Table Of ContentHOPPE -5 EYLE R ITH I E RFE LDE R
HANDBUCH DER
PHYSIOLOGISCH- UND
PATHOLOGISCH-CHEMISCHEN
ANALYSE
FOR ARZTE, BIOLOGEN UNO CHEMIKER
ZEHNTE AUFLAGE
HERAUSGEGEBEN VON
KONRAOLANG EMIL LEHNARTZ
MAINZ MONSTER
UNTER MITARBEIT VON
GUNTHER SIEBERT
MAINZ
ZWEITER BAN D
SPRINGER-VERLAG
BERLIN· GOTTINGEN . HEIDELBERG
1955
ALLGEMEINE
UNTERSUCHUNGSMETHODEN
ZWEITER TElL
BEARBEITET VON
H. BARTELS 0 H. BRINTZINGER 0 TH. BUCHER· L. K. CHRISTENSEN
F.DUSPIVA· S.EMERSON· WFRANKE 0 H.GOTTE oW.KERN 0 S.KOLLER
H. A. KUNKEL· K. LANG 0 K. LINDERSTR0M- LANG· W. MAURER
W MEHREN 0 D. MOHRING 0 A. NIKLAS 0 E. OPITZ t
L. SCHACHINGER 0 H.]. SCHATZMANN . K. SCHMEISER
G. SIEBERT 0 R. SIGNER 0 ]. STAUFF· W. WILBRANDT
MIT 534 ABBILDUNGEN
SPRINGER- VERLAG
BERLIN· GOTTINGEN . HEIDELBERG
1955
ISBN 978-3-642-85553-5 ISBN 978-3-642-85552-8 (eBook)
DOI 10.1007/978-3-642-85552-8
ALLE RECHTE,
INSBESONDERE DAS DER tJBERSETZUNG IN FREMDE SPRACHEN,
VORBEHALTEN
OHNE AUSDRtJCKLICHE GENEHMIGUNG DES VERLAGES
IST ES AUCH NICHT GESTATTET, DIESES BUCH ODER TEILE DARAUS
AUF PHOTOMECHANISCHEM WEGE (PHOTOKOPIE, MIKROKOPIE) ZU VERVIELFALTIGEN
o BY SPRINGER-VERLAG ORG
BERLIN . GÖTTINGEN . HEIDELBERG 1955
SOFTCOVER REPRINT OF THE HARDCOVER 10TH EDITION 1955
Inhaltsverzeichnis.
Grenzfliichenspannung.
Von Professor Dr. J. STAuFF-Bad Soden. Mit 9 Abbildungen. Seite
1. Einleitung . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1
2. Theoretische Grundlagen der Grenzflachenerscheinungen 1
a) Begriff der Grenzflachenspannung. . 1
b) Grenzflachenspannung von Losungen. . . . . . . . 2
3. Messung der Grenzflachenspannung. . . . . . . . . . 3
a) Methoden zur Messung der Oberflachenspannung (Grenzflache fliissig/gasformig) 3
oc) Messung des Kriimmungsradius von Tropfen 3
(3) SteighOhenmethode . . . 4
y) Methode von WILHELMY. . . 5
<'l) Drahtbiigelmethode . . . . . 6
e) Tensiometer (AbreiBmethode) 6
') Methode des Tropfengewichtes und der Tropfenzahl (Stalagmometer nach TRAUBE) . 8
T)) Methode des maximalen Blasendruckes . . . . . . . . . . . . . . . . 9
b) Methoden zur Messung der Grenzflachenspannung (Grenzflache fliissig/fliissig) 10
oc) Tensiometer. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 10
(3) Tropfengewicht und Tropfenzahl . . . . . . . . . . . 11
y) :l\Iethode des maximalen Blasendruckes (Tropfendruckes) 11
Viscosimetrie.
Von Professor Dr. VV. KERN-Maanz und Dipl.-Chem. W. MEHREN-Erlangen.
