Differentiation and taxonomy of the Rock Lizards Darevskia (Saxicola) (Sauria: Lacertidae) according to morphological and molecular analyses

2013·1.3 MB·

by  Doronin, I V

Труды Зоологического института РАН
Том 317, № 1, 2013, c. 54–84
УДК 575+598.1
ДИФФЕРЕНЦИАЦИЯ И СИСТЕМАТИКА СКАЛЬНЫХ ЯЩЕРИЦ
КОМПЛЕКСА DAREVSKIA (SAXICOLA) (SAURIA: LACERTIDAE)
ПО ДАННЫМ МОРФОЛОГИЧЕСКОГО И МОЛЕКУЛЯРНОГО АНАЛИЗОВ
И.В. Доронин1*, Б.С. Туниев2 и О.В. Кукушкин3
1Зоологический институт Российской академии наук, Россия, 199034, Санкт-Петербург, Университетская наб. 1,
e-mail: [email protected]
2Сочинский национальный парк, Россия, 354000, Краснодарский край, Сочи, ул. Московская, 21, e-mail: [email protected]
3Карадагский природный заповедник НАН Украины, Украина, 98188, автономная республика Крым, Феодосия, пгт.
Курортное, ул. Науки, 24, e-mail: [email protected]
РЕЗЮМЕ
Результаты статистического анализа морфологических признаков шести распространенных на Кавказе и в
Крыму форм скальных ящериц комплекса Darevskia (saxicola), наряду с данными исследования изменчиво-
сти фрагмента гена цитохром b митохондриальной ДНК, указывают на глубокую дифференциацию внутри
этого комплекса, говорят в пользу видовой самостоятельности D. szczerbaki (Lukina, 1963) и обособленно-
сти недавно описанного таксона D. brauneri myusserica Doronin, 2011. Вместе с тем внутривидовая измен-
чивость D. brauneri (Méhely, 1909) позволяет выделить только две валидные формы подвидового статуса:
D. b. brauneri и D. b. myusserica. По нашему мнению, Lacerta saxicola darevskii Szczerbak, 1962 (= D. brauneri
darevskii) должна рассматриваться как младший синоним D. b. brauneri. Обсуждаются возможные сценарии
происхождения форм комплекса.
Ключевые слова: комплекс Darevskia (saxicola), цитохром b, филогения, систематика, Кавказ, Крым
DIFFERENTIATION AND TAXONOMY OF THE ROCK LIZARDS
DAREVSKIA (SAXICOLA) COMPLEX (SAURIA: LACERTIDAE)
ACCORDING TO MORPHOLOGICAL AND MOLECULAR ANALYSES
I.V. Doronin1*, B.S. Tuniyev2 and O.V. Kukushkin3
1Zoological institute of the Russian Academy of Sciences, Russia, 199034, St.-Petersburg, Universitetskaya Emb. 1,
e-mail: [email protected]
2Sochi National Park, Russia, 354000, Sochi, Moscowskaya str., 21, e-mail: [email protected]
3Karadagh Nature Reserve of Ukrainian National Academy of Sciences, Ukraine, 98188, Theodosiya, Kurortnoe, Nauki str.,
24, e-mail: [email protected]
ABSTRACT
The results of statistical analysis of morphological characters and the study of the cytochrome b gene variability
(mtDNA) of rock lizards of the Darevskia (saxicola) complex distributed in the Caucasus and the Crimea, have
shown significant differentiation within this complex, assuming specific independence of D. szczerbaki (Lukina,
1963) and subspecific status of recently described D. brauneri myusserica Doronin, 2011. According to our data,
within D. brauneri (Méhely, 1909) only two forms of subspecific status can be distinguished, namely D. b. brauneri
and D. b. myusserica. In our opinion, Lacerta saxicola darevskii Szczerbak, 1962 (= D. brauneri darevskii) should
be considered to be a junior synonym of D. b. brauneri. The possible scenarios of range formation in the Darevskia
(saxicola) complex are discussed.
Key words: Darevskia (saxicola) complex, cytochrome b, phylogeny, systematic, Caucasus, Crimea
*Автор-корреспондент / Corresponding author
Систематика ящериц комплекса Darevskia (saxicola) 55
ВВЕДЕНИЕ под сомнение. Вероятно, это было связано с тем,
что ранее D. clarkorum была включена в комплекс
Систематика скальных ящериц, входящих «Lacerta caucasica» (= Darevskia (caucasica))
в комплекс Darevskia (saxicola) рода Darevskia (Murphy et al. 1996).
