,)-#,)/%$，
寻找克服抗性的有效途径提供理论依据。 YDD）、?<V马来酸二乙酯（1!$%)53 +/3$/%$，F*J），
已有研究结果表明，烟粉虱的抗药性机制包括 K!Z+/O’31.!2)产品；还原型谷胱甘肽（7KA），’+.$#2-
酯酶、多功能氧化酶代谢作用增强（=#)//5/ "’ &*4， 产品；>O氯O9，IO二硝基苯（(FNG）和 ;，;O二硫O双（9O
>?@<；A.-B!%C "’ &*4，>?@@；D./6)/E$. "’ &*4，>?@@； 硝基苯甲酸）（FYNG），S/"2/#%$.产品；碘化硫代乙酰
F!%%.!2) "’ &*4，>??:）、乙酰胆碱酯酶不敏感（G5."$ 胆碱（’Y()=）和固兰 G 盐，Q38E/ 产品；其他药品或
/"1 F$&-"#)!.$，>??H；G5."$ "’ &*4，>??I；(/)!33 "’ 试剂均为国产分析纯或化学纯。
&*4，>??;；G5."$/"1F$&-"#)!.$，>??<）和钠离子通道 )*, 增效剂对杀虫剂的增效作用测定
基因突变引起的神经敏感性下降（J-.!" "’ &*4， 增效剂增效试验参照何玉仙等（9::<6）的研究
9::9；王利华和吴益东，9::I）。作者已对烟粉虱对 方法。毒力测定参照何玉仙等（9::M6）的成虫浸叶
拟除虫菊酯杀虫剂的抗性机理进行了研究，结果发 生测法。重复H次。
现烟粉虱田间种群对拟除虫菊酯杀虫剂的高水平抗 )*- 羧酸酯酶（./&0）活性测定（酶标板酶动力学
性除了多功能氧化酶和羧酸酯酶的解毒作用这一重 法）
要因子外，神经不敏感因子可能也起着重要的作用 羧酸酯酶活性测定参照何玉仙等（9::<6）的研
（何玉仙等，9::<6）；本文主要以毒死蜱和敌敌畏为 究方法，酶源蛋白质含量测定根据 G./10-.（1 >?<M）考
例，通过增效剂增效试验、增效剂对羧酸酯酶和谷胱 马斯亮蓝法进行。重复H次。
甘肽 K转移酶的活体抑制作用、以及不同种群乙酰 )*1 谷胱甘肽 2转移酶（324(）活性测定
胆碱酯酶的动力学参数（+ 和 , ）和敏感性等研 谷胱甘肽 K 转移酶测定参照何玉仙等（9::<6）
+/L +
究，探讨了烟粉虱田间种群对有机磷杀虫剂毒死蜱 的研究方法。重复H次。
和敌敌畏抗性的生化机制。 )*5 乙酰胆碱酯酶（6.70）活性测定（酶标板酶动
力学法）
) 材料与方法 参照 G5."$和F$&-"#)!.（$ >??H）的研究方法。每
个种群挑取 >:: 头烟粉虱雌成虫置于 >W; +S
)*) 供试虫源 *,,$"1-.0 管中，加入 >W: +S :W> +-3[S 磷酸缓冲液
烟粉虱 M 个田间抗性种群分别为 NFOP 种群 （,A<W;）（含:W>VY.!%-" \O>::），在冰浴中充分匀浆
（9::I年采自福建省宁德市六都镇茄子地）、QROP种 后，I]、>: ::: .[+!"下离心>: +!"。取9:: S上清
!
群（9::; 年采自福州市新店镇黄瓜地）、RROP 种群 液用相同的缓冲液稀释 ; 倍作为酶源。在 ?M 孔酶
（9::;年采自漳州龙海市茄子地）、STOP种群（9::; 标板孔中，依次加入;: S酶液、;: S :W> +-3[S磷
! !
年采自龙岩市红坊镇黄瓜地）、KJOP 种群（9::; 年 酸缓冲液（,A<W;）、>:: S系列终浓度为 :W:H>9;^
!
采自三明市洋溪镇黄瓜地）、NDOP种群（9::;年采自 MI ++-3[S的碘化硫代乙酰胆碱（’Y()=）和>:: S终
!