Mit 11 Abbildungen.
a) Theorie . . . . . . . . . . . . . . . 12
b) Viscosimeter. . . . . . . . . . . . . 14
oc) Das WILHELM OSTWALD-Viscosimeter 14
(3) Das UBBELOHDE-Viscosimeter. . . . 15
y) Das PHILIPPOFF-Viscosimeter . . . . 16
<'l) Das Rotationsviscosimeter nach HATSCHEK-COUETTE 17
e) Das Kugeliallviscosimeter nach HOPPLER 18
c) Viscositatsuntersuchungen an Losungen ....... 18
d) Die Viscositatszahl Z T) • • • • • • • • • . • • • • • 19
e) Viscositatszahl Z T), GroBe und Gestalt der gelOsten Teilchen bei homoopolaren Molekiil.
kolloiden. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 20
f) Viscositatsverhalten von Losungen heteropolarer Molekiilkolloide 21
Osmotischer Druck.
Von Dr. H. J. SCHATZMANN-Bern (Schweiz). Mit 10 Abbildungen.
a) Einleitung. . . . . . . . . . . . . . . . . . . 23
oc) Direkte Bestimmung des osmotischen Druckes . . . . . 24
(3) Die kinetische Theorie des osmotischen Druckes . . . . 26
y) Beziehung der Dampfdruckerniedrigung zum osmotischen Druck 26
<'l) Beziehung der Siedepunktserhohung und der Gefrierpunktserniedrigung zur Dampf-
druckerniedrigung . . . . . . . . . . . . . . . .. ......... 28
b) Methoden zur Bestimmung des osmotischen Druckes oder des Molekulargewichtes mit
Anwendungsmoglichkeiten in der Biologie. 29
oc) Die Gefrierpunktsbestimmung. 29
(3) Dampfdruckmethoden . . . . . . . . 32
VI Inhaltsverzeichnis.
Seite
Der kolloidosmotische Druck.
Von Dr. L. K. CHRISTENsEN-Charlottenlund (Danemark) und Professor Dr. K. LINDERSTROM-
LANG.Kopenhagen (Danemark). Mit 17 Abbildungen.
a) Einleitung. . . . . . . . . . . . . 36
b) Allgemeine methodische Bemerkungen 38
c) Die einzelnen Verfahren. . . . . . 38
01:) Das Osmometer von SORENSEN . 38
fJ) Das Osmometer von CARTER und RECORD 39
y) Das Osmometer von OAKLEY. 39
b) Die Methode von BOURDILLON . 40
s) Die Methode von BULL 41
~) Die Methode von GUNTELBERG und LINDERSTROM-LANG 41
'f}) Die Methode von SCHULZ. . . 44
{}) Die Methode von HERZOG und SPURLIN 45
t) Die osmotische Waage . . . . 45
x) Die Methode von HANSEN . . 46
.A.) Die Methode von KROGH und N AKAZA W A 47
fA) Die Methode von HOLM-JENSEN 48
Osmotische Erscheinungen und osmotische Methoden an Erythrocyten.
Von Professor Dr. W. WILBRANDT-Bern (Schweiz). Mit 7 Abbildungen.
1. Das Osmometerverhalten der roten Blutkorperchen . . . . . . . . 50
a) Die Frage der quantitativen Giiltigkeit des VAN'T HOFFschen Gesetzes 50
b) Die Frage der Semipermeabilitat . . . . . . . . . . . . . 52
2. Die osmotische Resistenz . . . . . . . . . . . . . . . . . . 54
a) Die quantitativen Kriterien. Minimal- und Maximalresistenz. 54
b) Die modifizierenden Faktoren. . . . 55
01:) Die Wasserstoffionenkonzentration 55
fJ) Die Temperatur . . . . . 55
y) Die Sauerstoffsattigung . . . . . 56
3. Die quantitative Bestimmung der Permeabilitat aus osmotischen Versuchen 57
a) Prinzip der osmotischen Methoden . . . . . . . . . . . . 57
b) Methoden der V olumenmessung . . . . . . . . . . . . . . 57
c) Kinetik der Penetration und Berechnung der Permeabilitatskonstanten 61
01:) Definition der Permeabilitatskonstanten . . . . . . . . . . . . . 61
fJ) Bezeichnungen . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 63
y) Die Kinetik der Wasserpenetration und die Bestimmung der Permeabilitatskonstante
fiir Wasser . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 64
Il) Penetrationskinetik und Bestimmung der Permeabilitatskonstanten fiir gelOste Sub-
stanzen . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 64
d) Bemerkungen zur Wahl und zur Durchfiihrung der einzelnen Methoden. . . . . . 69
Dialyse, Elektrodialyse, Elektrodekantation und Diasolyse.