Arribas, 1997, активно разрабатывается. На сегод- Анализ изменчивости 35 аллозимных локусов
няшний день в объеме этого комплекса принято девяти популяций всех известных на тот момент
рассматривать шесть форм: Darevskia saxicola, D. подвидов D. saxicola позволил повысить таксо-
lindholmi, D. b. brauneri, D. b. darevskii, D. [brauneri] номический статус D. lindholmi и D. brauneri до
szczerbaki и D. b. myusserica (Доронин 2011а, 2012). видового. D. lindholmi и D. saxicola s. str. рассма-
Первой из их числа c территории Кисловодска тривались как монотипические виды, а D. brauneri
Ставропольского края была описана собственно включал три подвида: D. b. brauneri, D. b. darevskii
скальная ящерица, Lacerta saxicola Eversmann, и D. b. szczerbaki. При этом выборки ящерицы
1834. Типовая серия ящерицы Браунера, L. s. Браунера и Даревского продемонстрировали ми-
brauneri Méhely, 1909 включала экземпляры, нимальные генетические различия, а у популяции
собранные на южном макросклоне Западного ящерицы Щербака были выявлены уникальные
Кавказа: по дороге между Адлером и Романов- наборы аллелей (MacCulloch et al. 2000).
ском (старое название пос. Красная Поляна), из Последней на сегодняшний день описанной
Романовска и с перевала Псеашхо (Méhely 1909). формой комплекса является мюссерская ящери-
После выделения лектотипа (Доронин 2012) ти- ца, D. b. myusserica Doronin, 2011 – узкоареальный
повой территорией этой формы следует считать эндемик, известный с приморских обрывов Мюс-
пос. Красная Поляна Краснодарского края. серской возвышенности (типовая территория) и
Единственный представитель комплекса, Гагрского карниза Абхазии (Доронин 2011а). При
обитающий за пределами Кавказского перешей- этом ранее эти популяции были отнесены к D. b.
ка (в Горном Крыму) – ящерица Линдгольма, szczerbaki (Milto et al. 2010).
L s. lindholmi. Принято считать (Щербак 1962; Примечательной является работа Соколен-
Даревский 1967; MacCulloch et al. 2000; и др.), ко (1992), в которой делается вывод о видовом
что авторами описания данной формы являются статусе скальных ящериц (Lacerta saxicola ssp.)
Ланц и Сирен (Lantz and Cyrén 1936). Проведен- из района оз. Лиманчик (= Малый Лиман, Анап-
ная таксономическая ревизия (Доронин 2012) ский р-н, Краснодарский край), традиционно
позволила установить, что в действительности относимых к D. [brauneri] szczerbaki. Кроме того,
авторство описания принадлежит Щербаку. Ти- сама D. [brauneri] szczerbaki в последние годы
повая территория L. s. lindholmi Szczerbak, 1962 по рассматривается рядом исследователей как само-
месту сбора выделенного лектотипа – г. Ялта на стоятельный вид (Туниев 2008; Акатов и др. 2009;
Южном Берегу Крыма. Туниев и др. 2009; Tuniyev and Tuniyev 2012).
В указанной работе Щербака (1962), посвя- Заметим, что еще в работе Трофимова (1981)
щенной скальным ящерицам Северного Кавказа приводятся результаты кластерного анализа 916
и Крыма, приводится и описание нового кавказ- экз. скальных ящериц, среди которых выборка
ского подвида – L. s. darevskii Szczerbak, 1962 (ти- «Lacerta saxicola szczerbaki» из Анапы показала
повая территория – пос. Ходжох, Адыгея). Спустя крайнюю морфологическую дистанцирован-
год Лукиной (1963) было опубликовано описание ность: «Выборки из Анапы и хребта Каменное
L. s. szczerbaki Lukina, 1963 с территории г. Анапа море (по-видимому, автор не смог идентифици-
Краснодарского края. ровать собранную здесь альпийскую ящерицу, D.
Аррибас (Arribas 1999), выделив скальных alpina (Darevsky, 1967) – прим. авторов) наиболее
ящериц в описанный им род Darevskia с типовым сильно отличаются друг от друга и от всех дру-
видом D. saxicola, подразделил его на ряд видо- гих выборок Lacerta saxicola, при этом различия
вых групп, среди которых была и «saxicola». В между ними превышают даже различия между
состав этой группы были включены D. saxicola, скальной и куринской (D. portschinskii (Kessler,
D. lindholmi, D. clarkorum (Darevsky et Vedmederja, 1878), – прим. авторов) ящерицами» (Трофимов
1977) и D. dryada (Darevsky et Tuniyev, 1997), при- 1981, с. 9), однако, таксономическая ревизия ком-
чем включение двух последних видов ставилось плекса не входила в задачи автора.
56 И.В. Доронин и др.
Еще одним нерешенным вопросом остаются 1999–2011 гг. на территории Ставропольского и
родственные взаимоотношения двух трудно раз- Краснодарского краев, в Кабардино-Балкарии,
личимых форм со спорным таксономическим Карачаево-Черкесии, Адыгее, Абхазии, а также в
статусом – D. b. brauneri и D. b. darevskii (Туниев Крыму.