南平市城郊的黄瓜地），经生物型鉴定均为 G型（何 浓度为 :W:; ++-3[S 的二硫代双硝基苯甲酸
玉仙等，9::M/）；敏感品系为 KUFOK品系（是国际公 （FYNG），混匀后迅速用 J83%!#E/" J_H 型酶标仪测
&P> 昆虫学报 &’()%*(+,+-+./’)$/*/’) #(卷
定!"# $%波长下的光密度值，每隔 &" ’记录 ( 次， &次。
连续记录 &" 次，酶促反应阶段温度为 )#*。采用
+,-统计软件进行数据处理，以酶促反应初速度表 ’ 结果与分析
示酶活性，根据 ./$010230456748 作图法求米氏常数
（! ）和最大反应速度（" ）。重复&次。 ’"! 增效剂对毒死蜱、敌敌畏的增效作用
% %29
!"# 抑制中浓度 $ 测定 表(结果显示，与敏感品系 -N+5-相比，福建省
%&
参照 6:4$0和+03;$’</4（0 (==&）的研究方法测定 >个烟粉虱田间种群对毒死蜱和敌敌畏分别具有
乙酰胆碱酯酶的残余活力。在=>孔酶标板孔中，依 #!?#&OLP?!&倍和 >?)&O((?)# 倍的抗性。对采自
次加入#" .酶液（酶液制备同(?>）和#" .抑制剂 田间的抗性种群，C,,对毒死蜱具有明显的增效作
! !
（系列浓度），在)#*下保温# %/$后加入("" .终 用，增效比为&?>(O)!?=!倍，对敌敌畏的增效作用
!
浓度为"?# %%;@A.的碘化硫代乙酰胆碱（BCD<E）和 不明显，增效比为 (?>L O )?>! 倍。,6Q 对毒死蜱、
("" .终浓度为 "?"# %%;@A.的二硫代双硝基苯甲 敌敌畏的增效作用不明显，增效比分别为 (?(! O
!
酸（+CF6），混匀后用 G7@H/’82$ GI& 型酶标仪测定 (?L>倍和(?&&O(?>#倍。+RG对毒死蜱、敌敌畏均
!"# $%下的光密度值，测定步骤与数据处理方法同 无增效作用，增效比分别仅为 (?"! 倍和 (?"= 倍。
(?>。用"?( %;@A.缓冲液（JKL?#）代替杀虫剂测定 表明羧酸酯酶的解毒代谢在烟粉虱对毒死蜱的抗性
无抑制剂作用下的酶活性，然后计算抑制剂不同浓 中起着重要作用。多功能氧化酶和谷胱甘肽-转移
度对乙酰胆碱酯酶的抑制率，用直线回归分析法求 酶在烟粉虱对毒死蜱和敌敌畏抗性中所起的作用不
出E 值（抑制 #"M酶活力的抑制剂浓度）。重复 大。
#"
表! ()*、+((和,-.对毒死蜱和敌敌畏的增效作用
+/012! +3245627894:9;2<<2;:=<()*，+((/6>,-.=6;31=7?579<=4/6>>9;31=7@=4
品系A种群 药剂 #（U$%） .D#（" %VA.） 抗性倍数 增效比
-H42/$A,;J7@2H/;$ E$’0SH/S/T0’ （=#MW.） XX -X
-N+5- 毒死蜱D<@;4J:4/Y;’ )?#&（U"?)#） (=?!#（(>?>"O))?>!） (?"" Z
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G期 何玉仙等：L型烟粉虱田间种群对毒死蜱和敌敌畏抗性的生化机制 DJK
续表!!"#$%! &’()*(+%,
品系"种群 药剂 !（3#4） 567（8 9:"5） 抗性倍数 增效比
#$%&’(")*+,-&$’*( .(/01$’1’20/ （;7<=5） >> #>
?’1@-*%A*/BC)) DEF7（38EGF） !H7;E;7（!!!DE!8I!DJJEDJ） DEKD !EFK
?’1@-*%A*/B)LM HE;;（38ED7） !DDGEGK（!!7!EH7I!G;7EF8） DE;7 !E7J
?’1@-*%A*/B?4N 7EGF（38E7J） !;DKE7H（!K;GEFFIH8KHEFD） 7EKG !E8;
5OP> 敌敌畏?’1@-*%A*/ FE!D（38EF!） DF!KEJ;（DD7;EGDIDJGGEF8） !8EKH Q
?’1@-*%A*/BC)) DE!G（38EDG） !DFJEH7（!!JHE;FI!7D7EF!） GE87 HEFG
?’1@-*%A*/B)LM DEHD（38EDK） H!;GEDD（!;H!E;!IHGGFEGF） FE78 !EF7
R)P> 敌敌畏?’1@-*%A*/ 7E!D（38E7J） D7DJE87（DD!DEFKIDJ!8EHH） !8EGJ Q
?’1@-*%A*/BC)) GE8J（38EDK） !F;HE!D（!77;EHKI!JHKEK8） 7E8! HE8;
?’1@-*%A*/B)LM GEH8（38EG7） HHGJE8K（H8JGEFGIHGDGEFK） FEFF !E7K
SSP> 敌敌畏?’1@-*%A*/ FE!D（38EF8） DK;FEGH（D7GFEDGIG8H7E7F） !!EH7 Q
?’1@-*%A*/BC)) DE;7（38E7D） !787EHK（!HKJE7DI!FK;EFG） GEGF HE7H
?’1@-*%A*/B)LM GEG!（38EGK） HJFDEJ7（HFHDE8FIDH8;EJ!） JEGJ !EDD
#NP> 敌敌畏?’1@-*%A*/ 7EFH（38EFF） HK78EGG（H7GHE;;I!;D8EKD） JE!7 Q
?’1@-*%A*/BC)) DEK8（38EDK） !GFHEDJ（!H;JE!7I!F!FE8J） GEDD !EJJ
?’1@-*%A*/B)LM GEKD（38E78） !;77E7J（!J8FE77IH8;;EH;） 7EK; !EG!
