Studies On Possible Activation Of Microbial Inulinase Production Using Gamma Radiation Under ...

129 Pages·2014·0.91 MB·English

Studies On Possible Activation Of Microbial
Inulinase Production Using Gamma Radiation
Under Solid State Fermentation

Thesis
Submitted by

Noha Abdullah El Attar
B.Sc. of Pharmaceutical Sciences
Cairo University
2003

In Partial Fulfillment for Master Degree in
Pharmaceutical Sciences
(Microbiology and Immunology)

Under Supervision Of

Prof. Dr. Magdy Aly Amin Prof. Dr. Ahmed Ibrahim ELSayed El-Batal
Professor of Microbiology and Immunology Professor of Applied Microbiology & Biotechnology
Faculty of Pharmacy National Center for Radiation Research
Cairo University &Technology ( NCRRT)

Department of Microbiology and Immunology
Faculty of Pharmacy

Cairo University
2011
Acknowledgment

Thanks to ALLAH to whom I attribute all success in my life.

I dedicate this thesis for the soul of my father, to my mother who
always encourages me, gave me confidence and strength and to my brother
who always enlightens me with his deep knowledge and empowering advice.

I would like to express my gratefulness & appreciation to Prof. Dr.
Magdy Aly Amin, Professor of Microbiology and Immunology, Faculty of
Pharmacy, Cairo University, for supervision, flexibility, guidance and
support.

I am also greatly indebted and deeply thankful to Prof. Dr. Ahmed
Ibrahim El -Sayed El-Batal, professor of Applied Microbiology &
Biotechnology, National Center for Radiation Research and Technology
(NCRRT) for suggesting the point, everlasting cooperation, supervision
through the work, drawing many experimental designs and guidance in
writing this thesis. And I would like toalso thank him for his advice and care
personally, for his patience and taking care of my needs and problems.

I am deeply thankful to Prof. Dr. Mona A. El-Ghazaly, Chairman of
National Center for Radiation Research and Technology (NCRRT) for their
interest and facilities provided during this work.

Many thanks to Dr. Amal Emad Ali for her assistance and
encouragement in revising this thesis.