2005). Результаты проведенных нами морфоло- При описании внешней морфологии скальных
гического и хорологического (с применением ящериц за основу была взята схема из монографии
ГИС-технологий) анализов показали высокое Даревского (1967), дополненная рядом призна-
морфологическое сходство этих подвидов при ков, предложенных другими авторами (Туниев и
значительном перекрывании их потенциальных Островских 2006; Arnold et al. 2007). Промеры, мм:
ареалов (Доронин 2011а, б). L. – длина тела от кончика морды до клоакальной
Анализ филогении комплекса Darevskia щели; Pil. – расстояние от кончика морды до за-
(saxicola) по данным изучения изменчивости днего края теменных щитков; Lt. c. – наибольшая
фрагмента митохондриального гена цитохром ширина головы на уровне барабанных щитков; Al.
b (cyt b) был дан в работе Фу (Fu 1999). Однако c. – высота головы на уровне затылочного щитка.
выводы этого автора носят предварительный Фолидоз: G. – число горловых чешуй по линии
характер (например, отнесение D. alpina и D. между серединой воротника и соединением ниж-
praticola к кладе «saxicola»), а построенные фило- нечелюстных щитков; Sq. – число спинных чешуй
генетические древа полностью не разрешают в одном поперечном ряду вокруг середины тела;
филогенетические связи между исследованными P. fm. – число бедренных пор (слева – справа);
представителями рода Darevskia. Вероятными Lab. – число верхнегубных щитков (слева – спра-
причинами неоднозначности выводов является ва); F. l. – число верхнегубных щитков спереди
ограниченный материал, использованный в дан- от подглазничного; S. l. – число нижнегубных
ной работе, его происхождение из зон гибриди- щитков (слева – справа); Mas. – наличие и размер
зации, а также возможные ошибки в видовой и центральновисочного щитка; Mas./Tym. – число
подвидовой идентификации ящериц. чешуй в наиболее узком месте между централь-
Нерешенным остался вопрос таксономическо- новисочным и барабанным щитками (слева –
го взаимоотношения представителей комплекса справа); Sup. gran. – число гранул между верхне-
и при использовании молекулярных маркеров ресничными и надглазничными щитками (сле-
RAPD (Рябинина 1999; Гречко 2000). ва – справа), а также наличие разрывов в их ряду;
Отмеченные разногласия свидетельствуют об Supracil. – число чешуй вдоль края теменного за
актуальности продолжения исследований фило- верхневисочным щитком; Col. – число увеличен-
генетических взаимоотношений между членами ных щитков в горловом воротнике; Pr. an.1 (Scuta
комплекса Darevskia (saxicola) с использованием preanalia) – число прианальных щитков в первом
как классических методов изучения внешней ряду; P. an.2 – число увеличенных прианальных
морфологии, так и современных молекулярно- щитков. В связи с тем, что 79% особей имели ре-
генетических маркеров. генерированный или поврежденный хвост, такие
промеры, как длина нерегенерированного хвоста
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ (L. cd.) и общая длина тела (L. tot. = L. + L. cd.) не
были включены в статистический анализ.
Морфологический анализ. При изучении Все промеры выполнены первым автором с
внешней морфологии были использованы 237 эк- использованием штангенциркуля с точностью до
земпляров ящериц комплекса Darevskia (saxicola) 0.1 мм; изучение фолидоза произведено под стере-
из коллекции Зоологического института РАН оскопическим микроскопом МСП-1. Полученные
(Санкт-Петербург) (ZIN), Зоологического музея данные обрабатывали отдельно для самок и сам-
Национального научно-природоведческого музея цов с использованием программы Statistica 6.0.
НАН Украины (Киев) (NMNH), Сочинского на- В качестве внешней группы при кластерном
ционального парка (Сочи) (SNP) и Зоологическо- анализе была использована луговая ящерица
го музея Ставропольского государственного уни- Darevskia p. praticola (Eversmann, 1834): ZIN
верситета (Ставрополь) (ЗМСГУ) (Табл. 1; Рис. 22125, 15 экземпляров, ZIN 23562, 10 экземпля-
1, 2). Полевые наблюдения и сборы проводили в ров, Ставропольский край, Россия.
Систематика ящериц комплекса Darevskia (saxicola) 57
Таблица 1. Коллекционные экземпляры ящериц комплекса Darevskia (saxicola), использованные при морфологическом анализе.
Table 1. Specimens of lizards of Darevskia (saxicola) complex, used in the morphological analysis.