Von Professor Dr. H. BRINTZINGER-OberlenningenfWiirtt. Mit 8 Abbildungen.
a) Allgemeines . 71
b) Dialyse ..... 72
c) Elektrodialyse . . 76
d) Elektrodekantation 77
e) Diasolyse . . . . 78
Der MAXWELL·Effekt (Stromungsdoppelbrechung).
Von Professor Dr. R. SIGNER-Bern (Schweiz). Mit 17 Abbildungen.
A. Allgemeine Bemerkungen . . . . . . 83
1. Geschichtliches . . . . . . . . . 83
2. Stromungszustand der Fliissigkeit . 84
3. Die optischen Effekte . . . . . 84
a) Bei einheitlichen Fliissigkeiten 84
b) Bei kolloiden Losungen . . . 85
Inhaltsverzeichnis. VII
Seite
4. Die Ursache der Stromungsdoppelbrechung. 85
a) Bei einheitlichen Flussigkeiten . . . . . 85
b) Bei kolloiden Losungen . . . . . . . . 86
ex) Kolloidteilchen starre Stabe oder Scheib chen 86
(3) Kolloidteilchen statistische Knauel von Kettenmolekillen 86
B. Theorie . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 86
1. Die Stromungsdoppelbrechung von kolloiden Losungen mit starren Teilchen 86
a) Monodisperse Systeme ....................... 86
ex) Die hydrodynamische Orientierung der Teilchen in der stromenden Flussigkeit 86
(3) AuslOschwinkel und Doppelbrechung. . . . . . . . . . . . . . . . . . . 90
b) Polydisperse Systeme . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 96
2. Die Stromungsdoppelbrechung von kolloiden Losungen mit deformierbaren Teilchen 97
3. Die Stromungsdoppelbrechung von einheitlichen Flussigkeiten 99
C. Apparate zur Bestimmung der Stromungsdoppelbrechung 99
1. Allgemeine Bemerkungen. . . . . . . . . . . 99
2. Die Flussigkeitsbewegung in Zylinderapparaten . 100
a) Der Stromungsgradient . . . . . . . . . . 100
b) Der Eintritt der Turbulenz . . . . . . . . 101
c) Bedingungen fUr das Einhalten genau bestimmter Gradienten 101
3. Die optischen Einrichtungen der Zylinderapparate . . . . . . . 102
a) Das Prinzip der Messung des AuslOschwinkels und der Doppelbrechung 102
b) Lichtquellen . . . . . . . . . . . . . . . . 102
c) Der Strahlengang zwischen den Zylindern 103
d) Kompensatoren und Halbschatteneinrichtungen 103
4. Verschiedene Apparatetypen . . . . . . . . . . 104
D. Experimentelle Ergebnisse. . . . . . . . . . . . . 105
1. Kolloide Losungen mit mehr oder weniger starren Teilchen 105
a) Viren . . . . . . . . . 105
b) Proteine . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 106
ex) Erste Beobachtungen. . . . . . . . . . . . . . . 106
(3) Ermittlung der Teilchengestalt aus dem AuslOschwinkel 106
y) Bestimmung der Eigenanisotropie der EiweiBteilchen 106
6) Aggregations- und Desaggregationsphanomene 107
c) Micellare Seifenlosungen. . . . . . . . . . . . . . . . 108
2. Kolloide Losungen mit deformierbaren Teilchen (Kettenmolekiile in Knauelform) 108
a) Die Unterschiede in der Stromungsdoppelbrechung von Losungen starrer und
deformierbarer Teilchen . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. 108
b) Die Konzentrationsabhangigkeit von AuslOschwinkel und Doppelbrechung. llO
c) Der EinfluB des Molekulargewichtes auf AuslOschwinkel und Doppelbrechung ll2
d) Der EinfluB des Losungsmittels . . . . . . . . ll2
e) Der EinfluB der Konstitution der Kettenmolekille . . . . . . . . . . .. ll3
f) Der EinfluB der Polydispersitat . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. 113
g) Die Stromungsdoppelbrechung als Mittel zur Beobachtung von Veranderungen der
Masse, der Gestalt und der Konstitution von Kettenmolekillen . . . . . . . . 114
Koharente Lichtzerstreuung in Liisungen groBer Molekiile.