Thanks to all of my colleagues in the Microbiology Lab in the National
Center for Radiation Research and Technology, for their help and genuine
care through my down times.
(cid:1)(cid:2)(cid:3)(cid:4)(cid:5)(cid:6)(cid:7)(cid:4)
(cid:1)(cid:2)(cid:3)(cid:4)(cid:5)(cid:4)(cid:6)(cid:7)(cid:3)(cid:4)(cid:8)(cid:9)(cid:10) (cid:8)(cid:11)(cid:10) (cid:12)(cid:4)(cid:11)(cid:11)(cid:13)(cid:14)(cid:13)(cid:9)(cid:3)(cid:10) (cid:2)(cid:7)(cid:14)(cid:7)(cid:5)(cid:13)(cid:3)(cid:13)(cid:14)(cid:15)(cid:10) (cid:7)(cid:11)(cid:11)(cid:13)(cid:16)(cid:3)(cid:4)(cid:9)(cid:17)(cid:10)
(cid:2)(cid:14)(cid:8)(cid:12)(cid:18)(cid:16)(cid:3)(cid:4)(cid:19)(cid:4)(cid:3)(cid:20)(cid:10) (cid:8)(cid:11)(cid:10) (cid:4)(cid:9)(cid:18)(cid:21)(cid:4)(cid:9)(cid:7)(cid:15)(cid:13)(cid:22)(cid:4)(cid:9)(cid:19)(cid:13)(cid:14)(cid:3)(cid:7)(cid:15)(cid:13)(cid:10) (cid:13)(cid:9)(cid:6)(cid:20)(cid:5)(cid:13)(cid:10) (cid:23)(cid:20)(cid:10)
(cid:24)(cid:13)(cid:9)(cid:4)(cid:16)(cid:4)(cid:21)(cid:21)(cid:4)(cid:18)(cid:5)(cid:10) (cid:16)(cid:25)(cid:14)(cid:20)(cid:15)(cid:8)(cid:17)(cid:13)(cid:9)(cid:18)(cid:5)(cid:10) (cid:26)(cid:7)(cid:15)(cid:10) (cid:15)(cid:3)(cid:18)(cid:12)(cid:4)(cid:13)(cid:12)(cid:27) (cid:1)(cid:2)(cid:3)(cid:4)(cid:5)(cid:4)(cid:6)(cid:13)(cid:12)(cid:10)
(cid:5)(cid:13)(cid:12)(cid:4)(cid:7)(cid:10)(cid:18)(cid:15)(cid:13)(cid:12)(cid:10)(cid:18)(cid:9)(cid:12)(cid:13)(cid:14)(cid:10)(cid:15)(cid:8)(cid:21)(cid:4)(cid:12)(cid:10)(cid:15)(cid:3)(cid:7)(cid:3)(cid:13)(cid:10)(cid:11)(cid:13)(cid:14)(cid:5)(cid:13)(cid:9)(cid:3)(cid:7)(cid:3)(cid:4)(cid:8)(cid:9)(cid:10)(cid:26)(cid:7)(cid:15)(cid:10)(cid:28)(cid:25)(cid:13)(cid:7)(cid:3)(cid:10)
(cid:23)(cid:14)(cid:7)(cid:9)(cid:29)(cid:10) (cid:30)(cid:13)(cid:14)(cid:18)(cid:15)(cid:7)(cid:21)(cid:13)(cid:5)(cid:10) (cid:7)(cid:14)(cid:3)(cid:4)(cid:16)(cid:25)(cid:8)(cid:31)(cid:13)(cid:10) !(cid:29)"#(cid:10) $$%(cid:10) (cid:5)(cid:8)(cid:4)(cid:15)(cid:3)(cid:18)(cid:14)(cid:13)(cid:10)
(cid:16)(cid:8)(cid:9)(cid:3)(cid:13)(cid:9)(cid:3)&(cid:10)(cid:7)(cid:16)(cid:4)(cid:12)(cid:4)(cid:11)(cid:4)(cid:13)(cid:12)(cid:10)(cid:5)(cid:4)(cid:9)(cid:13)(cid:14)(cid:7)(cid:21)(cid:10)(cid:15)(cid:8)(cid:21)(cid:18)(cid:3)(cid:4)(cid:8)(cid:9)(cid:10) (cid:2)’(cid:10)!(cid:27)(#(cid:10)(cid:10)&(cid:10)(cid:15)(cid:2)(cid:8)(cid:14)(cid:13)
,
(cid:15)(cid:18)(cid:15)(cid:2)(cid:13)(cid:9)(cid:15)(cid:4)(cid:8)(cid:9)(cid:10)"(cid:27))(cid:10)*(cid:10)"+ (cid:10)(cid:15)(cid:2)(cid:8)(cid:14)(cid:13)(cid:15)(cid:22)(cid:5)(cid:21)(cid:10)(cid:10)(cid:4)(cid:14)(cid:14)(cid:7)(cid:12)(cid:4)(cid:7)(cid:3)(cid:13)(cid:12)(cid:10)(cid:26)(cid:4)(cid:3)(cid:25)"(cid:27)++
(cid:31)-(cid:20)(cid:10) (cid:8)(cid:11)(cid:10) (cid:17)(cid:7)(cid:5)(cid:5)(cid:7)(cid:10) (cid:14)(cid:7)(cid:12)(cid:4)(cid:7)(cid:3)(cid:4)(cid:8)(cid:9)(cid:10) &(cid:12)(cid:4)(cid:15)(cid:3)(cid:4)(cid:21)(cid:21)(cid:13)(cid:12)(cid:10) (cid:26)(cid:7)(cid:3)(cid:13)(cid:14)(cid:10) (cid:2)’(cid:10) $