Номер точки
Кол-во
на Рис. 1 и 2
Коллекционный экз. Дата сбора
(Number Место сбора Коллектор
номер (Сollection (Number (Date of
of points (Locality) (Сollector)
number) of speci- collection)
on Figs. 1
mens)
and 2)
Darevskia saxicola
Крыжановский,
Россия, Карачаево-Черкесия, Карачаевский р-н, пос. Коста
Богданов-Катьков
16 ZIN 16912 10 Хетагурова (Russia, Karachay-Cherkessia, Karachai District, 8.08.1915
(Kryzhanovsky,
Costa Khetagurov Village)
Bogdanov-Kat’kov)
Россия, Ставропольский кр., Предгорный р-н, ущелье К.Ю. Лотиев,
р. Аликоновка выше пос. Зеленогорский (Russia, Stavropol К.Д. Мильто
ZIN 23563 17 4.07.2005
Territory, Predgornyi District, gorge Alikonovka River, near (K.J. Lotiev,
Zelenogorsk Village) K.D. Milto)
17
И.В. Доронин,
Россия, Ставропольский кр., г. Кисловодск, южный отрог
М.А. Доронина
ZIN 25729-25732 4 хребта Боргустан (Russia, Stavropol Territory, Kislovodsk, 27.07.2009
(I.V. Doronin,
southern spur of Borgustan Ridge)
M.A Doronina)
Darevskia lindholmi
ZIN 23082 6 18.07.1879
Украина, Крым, Симферопольский р-н, с. Кизил-Коба
18 (=Красные пещеры) (Ukraine, Crimea, Simferopol District,
ZIN 23083 1 Kizil-Koba (=Krasnye peshery) Village) 18.08.1879 К.Ф. Кесслер
(K.F. Kessler)
Украина, Крым, Бахчисарайский р-н, с. Яни-Сала
21 ZIN 23086 1 (=Новополье) (Ukraine, Crimea, Bakhchisarai district, 13.05.1878
Jani-Sala (=Novopol’e) Village)
Украина, Крым, Симферопольский р-н, с. Карагач
Кушакевич
19 ZIN 3137 1 (=Кизиловка) (Ukraine, Crimea, Simferopol District, 1864
(Kushakevich)
Karagach (=Kizilovka) Village)
Украина, Крым, Севастопольский горсовет, с. Байдары
26 ZIN 16345 3 (=Орлиное) (Ukraine, Crimea, Sevastopol City Council, 14.06.1930
Baidary (=Orlinoe) Village) С.А. Чернов
(S.А. Chernov)
Украина, Крым, Бахчисарайский р-н, каньон р. Розовая
22 ZIN 17082 7 (Ukraine, Crimea, Bakhchisarai District, Canyon Rozovaya 08.1949
River)
Украина, Крым, Ялтинский горсовет, окр. г. Ялта
23 NMNH SR 2057 1 18.05.1961
(Ukraine, Crimea, Yalta City Council, near Yalta)
Н.Н. Щербак
(N.N. Szczerbak)
NMNH SR 2104 2 10.08.1961
Украина, Крым, Ялтинский горсовет, г. Алупка
24
(Ukraine, Crimea, Yalta City Council, Alupka)
К.Ф. Кесслер
ZIN 23085 2 18.07.1879
(K.F. Kessler)
Украина, Крым, Ялтинский горсовет, д. Мухалатка
Агеенко
25 ZIN 9628 2 (=пос. Санаторное) (Ukraine, Crimea, Yalta City Council, 06.1900
(Ageenko)
Mukhalatka (=Sanatornoe) Village)
Украина, Крым, г. Севастополь, мыс Фиолент
27 ZIN 20699 2 10.08.1996
(Ukraine, Crimea, Sevastopol, Fiolent Cape)
С.Н. Литвинчук
Украина, Крым, Алуштинский горсовет, ниже Ангарского (S.N. Litvinchuk)
перевала и Кутузовского вдхр.
20 ZIN 22626 1 6.08.1997
(Ukraine, Crimea, Alushta City Council, below the Angarskyi
Pass and Kutuzovskoe Reservoir)
58 И.В. Доронин и др.
Таблица 1. Продлжение
Table 1. Continued
Номер точки
Кол-во
на Рис. 1 и 2
Коллекционный экз. Дата сбора
(Number Место сбора Коллектор
номер (Сollection (Number (Date of
of points (Locality) (Сollector)
number) of speci- collection)
on Figs. 1
mens)
and 2)
Darevskia brauneri brauneri
Абхазия, Ясочка близ Сухума Л.А. Ланц
12 ZIN 17066 7 7.06.1914
(Abkhazia, Yasochka near Sukhum) (L.A. Lantz)
Россия, Краснодарский кр., Адлерский р-н, окр.