Von Professor Dr. TH. BUcHER-Marburg a. d. L. und Dr. D. MOHRING-Mainz. Mit 33 Ab-
bildungen.
a) Prinzipielles . . . . . . . 115
b) Theoretische Erorterungen. 117
ex) Prinzip . . . . . . . . 117
(3) RAYLEIGHS Bedingungen ll8
y) Lichtzerstreuung durch ein Einzelteilchen 119
6) Lichtzerstreuung durch idealverdunnte Materie (Lord RAYLEIGH, 1871) 121
s) Triibungskoeffizient (Turbidity) . . . . . . . 121
C) Richtungsabhiingigkeit der Streuintensitat . . 122
1)) Reduzierte Streuung (Reduced Intensity, RAYLEIGHS Ratio) 125
&) RAYLEIGHS Formeln . . . . . . . . . . . 126
t) Schwankungstheorie der Lichtzerstreuung in Fliissigkeiten (v. SMOLUCHOWSKI 1908,
EINSTEIN 1910) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 130
VIII Inhaltsverzeichnis.
Seite
x) Lichtzerstreuung in Losungen (GANS 1923, RAMAN 1923) 132
A) Lichtzerstreuung in realen Losungen. 136
Il) Mittelwertsbildung. . . . 139
v) Mehrkomponentensysteme . . . . . 140
~) Makroionen . . . . . . . . . . . . 141
0) Lichtzerstreuung durch isotrope Kugeln mit der Wellenlange vergleichbarem Durch-
messer (MIE 1908). . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 143
n) Molekulargewicht im DEBYE-Bereich ..................... 145
(!) Teilchengestalt im DEBYE-Bereich [Interferenzfunktion, particle scattering factor, P ({})] 147
a) Polarisationsverhaltnisse (teilweise Depolarisation des Streulichtes) 152
c) Methodik . . . . . . . . . . 158
oc.) Triibung . . . . . . . . . 158
f3) Relative Streulichtmessungen 159
y) Reduzierte Streuung 160
b) Arbeitsstandards. . . . . . 160
e) Eichstandards . . . . . . . 161
C) Brechungsabhangige Korrekturen bei der Bestimmung von R{} . 163
1') Winkelabhiingigkeit von R{}, V .....••.. 164
{}) Reinigung der Losungen . . . . . . . . . . . . 165
t) Grenze der Empfindlichkeit der Streulichtmethode 166
x) Streulichtphotometer. . , 167
A) Versuchscuvetten 172
Il) Depolarisat ionsmessungen . 173
v) Brechungsinkrement . . . 175
d) Durchfiihrung und Auswertung der Messungen 178
oc.) RAYLEIGH-Bereich . . 178
f3) DEBYE-Bereich 179
y) KontroIImogIichkeiten 181
b) SchluBbemerkung 182
Gasanalyse.