(cid:13)*(cid:3)(cid:14)(cid:7)(cid:16)(cid:3)(cid:4)(cid:9)(cid:17)(cid:10)(cid:15)(cid:8)(cid:21)(cid:19)(cid:13)(cid:9)(cid:3)(cid:10)#&(cid:10)(cid:16)(cid:8)(cid:14)(cid:9)(cid:10)(cid:15)(cid:3)(cid:13)(cid:13)(cid:2)(cid:10)(cid:21)(cid:4).(cid:18)(cid:8)(cid:14)(cid:10)+(cid:27)$%&(cid:10)/(cid:8)(cid:14)(cid:9)(cid:10)
(cid:8)(cid:4)(cid:21)(cid:10)&(cid:10)010&(cid:10)/(cid:7)/(cid:21) (cid:10)(cid:4)(cid:9)(cid:16)(cid:18)(cid:23)(cid:7)(cid:3)(cid:4)(cid:8)(cid:9)(cid:10)(cid:3)(cid:13)(cid:5)(cid:2)(cid:13)(cid:14)(cid:7)(cid:3)(cid:18)(cid:14)(cid:13)(cid:10)345/(cid:10)(cid:11)(cid:8)(cid:14)(cid:10)
2
,2(cid:10) (cid:25)(cid:14)(cid:15)(cid:27)(cid:10) 6(cid:5)(cid:5)(cid:8)(cid:23)(cid:4)(cid:21)(cid:4)(cid:6)(cid:7)(cid:3)(cid:4)(cid:8)(cid:9)(cid:10) (cid:8)(cid:11)(cid:10) (cid:7)(cid:10) (cid:2)(cid:7)(cid:14)(cid:3)(cid:4)(cid:7)(cid:21)(cid:21)(cid:20)(cid:10) (cid:2)(cid:18)(cid:14)(cid:4)(cid:11)(cid:4)(cid:13)(cid:12)(cid:10)
(cid:4)(cid:9)(cid:18)(cid:21)(cid:4)(cid:9)(cid:7)(cid:15)(cid:13)(cid:10) (cid:13)(cid:9)(cid:6)(cid:20)(cid:5)(cid:13)(cid:10) (cid:11)(cid:14)(cid:8)(cid:5)(cid:10) (cid:7)(cid:10) (cid:21)(cid:8)(cid:16)(cid:7)(cid:21)(cid:10) (cid:17)(cid:7)(cid:5)(cid:5)(cid:7)(cid:10) (cid:4)(cid:14)(cid:14)(cid:7)(cid:12)(cid:4)(cid:7)(cid:3)(cid:13)(cid:12)(cid:10)
(cid:15)(cid:3)(cid:14)(cid:7)(cid:4)(cid:9)(cid:10) (cid:8)(cid:11)(cid:10) (cid:1)(cid:2)(cid:3)(cid:4)(cid:5)(cid:4)(cid:6)(cid:6)(cid:4)(cid:7)(cid:8)(cid:9) (cid:5)(cid:10)(cid:11)(cid:12)(cid:13)(cid:14)(cid:15)(cid:2)(cid:3)(cid:7)(cid:8)(cid:9) (cid:8)(cid:9)(cid:10) (cid:16)(cid:25)(cid:13)(cid:7)(cid:2)(cid:10)
(cid:4)(cid:5)(cid:5)(cid:8)(cid:23)(cid:4)(cid:21)(cid:4)(cid:6)(cid:7)(cid:3)(cid:4)(cid:8)(cid:9)(cid:10) (cid:15)(cid:18)(cid:2)(cid:2)(cid:8)(cid:14)(cid:3)(cid:15)(cid:10) (cid:26)(cid:7)(cid:15)(cid:10) (cid:16)(cid:7)(cid:14)(cid:14)(cid:4)(cid:13)(cid:12)(cid:10) (cid:8)(cid:18)(cid:3)(cid:27)(cid:10) (cid:10) ’(cid:4)(cid:17)(cid:25)(cid:13)(cid:15)(cid:3)(cid:10)
(cid:4)(cid:9)(cid:18)(cid:21)(cid:4)(cid:9)(cid:7)(cid:15)(cid:13)(cid:10)(cid:4)(cid:5)(cid:5)(cid:8)(cid:23)(cid:4)(cid:21)(cid:4)(cid:6)(cid:13)(cid:12)(cid:10)(cid:7)(cid:16)(cid:3)(cid:4)(cid:19)(cid:4)(cid:3)(cid:20)(cid:10)(cid:26)(cid:7)(cid:15)(cid:10)(cid:5)(cid:7)(cid:4)(cid:9)(cid:3)(cid:7)(cid:4)(cid:9)(cid:13)(cid:12)(cid:10)(cid:8)(cid:9)(cid:10)/(cid:7)7
(cid:7)(cid:21)(cid:17)(cid:4)(cid:9)(cid:7)(cid:3)(cid:13)(cid:10) (cid:23)(cid:13)(cid:7)(cid:12)(cid:15)(cid:27)(cid:10) 8(cid:25)(cid:13)(cid:10) (cid:4)(cid:5)(cid:5)(cid:8)(cid:23)(cid:4)(cid:21)(cid:4)(cid:6)(cid:13)(cid:12)(cid:10) (cid:13)(cid:9)(cid:6)(cid:20)(cid:5)(cid:13)(cid:10) (cid:15)(cid:25)(cid:8)(cid:26)(cid:13)(cid:12)(cid:10) (cid:7)(cid:10)
(cid:5)(cid:7)(cid:14)(cid:31)(cid:13)(cid:12)(cid:10)(cid:13)(cid:9)(cid:25)(cid:7)(cid:9)(cid:16)(cid:13)(cid:5)(cid:13)(cid:9)(cid:3)(cid:10)(cid:4)(cid:9)(cid:10)(cid:3)(cid:13)(cid:5)(cid:2)(cid:13)(cid:14)(cid:7)(cid:3)(cid:18)(cid:14)(cid:13)9(cid:10)(cid:2)’(cid:10)(cid:8)(cid:2)(cid:3)(cid:4)(cid:5)(cid:7)9(cid:10)(cid:7)(cid:9)(cid:12)(cid:10)