=SP> 敌敌畏?’1@-*%A*/ GE;F（38EGH） D7!8EKH（DHJHEGHIDKDJE;F） !8EG8 Q
?’1@-*%A*/BC)) GE!K（38EDK） !FJFE!;（!7GHEK8I!JD!EH!） 7E88 HE8J
?’1@-*%A*/B)LM FE8K（38E77） HG8KE!J（HHFGEGGIH7KJE!H） KE!D !EGF
-.- 增效剂对抗性烟粉虱羧酸酯酶、谷胱甘肽 /转 -.1 不同烟粉虱种群乙酰胆碱酯酶的 ! 和 "
2"3 2
移酶的活体抑制 比较
为了进一步证实羧酸酯酶和谷胱甘肽#转移酶 不同烟粉虱种群乙酰胆碱酯酶对底物（XC6@.）
与烟粉虱抗药性的关系，分别测定了C))和?4N对 的 " 和 # 值测定结果（表H）显示，抗性种群乙酰
9 9&Y
抗性烟粉虱羧酸酯酶、谷胱甘肽 #转移酶的活体抑 胆碱酯酶的 # 值是敏感品系的 8EDGI8EFH倍，而
9&Y
制作用。结果显示，C))对抗性烟粉虱羧酸酯酶表 " 值是敏感品系的!EJDIGE8倍，表明烟粉虱田间
9
现强烈的活体抑制作用，抑制率达J;EJD<；?4N对
抗性种群乙酰胆碱酯酶的活性明显低于敏感品系，
抗性烟粉虱谷胱甘肽 #转移酶具有一定的活体抑制
对正常底物的亲和力也明显低于敏感品系，烟粉虱
作用，抑制率达HGEG8<。
田间抗性种群乙酰胆碱酯酶的性质已发生了变化。
-.0 底物浓度对烟粉虱乙酰胆碱酯酶活性的影响
表- 不同烟粉虱种群乙酰胆碱酯酶的 " 和 ! 值
2 2"3
不同底物浓度对烟粉虱敏感品系和F个田间抗
!"#$%- " "(, ! ’45678*(,*44%9%()
2 2"3
性种群乙酰胆碱酯酶活性的影响如图 ! 所示，敏感
:’:+$")*’(;’4 #< $%&%’(
品系乙酰胆碱酯酶的活性在 8E8D!H7 I 8E7 99*-"5 品系"种群 "$（99*-"5） #$%（& M?·9’(Q!·9:Q!）
底物浓度范围内随着底物浓度的增高而上升，当底 #$%&’(")*+,-&$’*(
N0&(3’( >"# N0&(3’( >"#
物浓度大于!E8 99*-"5时，敏感品系乙酰胆碱酯酶 #Z?P# 8E8F38E8H 8EJ738E8H
的活性受抑制；抗性种群乙酰胆碱酯酶的活性在 =SP> 8E!;38E8! DE!K 8EG738E8F 8E7D
8E8D!H7IJ 99*-"5 底物浓度范围内随着底物浓度 SSP> 8EHG38E8F GE88 8EH;38E8K 8EDG
5OP> 8E!738E8! HE78 8EGJ38E8K 8E7F
的增高而上升，当底物浓度大于 !F 99*-"5时，抗性
#NP> 8E!!38E8H !EJD 8EGK38E8G 8E77
种群乙酰胆碱酯酶的活性受抑制。
R)P> 8E!F38E8! HEFK 8E7D38E8K 8EFH
R?P> 8E!G38E8H HEDD 8EGF38E8! 8E7G
-.= 不同烟粉虱种群乙酰胆碱酯酶的敏感度比较
分别测定敌敌畏、毒死蜱对抗性种群和敏感品
系乙酰胆碱酯酶的 . 值，表D结果显示，F个烟粉虱
78
抗性种群乙酰胆碱酯酶对敌敌畏的敏感度比敏感品
系低!!;E;HI!F!EDD倍，对毒死蜱的敏感度比敏感
图! 底物浓度对乙酰胆碱酯酶活性的影响 品系低!8E!!I!GEHG倍。
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AEE 昆虫学报 ").$2#.(,(%(3’)$8’#’)$ 6F卷
表! 不同烟粉虱种群乙酰胆碱酯酶对敌敌畏、毒死蜱的抑制中浓度（" ）
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品系!种群 敌敌畏-&./,)$0)1 毒死蜱2/,)$*3$&4)1
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效磷的敏感性下降了FFBU? E77倍，巴基斯坦种群