Von Professor Dr. E. OPITZ t und Dozent Dr. H. BARTELs-Gottingen (jetzt Tiibingen). Mit
61 Abbildungen.
1. Einleitung . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 183
2. Gewinnung und Aufbewahrung von Gas- und Blutproben zur Gasanalyse 183
a) Gasgemische. . . . 184
oc.) Exspirationsluft. . . 184
f3) Alveolarluft 185
y) Andere Gasgemische 187
b) Blut . . . . . . . . . 188
oc.) Gerinnungsverhiitung 188
f3) Blutentnahme. . . . 188
y) Entnahmevorrichtungen 190
b) Anaerobe Gewinnung von Serum und Plasma 192
c) Anhang ......... . 193
oc.) Reinigung von Quecksilber. . . . . . . . . 193
f3) Herstellung von Gasgemischen zu Eichzwecken, Atemversuchen, zum Tonome-
trieren u. a. . . . . . . . . 194
y) Herstellung von Hahnfett . . . 194
3. Analyse von Gasen in Gasgemischen . 195
a) Gasanalysenapparat nach HALDANE 195
oc.) Prinzip .......... . 195
f3) Apparatur, Losungen und Zubehor 195
y) Vorbereitung des Apparates zur Analyse 196
b) Eichung der MeBbiirette. . . . 197
e) Apparatives . . . . . . . . . 197
C) Gang der Analyse (Zimmerluft) 197
1') Analyse von Gasproben . . . . 200
1J) Analysen von Gasgemischen, die Acetylen enthalten 200
t) Analysen mit Hille der Verbrennungskammer 201
x) Berechnung des Gasdruckes in Gasproben. . 202
A) "Zwischenfalle" und Reinigung des Apparates 202
Il) Modifikationen des Apparates von HALDANE. 203
Inhaltsverzeichnis. IX
Selte
b) Apparat naeh SCHOLANDER . 204
oc) Prinzip ....... . 205
f3) Apparatur und Losungen 205
y) Vorbereitung des Apparates 207
15) Analysengang. . . . . . . 208
s) Teehnisches ...... . 209
0) Manometriseher Apparat naeh VAN SLYKE .. ..... 210
d) Dbersieht iiber andere Methoden der Analyse von Gasen in Gasgemisehen 210
oc) Chemisehe Verfahren . . . . . . . . . . . . . . 210
f3) Physikalisehe und physikaliseh.chemisehe Verfahren 211
y) Mikrogasanalyse ..... . 217
4. Analyse von Gasen in Fliissigkeiten . . . 218
a) Dbersieht . . . . . . . . . . . . . . 219
oc) Analyse ehemiseh gebundener Gase . 219
f3) Analyse physikalisch geloster Gase . 221
y) Analyse von COz und O2 in physikalischer Losung bei Anwesenheit dieser Gase
in ehemischer Bindung. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 222
b) Die manometrisehe Bestimmung von Blutgasen und Gasen in Gasgemischen mit dem
Apparat von VAN SLYKE. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. 223
oc) Der manometrische Apparat und seine Verwendung zur Blutgasanalyse 223
f3) Bestimmung von CO im Blut und von aktivem und gesamtem Hamoglobin mit
der CO.Kapazitatsmethode (Methode von VAN SLYKE) . . . . . . . . .. 247
y)Bestimmung von CO2 und O2 zusammen mit Cyclopropan, Athylen oder N 20
(Distickstoffoxyd, Lachgas) in 1 em3 Blut (Methode nach ORCUTT und WATERS) 252
15) Analyse von Gasen in Gasgemisehen mit dem manometrisehen Apparat naeh VAN
SLYKE . . . . . . . . . . . . . . 254
e) Die Ferricyanidmethode von HALDANE . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 258
d) Bestimmung der Gasdrueke im Blut. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 263
oc) Bestimmung des Sauerstoff· und Kohlendioxyddruekes im Blut mit der Methode
von RILEY . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 263
f3) Bestimmung des Sauerstoffdruekes im Blut mit der Methode von BARTELS . . 268
e) Rechnerisehe Auswertung gasanalytiseher Bestimmungen mit besonderer Beriieksich-
tigung nomographiseher Verfahren ...................... 275
oc) Bestimmung von Pcoz und PH im Serum und Blut . . . . . . . . . . . . . 275
f3) N omogramm zur Untersuehung des Saurebasengleiehgewichtes im menschlichen
Urin bei 37° C . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 286
y) Oz-Dissoziationskurven des mensehliehen Blutes . . . . . . . . . . . . . . . 287
15) Graphisehe Darstellungen kombinierter Oz-C02·Dissoziationskurven des Blutes und
des CO 2-Oz-Verhaltnisses der Atemluft. . 288
f) Anhang. Dbersiehten, Abkiirzungen, Tabellen. . . . . . . . . . . . . . . . . . 295
THUNBERG-Methodik und verwandte Acceptormethoden.