(cid:3)(cid:25)(cid:13)(cid:14)(cid:5)(cid:8)(cid:15)(cid:3)(cid:7)(cid:23)(cid:4)(cid:21)(cid:4)(cid:3)(cid:20)9(cid:10) (cid:3)(cid:25)(cid:18)(cid:15)(cid:10) (cid:15)(cid:18)(cid:17)(cid:17)(cid:13)(cid:15)(cid:3)(cid:4)(cid:9)(cid:17)(cid:10) (cid:7)(cid:10) (cid:2)(cid:14)(cid:8)(cid:5)(cid:4)(cid:15)(cid:4)(cid:9)(cid:17)(cid:10)
(cid:4)(cid:9)(cid:12)(cid:18)(cid:15)(cid:3)(cid:14)(cid:4)(cid:7)(cid:21)(cid:10) (cid:2)(cid:14)(cid:8)(cid:12)(cid:18)(cid:16)(cid:3)(cid:4)(cid:8)(cid:9)(cid:10) (cid:8)(cid:11)(cid:10) (cid:11)(cid:14)(cid:18)(cid:16)(cid:3)(cid:8)(cid:15)(cid:13)(cid:10) (cid:15)(cid:20)(cid:14)(cid:18)(cid:2)(cid:10) (cid:18)(cid:15)(cid:4)(cid:9)(cid:17)(cid:10) (cid:3)(cid:25)(cid:13)(cid:10)
(cid:4)(cid:5)(cid:5)(cid:8)(cid:23)(cid:4)(cid:21)(cid:4)(cid:6)(cid:13)(cid:12)(cid:10)(cid:13)(cid:9)(cid:6)(cid:20)(cid:5)(cid:13)(cid:27)
(cid:9)(cid:10)(cid:11)(cid:12)(cid:13)(cid:5)(cid:14)(cid:3)(cid:15)(cid:10) (cid:4)(cid:9)(cid:18)(cid:21)(cid:4)(cid:9)(cid:7)(cid:15)(cid:13)9(cid:10) (cid:4)(cid:9)(cid:18)(cid:21)(cid:4)(cid:9)9(cid:10) (cid:1)(cid:2)(cid:3)(cid:4)(cid:5)(cid:4)(cid:6)(cid:6)(cid:4)(cid:7)(cid:8)(cid:9)
(cid:5)(cid:10)(cid:11)(cid:12)(cid:13)(cid:14)(cid:15)(cid:2)(cid:3)(cid:7)(cid:8)(cid:16)(cid:9) (cid:8)(cid:2)(cid:3)(cid:4)(cid:5)(cid:4)(cid:6)(cid:7)(cid:3)(cid:4)(cid:8)(cid:9)9(cid:10) (cid:4)(cid:5)(cid:5)(cid:8)(cid:23)(cid:4)(cid:21)(cid:4)(cid:6)(cid:7)(cid:3)(cid:4)(cid:8)(cid:9)9(cid:10) (cid:26)(cid:25)(cid:13)(cid:7)(cid:3)(cid:10)
(cid:23)(cid:14)(cid:7)(cid:9)9(cid:10) (cid:30)(cid:13)(cid:14)(cid:18)(cid:15)(cid:7)(cid:21)(cid:13)(cid:5)(cid:10) (cid:7)(cid:14)(cid:3)(cid:4)(cid:16)(cid:25)(cid:8)(cid:31)(cid:13)9(cid:10) (cid:15)(cid:8)(cid:21)(cid:4)(cid:12)(cid:10) (cid:15)(cid:3)(cid:7)(cid:3)(cid:13)(cid:10) (cid:11)(cid:13)(cid:14)(cid:5)(cid:13)(cid:9)(cid:3)(cid:7)(cid:3)(cid:4)(cid:8)(cid:9)9(cid:10)
0(cid:8)(cid:12)(cid:4)(cid:18)(cid:5)(cid:10)(cid:12)(cid:8)(cid:12)(cid:8)(cid:16)(cid:13)(cid:20)(cid:21)(cid:10)(cid:15)(cid:18)(cid:21)(cid:2)(cid:25)(cid:7)(cid:3)(cid:13)(cid:27)
CONTENTS
1. Introduction …………………………….. 1
2. Literature Review ………………………. 5
1. Inulinases ……………………………….. 5
2. Inulin ……………………………………. 9
3. Immobilization of inulinase …………….. 37
4. Kinetic properties of inulinase ………….. 44
5. Characterization of inulinase enzyme …… 45
3. Materials and Methods …………………. 52
1. Materials ………………………………… 52
2. Methods ………………………………… 53
4. Results ………………………………..… 65
1. Screening of the most potent inulinase/invertase
produceing …………………………… 65
2. Optimization of the fermentation parameters
affecting enzyme production …………. 66
3. Effect of pH value of the extracting solvent
(distilled water) on inulinase/ invertase recovery
from fermented wheat bran ………………... 70
5. Discussion ……………………………..… 110
6. Summary ……………………………………. 127
7. References ……………………………….… 133
i
LIST OF TABLES