! 讨论 乙酰胆碱酯酶对涕灭威、毒死蜱、甲氧磷、久效磷、
%T%8Q#/&*/)1、残杀威的敏感性下降了 6 U I ?77 倍。
M((、-NK分别是羧酸酯酶和谷胱甘肽 " 转移 我们通过生化分析发现，烟粉虱抗性种群乙酰胆碱
酶的专一性抑制剂，我们通过研究发现 M((对抗性 酯酶对正常底物的亲和力（! ）明显低于敏感品系，
8
烟粉虱羧酸酯酶表现强烈的活体抑制作用，-NK对 而且当底物（VM2/5）浓度大于 F>7 88),!9（即 F W
抗性烟粉虱谷胱甘肽 "转移酶也有一定的活体抑制 F7CA 8),!9）时，敏感品系乙酰胆碱酯酶的活性受抑
作用，但在增效试验中，M((仅对毒死蜱表现明显的 制，而抗性种群乙酰胆碱酯酶的活性只有当底物浓
增效作用，而对敌敌畏的增效作用不明显，-NK 对 度大于FB 88),!9（即F>BWF7C? 8),!9）时才受抑制。
毒死蜱、敌敌畏均无增效作用。这些结果表明羧酸 一般正常乙酰胆碱酯酶和牛红血球乙酰胆碱酯酶的
酯酶在烟粉虱田间种群对毒死蜱的抗性中起重要作
活性在底物（VM2/5）的浓度大于FWF7CA 8),!9时会
用，这与烟粉虱对马拉硫磷的抗性机制相似。
受抑制，而变构乙酰胆碱酯酶的活性只有在底物
($%O/%PQ$等（F=EE）测定了-NG、M((和(RSA种增效 （VM2/5）的浓度大于 F W F7C? 8),!9 时才会受抑制
剂对马拉硫磷、甲基对硫磷、乙丙硫磷和氯菊酯的增
（唐振华，F==A）。由此推测，烟粉虱田间抗性种群的
效作用，发现羧酸酯酶影响烟粉虱对马拉硫磷的抗
乙酰胆碱酯酶已发生了变构。进一步研究发现，与
性。
敏感品系相比，抗性种群乙酰胆碱酯酶对敌敌畏、毒
乙酰胆碱酯酶是有机磷和氨基甲酸酯杀虫剂的
死蜱的敏感度明显下降。
重要靶标酶，乙酰胆碱酯酶敏感度降低是昆虫和螨
综合以上研究结果表明，乙酰胆碱酯酶不敏感
对这些杀虫剂产生抗性的重要机理之一（唐振华，
性和羧酸酯酶的解毒代谢在烟粉虱对毒死蜱的抗性
F==A）。关于乙酰胆碱酯酶敏感度下降与烟粉虱对
中均起着重要作用，而乙酰胆碱酯酶不敏感性在对
有机磷和氨基甲酸酯杀虫剂抗性的关系，R3$’Q 和
敌敌畏的抗性中起重要的作用。多功能氧化酶和谷
-Q0)’1/&$（Q F==A）研究发现，在烟粉虱抗性种群中，乙
胱甘肽"<转移酶在烟粉虱对毒死蜱和敌敌畏抗性
酰胆碱酯酶不敏感的个体占了很大的比例，这些不
中所起的作用不大。
敏感乙酰胆碱酯酶能够引起高水平的抗药性。
R3$’Q等（F==I）研究认为，烟粉虱对久效磷、丙溴磷 参 考 文 献（<)/)6)4:)-）
和毒死蜱等有机磷杀虫剂的抗性与乙酰胆碱酯酶不
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敏感有关，烟粉虱对拟除虫菊酯和有机磷混剂的抗
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药性很大程度上是因为乙酰胆碱酯酶的不敏感。 O&’X&’Z[ "#$%[ &’()*+,[，D?：?IEC?6I[
2%/&,,等（F==6）研究发现，对有机磷杀虫剂表现抗性 R3$’QG\，2%/&,,K，-Q’/),85，-Q0)’1/&$QV9，F==I> VO&)./Q8&.%,%’X
的烟粉虱种群，都具有一至二类不敏感的乙酰胆碱 #)]&.),)Z&.%, 1#+X3 )4 #/Q $),Q )4 &’1Q’1&#&0Q %.Q#3,./),&’Q1#Q$%1Q &’
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酯酶。R3$’Q 和 -Q0)’1/&$Q（F==D）研究认为，烟粉虱
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对有机磷和氨基甲酸酯杀虫剂的抗性与其靶标酶乙
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酰胆碱酯酶不敏感有关，以色列种群乙酰胆碱酯酶