Von Professor Dr. W. FRANKE-Koln a. Rh. Mit 15 Abbildungen.
a) Theoretisehe Grundlagen ihrer Anwendung . . . . . . . . 311
b) Apparatives und Allgemeines zur Entfarbungsmethodik 313
c) Colorimetrische, photometrische und titrimetrische Varianten 317
d) Spezielle FaIle . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 320
oc) Fliichtige Reaktionskomponenten. Das Arbeiten mit gasgefiillten Rohren . 320
f3) Die Dehydrierung von Leukofarbstoffen 322
e) Die Tetrazoliummethode 323
oc) .Allgemeines . . . . . . . . . . 323
f3) Die Formazanbestimmung . . . 327
f) Auswahl der Wasserstoffacceptoren . 329
g) Die Wasserstoffdonatoren (Substrate). 334
h) Die Redoxpotentialbestimmung von Metaboliten. 336
i) Seltener angewandte oder nur bedingt hierher gehOrige Aceeptormethoden . 336
oc) Anorganische Acceptoren 336
f3) Organische Aeceptoren . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 339
Enzymatisehe Histochemie.
Von Professor Dr. F. DUSPIvA-Freiburg i. Br. Mit 66 Abbildungen.
A. Einleitung. . . . . . . . . . 345
B. Mikroskopische Farbemethoden . . . . . 348
x Inhaltsverzeichnis.
Seite
1. Hydrolasen . . . . . . . . . 352
a) Phosphatasen ...... 352
C1() .A1kalische Phosphatasen 352
fJ) Saure Phosphatasen . 356
y) Andere Phosphatasen . 357
b) Lipasen . . . . . 358
c) Andere Hydrolasen 359
C1() fJ-Glucuronidase 360
fJ) Cholinesterase . 361
y) Sulfatase . . . 365
15) Carbohydrasen . 365
2. Oxydasen. . . . 366
a) Peroxydasen . . . 366
b) Dopaoxydase. . . 367
c) Cytochromoxydase 367
d) Andere Enzyme. 369
C. Chemische Methoden . . 371
Allgemeines . . . . . . 371
1. Die Vorbereitung des biologischen Materials zur Enzymanalyse 371
a) Die Probenahme . . . . . . . . . . . . . . . . . . 371
b) Mengenbestimmung von Gewebe- und Zellbestandteilen. 375
C1() Gewichtsbestimmungen . . . 376
fJ) Volumenbestimmungen . . . . . . 382
y) Die Zellzahl als BezugsgroBe . . . 383
2. Die enzymatisch-chemische Mikroanalyse. 385
a) MaBanalytische und colorimetrische Methoden 385
C1() Gerate und Apparate ......... 385
fJ) Die Bestimmung kleiner enzymatischer Spaltungen durch Titration 391
y) Colorimetrische Bestimmung von enzymatischen Spaltungen 409
b) Dilatometrische Methode . . . . . . . . . . 415
c) Gasometrische Methoden . . . . . . . . . . 419
C1() Der "Cartesianische Taucher" als Mikromanometer 419
fJ) Der Capillartaucher . . . . . . . . . . 437
y) Spezielle Methoden der Tauchertechnik zur Messung enzymatischer Umsetzungen 440
Biochemical Genetics.
By Professor STERLING EMERSON-Pasadena/California (USA). With 31 figures.