TABLE PAGE
Table (1): Inulin Content (% of Fresh Weight) of 9
Some Plants; NA = Not Available,
*= Estimated Value.
Table.(2): Optimization of different parameters 59
affecting productivity:
Table (3): Screening of the most potent fungal 66
producer isolate of extracellular inulinase/
invertase enzymes.
Table (4): Effect of type of solvent, as incubation 67
media and moistening agents, on efficiency
of inulinase/ invertase production
Table (5): Effect of different moisture contents on 69
inulinase/ invertase enzymes production
using Penicillium chrysogenum
Table (6): Effect of pH value of the extracting 71
solvent (dist. Water) on inulinase/invertase
recovery from fermented P. chrysogenum–
wheat bran.
Table (7): Effect of some agroindustrial by-products 73
as carbon source on inulinase production by
P. chrysogenum:
Table (8): Effect of Organic nitrogen source on 76
inulinase enzymes production by
Penicillium chrysogenum.
Table(9): Effect of Inorganic nitrogen source on 78
inulinase enzymes production by
Penicillium chrysogenum.

ii
Table (10): Effect of different corn steep liquor 80
concentrations nitrogen content on
inulinase/ invertase
Table (11): Effect of some natural oils (0.1% w/w) 82
on inulinase/invertase production using
Penicillium chrysogenum.
Table (12): Effect of some surfactants on inulinase/ 85
invertase enzymes production using
Penicillium chrysogenum
Table (13): Effect of different incubation 88
temperatures on Inulinase production using
Penicillium chrysogenum
Table (14): Effect of different incubation periods on 90
production of inulinase/ invertase:
Table(15): Effect of Inoculum's Size on Inulinase 95
production using Penicillium chrysogenum
Table (16): Effect of some metal salts on Inulinase 94
production using Penicillium chrysogenum
Table (17): Effect of Radiation Dose on Inulinase 97
production using Penicillium chrysogenum
Table (18): Inulinase production in tray 98
Table (19): Effect of Partial Purification of 100
Inulinase/ Invertase Enzymes from
Penicillin chrysogenum using Ammonium
Sulfate
Table (20): Effect of Partial Purification of 100
Inulinase/ Invertase Enzymes from
Penicillin chrysogenum using organic
solvents