7 ZIN 17439 14 пос. Красная Поляна (Russia, Krasnodar Territory, 10.07.1961
Adler District, near Krasnaya Polyana)
Абхазия, Гулрыпшский р-н, окр. с. Цебельда (=Цабал)
13 ZIN 18380 13 29.07.1973
(Abkhazia, Gulripsh District, near Tsebelda (= Tsabal) Village)
И.С. Даревский
(I.S. Darevsky)
Грузия, Рача-Лечхуми и Квемо-Сванети, пос. Чихареши
14 ZIN 19307 7 (Georgia, Racha-Lechkhumi and Kvemo Svaneti, Chihareshi 9.08.1979
Village)
Южная Осетия, Дзауский р-н, оз. Эрцо
15 ZIN 19433 10 7.08.1979
(South Ossetia, Dzau District, Ertso Lake)
Абхазия, Гудаутский р-н, оз. Рица М.А. Бакрадзе
9 ZIN 19492 8 29.07.1980
(Abkhazia, Gudauta District, Riza Lake) (M.A. Bakradze)
Абхазия, окр. г. Сухум Н.С. Дороватовский
12 ZIN 23078, 23088 5 16.08.1912
(Abkhazia, near Sukhum) (N.S. Dorovatovsky)
Россия, Краснодарский край, Адлерский р-н, скальные И.В. Доронин,
обнажения долины р. Мзымта, район Красной Поляны М.А. Доронина
7 ZIN 25726-25728 3 20.08.2009
(Russia, Krasnodar Territory, Adler District, rocky outcrops (I.V. Doronin,
of Mzymta Valley, near Krasnaya Polyana M.A Doronina)
Абхазия, Гагрский р-н, окр. пос. Гантиади (=Цандрыпш),
6,7,
ZIN 25805-25807 3 ущелье р. Хашупса (Abkhazia, Gagra District, near Gantiadi
10.10.1977
(= Tsandrypsh) Village, gorge of Hashupsa River)
Л.Я. Боркин
8
(L.J. Borkin)
Абхазия, Гагрский р-н, ущелье р. Хашупса, крепость
ZIN 25815 1 Хашупса (Abkhazia, Gagra District, gorge of Hashupsa River, 10.10.1977
fortress Hashupsa)
Абхазия, Гудаутский р-н, ущелье р. Юпшара (=Юпсара)
Б.С. Туниев
9 SNP 1194 7 (Abkhazia, Gudauta District, gorge of Yupshara (= Yupsara) 25.07.2001
(B.S. Tuniyev)
River)
Darevskia brauneri darevskii
Россия, Адыгея, Майкопский р-н, пос. Никель Г.П. Лукина
5 ZIN 20109 11 06.1976
(Russia, Adygea, Maikop District, Nickel Village) (G.P. Lukina)
И.В. Доронин,
Россия, Краснодарский край, г. Туапсе М.А. Доронина
3 ZIN 25735-25741 7 18.08.2009
(Russia, Krasnodar Territory, Tuapse) (I.V. Doronin,
M.A Doronina)
Экспедиция ИМБ РАН
Россия, Краснодарский край, окр. г. Сочи (expedition of the
6 ZIN 25833-25835 3 1998
(Russia, Krasnodar Territory, near Sochi) Institute of Molecular
Biology)
NMNH Re 1,
Россия, Адыгея, Майкопский р-н, ст-ца Ходжох Н.Н. Щербак
1/16, 1/22, 1/31, 6 7-8.06.1961
(Russia, Adygea, Maikop District, Hodzhoh Village) (N.N. Szczerbak)
4 1/33,1,62
ЗМСГУ 2533/R- Россия, Адыгея, Майкопский р-н, ущелье р. Руфабго И.В. Доронин,
2 26.09.2004
1000, 2534/R-1001 (Russia, Adygea, Maikop District, gorge Rufabgo River) (I.V. Doronin)
Систематика ящериц комплекса Darevskia (saxicola) 59
Таблица 1. Продлжение
Table 1. Continued
Номер точки
Кол-во
на Рис. 1 и 2
Коллекционный экз. Дата сбора
(Number Место сбора Коллектор
номер (Сollection (Number (Date of
of points (Locality) (Сollector)
number) of speci- collection)
on Figs. 1
mens)
and 2)
Darevskia brauneri myusserica
Л.А. Ланц
ZIN 17053 1 1911
10 Абхазия, г. Гагры (Abkhazia, Gagra) (L.A. Lantz)
ZIN 17913 10 28.10.1937
Л.И. Хозацкий
ZIN 17914 11 15.06.1937
(L.I. Khosatzky)
ZIN 17981 3 22.09.1937
М.В. Пестов,
К.Д. Мильто
ZIN 24397 1 08.2006
(M.V. Pestov,
Абхазия, Гагрский р-н, приморские обрывы Мюссерской K.D. Milto)
11 возвышенности
(Abkhazia, Gagra District, cliffs of Myussera Upland) О.С. Безман-Мосейко
ZIN 25816-25818 3 5-6.07.2008
(O.S. Bezman-Moseyko)
И.В. Доронин,
17, М.А. Доронина
ZIN 25964-25971 7
19.07.2010 (I.V. Doronin,
M.A Doronina)