1. Introduction . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 443
2. Life histories and cultural characteristics of representative microorganisms 445
a) Neurospora crassa, a heterothallic filamentous fungus 445
C1() Vegetative characteristics 445
fJ) Asexual reproduction . 445
y) Sexual reproduction. . . 445
15) Genetic considerations. . 449
s) Special methods for handling Neurospora 452
b) Aspergillus nidulans, a homothallic filamentous fungus 455
C1() Vegetative characteristics and asexual reproduction 455
fJ) Sexual reproduction. . . . . . . . . . 456
y) Genetic identification of hybrids . . . . . . 457
15) The production of heterozygous diploids. . . 459
s) Somatic segregation in heterozygous diploids 461
1;) Special methods for handling Aspergillus nidulans 462
c) Saccharomyces cerevisiae, an unstable heterothallic unicellular fungus with alternating
haploid and diploid generations . . . . 463
C1() Vegetative characteristics . . . . . 463
fJ) Life cycle and sexual characteristics 464
y) Genetic considerations. . . . . . . 468
15) Special methods for handling yeasts 469
d) Bacteria, especially those in which genetic recombination occurs 475
C1() Bacterial transformations . . . . . . 476
fJ) Transduction . . . . . . . . . . . . 480
y) Linked inheritance in Escherichia coli K-l2 486
15) Comparative genetics of bacteria 494
e) Other microorganismus . . . . . . . . . . . 494
Inhaltsverzeichnis. XI
Seite
3. Isolation of biochemical mutants. . . . . . . . . . . . . . 496
a) The method of total isolation . . . . . . . . . . 496
IX) Isolation of clones descended from single haploid nuclei 496
fJ) The identification of metabolic deficiencies 498
b) Selective isolation of mutants ...... . 499
IX) Direct selection of "progressive" mutants . 499
fJ) Visual selection of "retrogressive" mutants 500
y) Automatic selection of "retrogressive" mutants 501
c) Replica plating technique. . . 503
4. Genetic identification of mutants 504
a) Chromosomal units of heredity 504
IX) The determination of homologies and allelism 504
fJ) The determination of allelism in bacteria 507
y) Other criteria for determining allelism. 509
b) Extrachromosomal inheritance 509
5. Mutation and the induction of mutations 510
a) The mutation process 510
b) Mutagenic agents 515
IX) Irradiation . . . . 516
fJ) Chemical mutagens 517
y) Notes on procedures. 518
6. Mutants as tools in biochemical studies. 519
a) Identification of sequential steps . . 519
b) Biochemical genetics and comparative biochemistry. 522
c) Interrelations of gene-controlled reactions . . . . . 526
IX) Interactions within a single pathway of synthesis 526
fJ) Suppressors and the problem of alternate pathways 527
y) Incomplete genetic blocks . . . . . . . . . . . 529
b) Pure lines and isogenic stocks . . . . . . . . . 531
d) Identification of the reaction primarily influenced by mutation 532
e) Extrachromosomal mutants. 532
7. Chemistry of the genic material 533
Glossary of biological terms. . 534
Aufarbeitung von Geweben und Zellen.
Von Professor Dr. Dr. K. LANG-Mainz und Privatdozent Dr. G. SIEBERT-Mainz.
Mit 12 Abbildungen 537
1. Gewebspriiparationen 538
a) Einleitung. . . 538
b) Gewebsschnitte 539
c) Gewebebreie. . 541
d) Homogenate 542
2. Gewinnung und Trennung einzelner Zellen 544
a) Einleitung. . . . . . . . . . . . . . 544
b) Zellen aus Blut und anderen biologischen Fhissigkeiten 545
IX) Leukocyten. . . 545
fJ) Thrombocyten ............... . 547
c) Isolierung von Organzellen . . . . . . . . . . . . . 548
IX) Gewinnung und Trennung von Zellen in wiiBrigen Medien 548
fJ) Gewinnung und Trennung von Zellen in nichtwiiBrigem Milieu 550
3. Zellfraktionierung 554
a) Einleitung. . . . . . . . 554
IX) Allgemeines ..... 555
fJ) Zerkleinerungsverfahren 556
y) Suspensionsmedien. 557
b) Trennprinzipien . . . . 559
b) Spezielles . . . . . . . . 562
IX) Gleichzeitige Darstellung aller Zellfraktionen . 562
fJ) Zellkerne. . . . . . . . . . . . . . . . . 566
y) Mitochondrien (einschlieBlich Sarkosomen und Cyclophorasesystem) 581
0) Mikrosomen . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 588