iii
Table (21): Effect of Temperature on inulinase/ 102
invertase enzymes activity. (Free enzyme)
Table (22): Effect of different incubation periods on 104
inulinase activity: check with thermal
stability
Table (23): Effect of pH on Inulinase Enzymes 106
activity.
Table (24): Effect of some metal ions on 108
inulinase/invertase enzymes activity

iv
LIST OF FIGURE

FIGURE PAGE

Fig. 1. Chemical structure of GpyFn and FpyFn
molecules in inulin-type fructans. n is the
degree of polymerization or the number of

(cid:533)-D-fructofuranose; G and F stand for

glucose and fructose, respectively; GpyFn
is (cid:302)-D-glucopyranosyl- (cid:62)(cid:533)-D-
fructofuranosyl] (n-1)-D-fructofuranoside;

and FpyFn is (cid:533)-D-fructopyranosyl-[D-
fructofur anosyl] (n-1)-D-fructofuranoside.
10
Fig. 2. Probiotic beneficial effects on human health.
Adapted from Gibson & Roberfroid
13
(1995).
39
Fig. 3. Principal methods of immobilization.
Fig. (4) : Effect of type of ,as incubation media and
moistening agents, on efficiency of enzyme
production (Ug/gds) (unit/g gram dru fermented
68
substrate)
Fig. (5): Effect of different moisture contents on
inulinase/invetase enzymes production using
70
Penicillium chrysogeuum
Fig. (6): Effect of pH value of the extracting solvent (dis-
Water) on inulinase/invertase recovery from
71
fermented P.chersogenum
Fig. (7,7b) : Effect of some a groin dustrial by-products as
carbon source on unulinase/invertase production
74-75
by P.chrysogenium
Fig. (8) Effect of a mixture of wheat bran and Jerusalem
artichore as acarbon source on inulinase/invertase
77
production by P.chrysogenum
v
Fig. (9) : Effect of organic nitrogen source on
inulinase/invertase enzymes production by
79
Penicillium chrysogenum
Fig. (10) : Effect of organic nitrogen source on
inulinase/invertase enzymes production by
81
Penicillium chrysogenum
Fig. (11) : Effect of different corn steep liquor concentrations
on (nitrogen content%) inulinase/invertase
83
enzymes by P.chrysogenum
Fig. (12) : Effect of some natural oils on inulinase/invertase
86
production using Penilillium chrysogenum
Fig. (13) : Effect of some surfactants on inulinase/invertase
enzymes production using Penicillium
88
chrysogenum
Fig. (14) : Effect of inoculum size on inulinase/invertase
92
production using Penicillium chrysogenum
Fig. (15) : Effect of different incubation temperatures on
lunlinase/invertase production using Penicillium
95
chrysogenum.
Fig. (16): Effect of Partial Purification of inulinase/invertase
enzymes from Penicillium chrysogenum using
101
Ammonium Sulfate
Fig. (17) : Effect of Partial Purification of inulinase/invertase
enzymes from Penicillium chrysogenum using
101
organic solvents
Fig. (18,a,b) : Effect of temperature on inulinase/invertase
103
enzymes activity (Imunobilized and Free enzyme)
Fig.(19a,b) Effect of thermal stability on inulinase/ invertase
105
enzymes activity (free&immobilized)
Figure (20a,b): Effect of different pH on inulinase/invertase
107
(free&immobilized)
Figure (21a,b): Effect of metalions on inulinase enzyme
109
activity (free&immobilized)

vi
Literature Review

I. Literature Review
1. Inulinases:
Inulinases constitute an important class of enzymes for
production of fructose and fructooligosaccharides, which are
extensively used in pharmaceutical and food industry. These
enzymes are potentially useful in the production of high
fructose syrups, using inulin as substrate. The production of
fructose from inulin is more advantageous than the
conventional method that uses starch, given that the reaction
using inulinase is simpler and yields products with fructose
content higher than 95%. Inulinases have also been used for
production of fructo-oligosaccharides.
Researches involving fructo-oligosaccharides have been
stimulated by the increase in the demand for healthy foods,
because the ingestion of fructoligosaccharides increases the
production of Bifidobacterium, which are the most important
bacteria of the intestinal microflora (Bender et al., 2006;
Sharma and Gill, 2007; Singh and Bhermi, 2008).
1.1 Sources of Inulinases:
Inulinase can be produced from a wide array of
organisms including plants bacteria, molds, and yeast
(Vandamme and Derycke, 1983). Dandelion, chicory and
Jerusalem artichoke have been proven to contain inulinase that
can be extracted and purified, but according to Kochhar et al.,
1999) these plant sources are not as productive as the
microbial ones, which seem to be the only source capable of
producing enough enzymes for industrial applications. For this
5