Darevskia [brauneri] szczerbaki
К.Д. Мильто,
М.Г. Парамонов
ZIN 21773 9 2,3.10.2000
Россия, Краснодарский край, г. Анапа (K.D. Milto,
1
(Russia, Krasnodar Territory, Anapa) M.G. Paramonov)
ZIN 25747-25750 4 14.08.2009 И.В. Доронин,
М.А. Доронина
ZIN 20547 2 Россия, Краснодарский крaй, г. Новороссийск, c. Абрау- 12.07.2010 (I.V. Doronin,
Дюрсо, окр. оз. Малый Лиман (=Лиманчик) M.A Doronina)
2
(Russia, Krasnodar Territory, Novorossiysk, Abrau-Durso
А.В. Соколенко
ZIN 25962, 25963 14 Village, near Malyi Lyman (=Limanchik) Lake) 06-08.1990
(A.V. Sokolenko)
Молекулярно-генетический анализ. При изу- кации cyt b были разработаны праймеры, спец-
чении филогении скальных ящериц комплекса ифичные к скальным ящерицам: прямой LgLu – 5’
Darevskia (saxicola) было использовано 27 эк- AACCRCYGTTGTMTTCAACTA 3’ и обратный
земпляров (18 локалитетов) из которых нукле- RtHr – 5’ GGYTTACAAGACCAGYGCTTT 3’.
отидные последовательности от 22 экземпляров При постановке ПЦР объем реакционной смеси
были получены первым автором в ходе работы и (20 мкл) содержал 2 мкл ДНК (100нг/мкл); 10 mM
депонированы в Генбанк (JX 041604 – JX 041625), каждого праймера; 10 x ПЦР буфера (Pack.size
а остальные пять экземпляров – взяты из Генбан- 5 мкл); 2.5 mM MgCl2; 0.25 mM dNTP (для каждого
ка (Табл. 2; Рис. 3, 4). В качестве внешних групп из олигонуклеотидов); 0.2 ед/мкл Taq-полимеразы
при филогенетическом анализе были взяты по- (Helicon) и ddHO до необходимого объема. ПЦР
2
следовательности cyt b экземпляров D. praticola проводили в термоциклере ABI 2700 (Applied
(LPU 88612) и армянской ящерицы, D. armeniaca Biosystem) по следующему протоколу: предвари-
(Méhely, 1909) (AF 147799). тельная денатурация 5 мин при 94 °С, последую-
Выделение ДНК из мышц и печени, фиксиро- щие 30 циклов (15 сек при 94 °С, 30 сек при 50 °С,
ванных в 70% и 96% этаноле, проводили солевым 1 мин при 72 °С) и конечная элонгация 5 мин при
методом (NaCl) (Miller et al. 1988). Для амплифи- 72 °С. Продукты амплификации визуализировали
60 И.В. Доронин и др.
Рис. 1. Пункты сбора экземпляров, использованных при морфологическом анализе: Darevskia saxicola (белый круг), D. b. brauneri
(черный квадрат), D. b. darevskii (черный круг), D. b. myusserica (белый треугольник) и D. [brauneri] szczerbaki (белый ромб) на
Кавказе (нумерация соответствует таковой в Табл. 1).
Fig. 1. Сollection sites of specimens used in the morphological analysis: Darevskia saxicola (white circle), D. b. brauneri (black square),
D. b. darevskii (black circle), D. b. myusserica (white triangle), and D. [brauneri] szczerbaki (white diamond) in the Caucasus (numbering
corresponds to that in Table 1).
с помощью электрофореза в 1.5% агарозном геле с ду ближайшего соседа (NJ), минимальной эволю-
добавлением бромистого этидия и очищали с ис- ции (ME) и максимального правдоподобия (ML)
пользованием набора Omnix согласно инструкции (2-х параметрическая модель Кимуры) с учетом
производителя. Секвенирование проводили в обе транзиций, трансверсий и всех позиций кодонов.
стороны с использованием тех же праймеров, что и Устойчивость узлов филогенетических древ оце-
для амплификации. Определение последователь- нивали по значениям бутстреп-поддержек (1000
ностей нуклеотидов cyt b проводили на автомати- псевдорепликаций). Межгрупповые генетические
ческом секвенаторе ABI 3130 (Applied Biosystem) дистанции вычисляли в той же программе.