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对毒死蜱、涕灭威、%T%8Q#/&*/)1、残杀威、甲氧磷、久 _/&#Q4,3 &+,’-’$.$/$)（’ ‘Q’’[）[ 6+-.’)[ &’()*+,[ 6*7-’(%[，I（6 F）：
"期 何玉仙等：&型烟粉虱田间种群对毒死蜱和敌敌畏抗性的生化机制 !J6
!"#"$% "6V［8 何玉仙，杨秀娟，翁启勇，黄建，王利华，$VVY8 福建省烟
&’()*+,，-*./)012(*34，56678 92)*:2;0/<2)0*)02:2.*=;*:’>;1/>2)*0:*(=0*0 粉虱生物型鉴定% 福建农林大学学报，!（I I）："JY#"6V］
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K=12>> L，&’()* +,，D/(H=) 9，-*)1/>H M，-*./)012(* 34，566I8 智生，林桂君，吴咚咚，黄建，$VVY8 烟粉虱成虫对烟碱类杀虫
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玉仙，黄建，$VVI8 烟粉虱抗药性的研究进展% 华东昆虫学报， =00/;2=:*EC2:1(*020:=);*:/=@’(*:1(/2E@>F0/(?=)/@1/0@1=:*H2a:F(*%
5（" "）：!!Y#!"$］ @0%")’!$+),"#$%’5-&0:A+.")/.&5!$+.+3-，!$：57J5#5765%
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6+/50&.+189..$":2)+.+3-，5（J 7）：5I7J#5IJ$8［何玉仙，翁启 （G/H/@:*(=：3>*’(/E2E=*）% 6% 2)+0% 20’+#+.%，J（5 5）：!"#!6%
勇，黄建，梁智生，林桂君，吴咚咚，$VV78 烟粉虱田间种群的 W=)? ^G，566!8 M)0*;: Q*020:=);* =)E L=)=?*H*):% K12)= 3?(2;F>:F(*
抗药性% 应用生态学报，5（J 7）：5I7J#5IJ$］ N(*00，&*2_2)?% $57#$678［唐振华，566!8 昆虫抗药性及其治理%
G* Z[，GF=)? ,，Z=)? [,，\*)? ]Z，$VV7B% N’(*:1(/2E (*020:=);* 北京：农业出版社，$57#$67］
H*;1=)20H02)!"#$%$&’&(&)$（D*))=E2F0）% 8)’&20’+#+.+3$)&;$0$)&， \=)?4G，\F Z-，$VV"8 3 HF:=:2/) 2) 0/E2FH ;1=))*> ?*)* =00/;2=:*E
I（V !）：$"5#$"78［何玉仙，黄建，杨秀娟，翁启勇，$VV7B% 烟 C2:1 @’(*:1(/2E (*020:=);* 2) !"#$%$& ’&(&)$（D*))=E2F0）=)E 2:0
粉虱对拟除虫菊酯杀虫剂的抗性机理% 昆虫学报，IV（!）：$"5 E*:*;:2/)% 8)’&20’+#+.+3$)& ;$0$)&，"7（"）：""6#"I!8［王利华，
#$"7］ 吴益东，$VV"8 与拟除虫菊酯抗性相关的烟粉虱钠通道基因突
G* Z[，Z=)? [,，\*)? ]Z，GF=)? ,，\3XD 4G，$VVY=% &2/:’@* 变及其检测% 昆虫学报，$VV"，"（7 "）：""6#"I!］
2E*):2<2;=:2/)/< :1* @/@F>=:2/)0 /< !"#$%$& ’&(&)$ 2) +F_2=)，K12)=% （责任编辑：黄玲巧）
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