с использованием наборов BigDye v.3.1. в Лабо-
ратории молекулярно-генетической систематики РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
животных Зоологического института РАН. Ну-
клеотидные последовательности выравнивали с Анализ морфологических признаков. Ре-
помощью программы BioEdit v. 7.0 (Hall 1999) по зультаты кластерного анализа средних значений
алгоритму Clustal W и редактировали вручную. морфометрических признаков представителей
Филогенетическая реконструкция выполнена в комплекса (Табл. 3) показали, что выборки
программе MEGA 5.0. (Tamura et al. 2007) по мето- самок образуют три кластера: наиболее дистант-
Систематика ящериц комплекса Darevskia (saxicola) 61
Рис. 2. Пункты сбора экземпляров, использованных при морфологическом анализе: Darevskia lindholmi (белый квадрат) в Крыму
(нумерация соответствует таковой в Табл. 1).
Fig. 2. Сollection sites of specimens used in the morphological analysis: Darevskia lindholmi (white square) in the Crimea (numbering
corresponds to that in Table 1).
ное положение заняла D. saxicola; D. [brauneri] дополнительных щитков, лежащих по обе сто-
szczerbaki образовала кластер с D. b. myusserica, а роны от затылочного и межтеменного щитков,
D. lindholmi – с D. b. darevskii и D. b. brauneri. При либо дробление последнего, крупных или очень
этом наибольшее сходство продемонстрировали крупных центральновисочных щитков. Соотно-
две последних формы (Рис. 5 A). Картина класте- шение встречаемости этих признаков у таксонов
ризации самцов не совпадает с таковой для самок: комплекса Darevskia (saxicola) на Кавказе значи-
D. saxicola вошла в один кластер с D. [brauneri] тельно различается. Наименее часто указанные
szczerbaki, тогда как D. b. myusserica образовала состояния признаков проявляются у D. saxicola,
самостоятельную линию, войдя в один кластер с а наиболее – у D. b. myusserica. Очень близкими
D. lindholmi, D. b. darevskii и D. b. brauneri. Как и по этим признакам являются D. b. brauneri и D. b.
в предыдущем случае, минимальные дистанции darevskii (Доронин 2011б).
продемонстрировали D. b. darevskii и D. b. brauneri Области, занимаемые исследованными форма-
(Рис. 5 B). ми в пространстве двух первых дискриминантных
Ранее нами была изучена встречаемость функций, в значительной мере перекрываются
некоторых диагностических признаков чешуй- (Рис. 6), а в целом полученные результаты свиде-
чатого покрова у представителей комплекса, тельствуют о низкой степени морфологической
в частности – наличие разрывов в ряду между обособленности сравниваемых выборок, но при
верхнересничными и надглазничными щитками, этом наименьшую обособленность продемон-
62 И.В. Доронин и др.
Таблица 2. Коллекционные Экземпляры ящериц комплекса Darevskia (saxicola), использованные при молекулярно-генетическом
анализе.
Table 2. Specimens of lizards of Darevskia (saxicola) complex used in molecular genetic analysis.
Номера
точек на Число
Коллекци- Номер в
Рис. 3 и 4 экз. Дата сбора
онный номер Генбанке Группа Коллектор
(Number (Number Место сбора (Locality) (Date of col-
(Сollection (Number in (Group) (Сollector)
of points of speci- lection)
number) GeneBank)
on Fig. 3 mens)
and 4)
Darevskia saxicola
Россия, Ставропольский край,
12 AF 206180 G 1 г. Кисловодск (Russia, Stavropol
Territory, Kislovodsk)
Darevskia lindholmi
Украина, Крым, Феодосийский
горсовет, побережье Карадагского
JX 041604-JX 14.08.2009,
18 TS 2556-2557 A 2 заповедника (Ukraine, Crimea, Feodosia
041605 12.11.2010
City Council, coast of Karadag Nature
Reserve)
Украина, Крым, Феодосийский
горсовет, окр. пос. Краснокаменка,
JX 041606-JX Кизилташский монастырь (Ukraine,
17 TS 2558-2561 A 4 16.09.2010
041609 Crimea, Feodosia City Council, near
Krasnokamenka Village, Kiziltashsky
Monastery)
Украина, Крым, Белогорский р-н, окр.
с. Белая Скала, гора Ак-Кая (Ukraine, O.В. Кукушкин
16 TS 2555 JX 041610 A 1 17.06.2005
Crimea, Belogorsk District, near Belaya (O.V. Kukushkin)
Skala Village, Ak-Kaya Mountain)
Украина, Крым, Ялтинский горсовет,
южная кромка Ай-Петринской яйлы
15 TS 2552 JX 041611 A 1 над мысом Ай-Тодор (Ukraine, Crimea, 28-29.08.2004
Yalta City Council, southern slope of
the Ai-Petri Yayla of Ai-Todor Cape)
Украина, Крым, г. Севастополь,
западный берег Балаклавской бухты,
JX 041612-JX высоты Кая-Баш близ Псилерахского
14 TS 2553-2554 B 2 25.05.2007
041613 карьера (Ukraine, Crimea, Sevastopol,
western shore of Balaklava Bay, Kai-Bash
height near Psilerahsky quarry)
Украина, Крым, г. Севастополь,
южный берег Гераклейского п-ова,
13 AF 206177 B 1 мыс Фиолент (Ukraine, Crimea, С.Н. Литвинчук
Sevastopol, southern coast of
Gerakleysky Peninsula, Fiolent Cape)
Darevskia brauneri brauneri
Россия, Краснодарский край,
Адлерский р-н, скальные обнажения И.В. Доронин,
долины р. Мзымта, район Красной М.А. Доронина
8 ZIN 25728 JX 041619 F 1 20.08.2009
Поляны (Russia, Krasnodar Territory, (I.V. Doronin,
Adler District, rocky outcrops of Mzymta M.A Doronina)
Valley, near Krasnaya Polyana
Абхазия, Гудаутский р-н, оз. Рица М.А. Бакрадзе
9 ZIN 19492 JX 041616 D 1 29.07.1980
(Abkhazia, Gudauta District, Riza Lake) (M.A. Bakradze)
Абхазия, Сухумский р-н, верховья р. О.С. Безман-
Гумиста, хребет Ашамхвара (Abkhazia, Мосейко
10 TS 2257 JX 041615 D 1 10.07.2008
Sukhumi District, headwater Gumista (O.S. Bezman-
River, Ashamhvara Ridge) Moseyko)
Систематика ящериц комплекса Darevskia (saxicola) 63
Таблица 2. Продлжение
Table 2. Continued
Номера
точек на Число
Коллекци- Номер в
Рис. 3 и 4 экз. Дата сбора
онный номер Генбанке Группа Коллектор
(Number (Number Место сбора (Locality) (Date of col-
(Сollection (Number in (Group) (Сollector)
of points of speci- lection)
number) GeneBank)
on Fig. 3 mens)
and 4)
Darevskia brauneri darevskii
Россия, Краснодарский край,
г. Геленджик, Мыс Идокопас, окр.
Д.А. Мельников
3 ZIN 22217.1 JX 041620 F 1 с. Криница (Russia, Krasnodar Territory, 9, 10.08.2001
(D.A. Melnikov)
Gelendzhik, Idokopas Cape, near Krynica
Village)
И.В. Доронин,
Россия, Краснодарский край, г. Туапсе М.А. Доронина
4 ZIN 25735 JX 041618 E 1 18.08.2009
(Russia, Krasnodar Territory, Tuapse) (I.V. Doronin,
M.A Doronina)
Россия, Краснодарский край,
Лазаревский р-н, микрорайон Дагомыс
5 AF 206181 F 1 (Russia, Krasnodar Territory,
Lazarevskoe, District, Dagomys
Microdistrict)
Россия, Краснодарский край, окр.
6 AF 206179 F 1 г. Сочи (Russia, Krasnodar Territory,
Sochi)
Россия, Республика Адыгея, К.Д. Мильто,
Майкопский р-н, пос. Гузерипль С.А. Калябина
7 TS 377 JX 041617 E 1 4.08.2000
(Russia, Adygea, Maikop District, (K.D. Milto,
Guzeripl Village) S.A. Kalyabina)
Darevskia brauneri myusserica
Абхазия, Гагрский р-н, приморские О.С. Безман-
обрывы Мюссерской возвышенности Мосейко
11 ZIN 25818 JX 041614 C 1 6.07.2008
(Abkhazia, Gagra District, cliffs (O.S. Bezman-
of Myussera Upland) Moseyko)
Darevskia [brauneri] szczerbaki
AF 206178
Россия, Краснодарский край, г. Анапа
1 H 2
(Russia, Krasnodar Territory, Anapa)
ZIN 25750 JX 041621 14.08.2009
Россия, Краснодарский крaй, И.В. Доронин,
г. Новороссийск, c. Абрау-Дюрсо, М.А. Доронина
ZIN 25962– JX 041622-JX окр. оз. Малый Лиман (=Лиманчик) (I.V. Doronin,
2 H 2 12.07.2010
25963 041623 (Russia, Krasnodar Territory, M.A Doronina)
Novorossiysk, Abrau-Durso Village,
near Malyi Lyman (=Limanchik) Lake)
Россия, Краснодарский край,
г. Геленджик, мыс Идокопас, окр.
JX 041624-JX Д.А. Мельников
3 ZIN 22217.2–3 H 2 с. Криница (Russia, Krasnodar Territory, 9, 10.08.2001
041625 (D.A. Melnikov)
Gelendzhik, Idokopas Cape, near Krynica
Village)
Примечание. TS – коллекция образцов тканей ZIN.
Note. TS – collection of tissue samples of ZIN.